Практикум по цитологии растений - Паушева З.П.
ISBN 5-10-000614-5
Скачать (прямая ссылка):
Видимое исследователем изображение препарата зависит от оптической системы микроскопа и зрительного восприятия. Глаз человека также обладает определенной разрешающей способностью, или остротой зрения. Невооруженный глаз различает детали величиной не более 0,15 мм. На разрешающую способность глаза влияет освещенность, объекта — с ее уменьшением острота зрения снижается. Кроме того, имеют значение его контрастность и цвет. Спектральная чувствительность глаза лежит в диапазоне световых волн длиной 380—770 нм, но наибольшая она при монохроматическом излучении с длиной волны 555 нм (1 нм = 10~6 мм, 1 мкм = 1000 нм).
Ю
Диаметр зрачка изменяется от 1,5 до 8 мм в зависимости от яркости объекта. Хотя нормальный глаз может длительное время наблюдать объекты на расстоянии от бесконечно большого до 250 мм, но именно 250 мм принято считать расстоянием наилучшего видения. Процесс наблюдения связан с такой особенностью глаза, как аккомодация, т. е. возможность приспосабливаться четко видеть объект на определенном расстоянии. Таким образом, разрешающей способностью обладают объектив, конденсор и глаз человека.
Кроме разрешающей способности, объектив характеризуется определенным фокусным расстоянием и увеличением. Слабые объективы имеют большое фокусное расстояние — 50—60 мм, а сильные—1—3 мм, т. е. чем больше фокусное расстояние, тем меньше увеличение объектива.
Увеличение объектива указано на оправе. Например, у микроскопа объективы имеют увеличение 9Х, 40X, 90X и апертуру соответственно 0,20; 0,65 и 1,25.
Каждый объектив характеризуется определенной величиной рабочего расстояния в миллиметрах. Объективы с малым увеличением имеют расстояние от объектива до препарата во много раз больше, чем объективы с большим увеличением. Поэтому во время фокусировки микроскопа необходимо пользоваться только тон рукояткой, которая соответствует данному объективу, чтобы не раздавить препарат и не испортить объектив. Так, объективы микроскопа с увеличениями 9х, 40Х и 90Х имеют рабочие расстояния соответственно 13,8; 0,6 и 0,12 мм. Объектив малого увеличения отличается не только максимальным рабочим расстоянием, но и большим полем зрения, поэтому исследование препарата всегда начинают с него.
При работе с микроскопом важное значение имеет толщина покровного и предметного стекол. Даже небольшое отклонение от нормальной толщины (0,17 мм — для покровного и 1,2 мм — для предметного) сказывается на качестве изображения сильных объективов.
Помимо перечисленных характеристик, объективы отличаются разнообразием в зависимости от длины тубуса, среды между фронтальной линзой и препаратом, метода наблюдения и т. д. Так, они могут быть рассчитаны на длину тубуса 160 мм — для проходящего света, 190 мм — для отраженного, бесконечность — для проходящего или отраженного. Объективы бывают сухие и иммерсионные. Для наблюдений методом фазового контраста существуют фазово-контрастные объективы, а для изучения непрозрачных объектов в отраженном свете—• эпиобъективы. Определенные объективы применяют только в тех условиях, для которых они предназначены. Если приходится работать с покровными стеклами, имеющими толщину больше или меньше 0,17 мм, то лучше пользоваться микроско-
пом, в комплект которого входит объектив с коррекционной оправой, позволяющий исправить сферическую аберрацию, вносимую покровным стеклом.
Окуляр устроен значительно проще объектива. Нередко он состоит всего из двух линз. По назначению его можно сравнить с лупой: с его помощью получают мнимое увеличенное изображение, но он не способствует выявлению подробностей строения.
Таким образом, объектив и окуляр в комплексе дают мнимое, дважды увеличенное и обратное по отношению к препарату изображение.
Различные типы окуляров неодинаково исправляют остаточные аберрации объективов, и выбор их зависит от типа объектива. Так, окуляры Гюйгенса и ортоскопические окуляры предназначены для работы с ахроматами малых и средних увеличений и планахроматами малых увеличений. Компенсационные окуляры используют в работе с разными апохроматами, планахроматами и ахроматами больших увеличений. На их корпусе стоит буква К и указано увеличение (рис. 4). Гомали, входящие в комплект микрофотонасадок, исправляют кривизну изображения. Их применяют только при фотографировании в видимой области спектра-. Эти окуляры не подходят для работы с объективами-планахроматами. )
Увеличение окуляров у микроскопа обычно составляет 7Х, 10Х, 15Х, а линейное поле зрения — соответственно 18, 14 и 8 мм. Общее увеличение микроскопа определяют как произведение увеличения объектива (Уоб) на увеличение окуляра ( Vok) :
Коб -Кок. ' (4)
Если объектив имеет увеличение 90X, а окуляр 15X, то общее увеличение равно 1350. В тех случаях, когда микроскоп снабжен бинокулярной насадкой АУ-12, имеющей свое, собственное увеличение (Vh), равное 1,5Х, увеличение микроскопа определяют по формуле
К=^об-Уок* У„. (5)
