Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Паушева З.П. -> "Практикум по цитологии растений " -> 73

Практикум по цитологии растений - Паушева З.П.

Паушева З.П. Практикум по цитологии растений — М.: Агропромиздат, 1988. — 271 c.
ISBN 5-10-000614-5
Скачать (прямая ссылка): praktiumpocitologii1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 67 68 69 70 71 72 < 73 > 74 75 76 77 78 79 .. 110 >> Следующая

* 1 Р (рентген) =2,58-10-4 Кл/кг.
Шер/риза Мегтнраза Антраза
Один, Л А < ">
разрыв \ 1)
11 л% А& /\ Интерсти
/ оо циальная
V делеция
¦1 л О Оо 1 §
8. II 1-1
/г о 00= И!
/}П \/V Взаимная
трансло-
нация
Шот Мтдшза Анафаза
umeptpm
тпрофт
Один разрыб Г А Л 'Ш 1
V
я А 0е 5j
| Дба разрыба /» А 0е



А ? Ssbs
& й
А А /\ йч 1
\/ IL
PII
<^11,
/Р W 1
т /у4
W
ж
Рис. 67. Основные категории хромосомных перестроек. По Н. П. Дубинину.
Рис. 68. Основные категории хроматидных перестроек. По Н. П. Дубинину.
4. Материал фиксируют по Карнуа или в уксусном алкоголе и хранят в 70%-м растворе спирта.
5. Окрашивают корни в 2%-м растворе ацетокармина с кипячением на водяной бане в течение 10 мин. Затем материал переносят в 45%-й раствор уксусной кислоты на 5 мин.
6. Корень раздавливают в капле хлоралгидрата.
Основные категории хромосомных и хроматидных перестроек, которые наблюдают в анафазе и метафазе митоза, приведены на рисунках 67—68.
Изучить действие химических мутагенов метафазным методом можно также на скерде зеленой, семена которой с корнями длиной 1—2 мм обрабатывают этиленимином в концентрации
0,05% при pH 7,4 в течение 1 ч при температуре воздуха 25 °С.
После промывания в течение одного часа от остатков эти-ленимина проростки обрабатывают 0,01 %-м раствором колхицина и ставят в термостат с температурой 24—25°С. Максимум перестроек наблюдается через 16—24 ч.
Таким образом, для анализа перестроек хромосом необходимо во время воздействия тем или иным агентом учитывать фазу митотического цикла, чтобы знать, какие можно о'жидать перестройки (хромосомные, хроматидные или те и другие). Желательно проследить число и типы перестроек на протяже-
нии всего первого митотического цикла после мутагенного воздействия, а для этого необходима темпоральная фиксация обработанного материала через определенные промежутки времени. Кроме того, учитывают специфику объекта и фактор воздействия.
Анафазный метод исследования. Если в практике селекционной работы приходится иметь дело с многохромосомными объектами, у которых идентификация хромосом не завершена или в кариотипе много морфологически сходных хромосом, при изучении действия мутагенов используют анафазный метод исследования. Однако он позволяет выявить Меньше различных типов аберраций хромосом, чем метафазный.
При изохроматидных делециях в анафазе видна пара хро-матидных фрагментов, тогда как при обычной хроматидной делеции обнаруживается лишь одиночный фрагмент. Практически отличить хромосомную делецию, которая представляет собой пару параллельно расположенных фрагментов, от шзо-хроматидной делеции в виде двух фрагментов очень трудно. Поэтому при анализе учитывают одиночные и двойные фрагменты, не указывая их происхождения.
Если произошла парацентрическая делеция, возникают ацентрический фрагмент и микрофрагмент. При перицентриче-ской делеции затрагивается центромерный район, который, выпадая, образует центрическое кольцо (двойное в случае хромосомной делеции и одиночное в случае хроматидной) и фрагмент (двойной или одиночный).
Таким образом, делеции — источник фрагментов хромосом, которые располагаются между полюсами в анафазе и телофазе митоза. При анализе учитывают расстояние между анафаз-ными группами. Оно должно быть больше ширины самой группы. На ранних этапах анафазы, когда расстояние между группами хромосом на полюсах небольшое, не удается выявить всех нарушений. Не рекомендуется исследовать клетки в период поздней телофазы, когда уже начал образовываться фрагмопласт.
Асимметричные транслокации обычно в анафазе обнаруживаются в виде мостов (см. рис. 64) и. фрагментов. В зависимости от того, на каком этапе клеточного цикла возникло повреждение, мосты будут двойные или одиночные. При повреждении хромосом на стадии Gi возникают хромосомные двойные мосты ((параллельные или перекрещенные); если повреждение было на стадий (?2, то возникают хроматидные одиночные мосты. • '
Для того чтобы овладеть анафазным методом, можно воспользоваться облученными или долго хранившимися семенами (у последних возможен спонтанный мутагенез). При изучении действия радиации число аберрантных клеток и спектр абер-
Предыдущая << 1 .. 67 68 69 70 71 72 < 73 > 74 75 76 77 78 79 .. 110 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed