Физиологически активные полимеры - Платэ Н.А.
Скачать (прямая ссылка):
во
по-видимому, лишь два случая успешного внутриопухолевого введения животным растворимых ФАП —конъюгатов дауномицина с антифибриновыми антителами и конъюгатов митомицина С с сукцинилированным димером конканавалина А [26] - В обоих случаях закрепление конъюгатов в месте введения происходило за счет биоспецифических, а не ковалентных взаимодействий.
Для ФАП, действующих внутри клетки, первые два уровня селективности достигаются еще и изменением способа проник-новення внутрь клеток. Клетки, способные к усиленному эндо-цитозу (опухолевые клетки), поглощают больше ФАП, чем прочие. Другой фактор, действующий в том же направлении, — повышенный эндоцитоз полимеров определенной структуры, например полианионов или белков. Такие полимеры являются хорошими носителями для внутриклеточно действующих ФАВ и позволяют достигнуть второго уровня селективности. Препятствием на пути использования высоко эндоцитабельных носителей является их повышенный захват ретикуло-эндотелиальной системой. Однако он может быть уменьшен удачным выбором места введения ФАП так, чтобы полимер сначала переносился бы кровотоком в орган-мишень, а затем уже в печень.
Третий уровень селективности заключается в распознавании ФАП единичных типов клеток и в специфическом взаимодействии с ними. Процесс распознавания может иметь место на уровне клеточной мембраны, после чего ФАП либо действует на поверхности клетки, либо проникает в нее посредством одного из видов эндоцитоза. Для специфического распознавания полимер-носитель должен содержать лиганды («векторы»), взаимодействующие с элементами поверхности клеток нужного вида. Сам процесс очень напоминает биоспецифическую хроматографию, осуществляемую in vivo.
Каковы бы ни были распознающие свойства полимера-носи-теля, ФАП не должен статистически поглощаться клетками, с которыми он вступает в контакт после парэнтерального введения. Прежде всего это относится к клеткам ретикуло-эндотелиальной системы. Поэтому повышенная эндоцитабельность носителя в данном случае скорее вредна, чем полезна. Пока известны лишь немногие простые структуры, входящие в состав полимеров и обеспечивающие селективное сродство к клеткам определенного вида [27]. Так, катионные группы способствуют сорбции полимеров на поверхности клеток, причем возможна определенная селективность в зависимости от величины отрицательного заряда клеточной поверхности (подобие ионообменной хроматографии). Сульфоксидные и формамидные группы способствуют проникновению полимеров через мембраны, в частности через кожу [2], так же как и поверхностноактивные фрагменты, хотя селективность этих процессов выражена слабо. Поэтому для распознавания желательно использовать не чисто химические, а биоспецифические процессы, такие как ре-
акции антиген — антитело и гормон — рецептор. В качестве распознающих детерминантов в этом случае могут быть использованы антитела к антигенам клеточной поверхности и пептидные гормоны, например а-меланотропин [28], которые взаимодействуют с мембранами некоторых типов клеток, а также и другие лиганды. При конструировании «узнающей» части ФАП необходимы данные о химической и иммунологической специфичности клеток органа-мишени с целью выбора необходимых лигандов для присоединения к полимеру-носителю. В свою очередь некоторые клетки могут специфично эндоцитировать за счет соответствующих рецепторов полимеры с определенными лигандами. Так, гепатоциты весьма специфично эндоцитируют десиалированные гликопептиды с концевыми галактозными остатками. Этот вид эндоцитоза медиируется соответствующими рецепторами. Таким образом, фактор селективности связан как со свойствами полимера, так и со свойствами клеточных мембран.
Описан еще ряд простых лигандов («векторов»), способных обеспечивать транспорт полимеров в определенные клетки. Например, концевые остатки L-фукозы, специфичны для пиноци-тотических рецепторов макрофагов, лактозаминированный альбумин направляет связанные с ним ФАВ в гепатоциты, а альбумин, связанный с б-фосфо-сс-О-маннопиранозидом, распознается системой поглощения лизосомальных ферментов фибробластов. Для селективного транспорта ФАВ в макрофаги предложены олиголизины, несущие остатки D-галактозы. Такие распознающие системы относительно просты, устойчивы и не анти-генны. Они могут быть введены в ФАП в требуемом количестве. Однако достаточно широкий набор подходящих сахаридных или гликопептидных лигандов для направления ФАВ в разные органы пока отсутствует. Среди потенциальных дифференцирующих агентов, в принципе пригодных для использования в ФАП, следует отметить также лектины, элементы вирусов, обусловливающие первую стадию инфекции, а также фрагменты токсинов, ответственные за клеточную фиксацию и проникновение внутрь клетки [29].
Скорость эндоцитоза после закрепления полимера на поверхности клетки существенно влияет на дальнейшую судьбу ФАП. Тип антигенов, с которым реагируют «узнающие» клетку антитела, играет решающую роль в скорости их поглощения при эндоцитозе. Антитела против антигенов плазматической мембраны остаются на поверхности клеток значительно дольше, чем антитела против лизосомальных антигенов. В связи с этим появляется возможность влиять на судьбу ФАП после его фиксации на клеточной поверхности, и, следовательно, на механизм действия посредством ускорения или замедления лизосомотро-пии. Более того, по-видимому, есть возможность модифицировать антитела так, чтобы они, не меняя своей специфичности, изменяли бы скорость и, возможно, направленность эндоцитоза.
