Физиологически активные полимеры - Платэ Н.А.
Скачать (прямая ссылка):
Общая методология создания целеузнающих ФАП с противоопухолевым действием описана в [26]. Противоопухолевые ФАП присоединяют либо непосредственно к опухоль-специфиче-ским антителам или к менее антигенным и менее объемистым их F(ab)- или F(ab) 2-фрагментам, либо к промежуточному полимеру-носителю, с которым затем связываются антитела. При этом желательно активировать функциональные группы ФАВ (например, карбоксильные группы метотрексата переводят в оксисукцинимидные эфиры), чтобы избежать сшивания антител. С той же целью для связывания антител с полимером-носителем, особенно если это белок, предпочтительны гетеро-бифункциональные сшивающие агенты (см. гл. 5). В ходе присоединения ФАВ к антителам последние могут потерять свою иммунологическую активность как в результате модификации по узнающим центрам, так и вследствие изменения нативной конформации. Во избежание этого предложено сорбировать антитела на иммобилизованном на твердом носителе ФАВ, проводить ковалентное связывание, а потом десорбировать продукт реакции. В результате получают конъюгаты с максимальным содержанием ФАВ при минимальной потере иммунологической активности. При использовании /г(яЬ)-фрагментов, связывание ФАВ удобно осуществлять через сульфгидрильные группы белка. Поскольку таких групп немного, то целесообразно применять промежуточный полимер (поли^-лизин, поли-?-глута-миновую кислоту, декстран и их производные). Этим приемом может быть значительно повышено содержание ФАВ в конъюгате, однако иммунологическая активность иногда падает за счет экранирования белйа полимером. Введение «вставки» между белком и полимером частично улучшает ситуацию.
Получение антител с селективным сродством к клеткам-мишеням представляет собой серьезную проблему. Развитие гиб-ридомной техники позволяет получать в необходимых количествах антитела к определенным макромолекулам или гаптенам на носителях. Однако выбор высоко специфических антигенов клеток-мишеней достаточно сложен. Антитела к ним должны быть моноспецифичны и проявлять минимальные перекрестные взаимодействия с другими антигенами, доступными для ФАП в ходе его транспорта к органу-мишени. Выполнить это требование трудно. Поэтому, а также по причинам, указанным выше (экранирование иммуноглобулинов полимером, возможная ан-тигенность антител на полимере и т. д.), иммунологическое распознавание, по-видимому, не может стать универсальным средством для целевого транспорта ФАП.
Удачной альтернативой иммунологическому распознаванию может оказаться рецепция связанных с полимерами гормонов, которые имеют рецепторы, расположенные на клеточной мембране. Наличие и количество таких рецепторов часто зависят от состояния клетки. Этот факт может быть использован для
создания обратной связи между состоянием клетки и ее взаимодействием с ФАП. После связывания с рецепторами ФАП подвергается рецептор-медиируемому эндоцитозу и таким путем попадает в клетку. ФАП, содержащие небелковые гормоны, устойчивее и дешевле, чем ФАП с антителами, и возможность возникновения антигенности здесь меньше. Кроме гормонов могут быть использованы и другие вещества (например, а-фето-протеин).
В целом проблема целенаправленного транспорта ФАП в клетки-мишени или орган-мишень еще не имеет практически приемлемого решения, хотя различные пути, ведущие к этой цели, обоснованы теоретически и проверены экспериментально. По всей вероятности, биоспецифическое узнавание поверхности клеток-мишеней и рецептор — медиируемый эндоцитоз — те процессы, которые будут использованы на практике. Выбор типа лигандов («векторов») зависит от конкретной задачи.
Если проблему высокоспецифического транспорта ФАВ в клетки-мишени удастся решить хотя бы на нескольких практически важных примерах, то откроется путь к принципиально новому подходу к созданию лекарственных средств. Существующие лекарственные средства специфичны по отношению к определенным рецепторам (этим обусловлено их полезное действие), но распределяются в организме в соответствии с их физико-химическими свойствами. Замена рецепторной специфичности высокой специфичностью к определенным органам позволит резко снизить требования к разнообразию лекарств и откроет пути к лекарственной терапии, отличной от терапии, применяемой сегодня [30]. Переход к ФАП позволяет сделать важные шаги в этом направлении вследствие их органиченного и поддающегося регулированию распределения в организме, мало зависящего от характера присоединенных к полимеру ФАВ.
2.5. ПРОБЛЕМА БИОДЕСТРУКТИРУЕМОСТИ
Полимеры, как и низкомолекулярные вещества, будучи введенными в организм, могут вести себя по-разному. Во-первых, они могут довольно быстро, быстрее чем за сутки, покинуть организм через почки без каких-либо изменений. Во-вторых, они могут отложиться во внутренних органах и тканях и затем постепенно выделяться из них в течение недель и месяцев, а иногда оставаться там на годы. В этом случае велика вероятность возникновения патологических процессов. В-третьих, некоторые полимеры могут достаточно быстро метаболизироваться в организме (подвергаться бмодеструкции), и образовавшиеся фрагменты невысокой М выведутся через почки.
