Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Паушева З.П. -> "Практикум по цитологии растений " -> 25

Практикум по цитологии растений - Паушева З.П.

Паушева З.П. Практикум по цитологии растений — М.: Агропромиздат, 1988. — 271 c.
ISBN 5-10-000614-5
Скачать (прямая ссылка): praktiumpocitologii1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 19 20 21 22 23 24 < 25 > 26 27 28 29 30 31 .. 110 >> Следующая

Все растворы фиксаторов готовят или на спирту (спиртовые фиксаторы), или на дистиллированной воде (водные фиксаторы). Спиртовые фиксаторы быстро проникают в ткани, и материал в них выдерживают от 30 мин до 12 ч. Водные фиксаторы значительно медленнее проникают в ткани, поэтому в них объекты должны находиться не менее суток, а иногда дольше. Спиртовые фиксаторы грубее по своему действию, чем водные, но они и более стойкие, их можно готовить заранее в отличие от водных.
Фиксатор выбирают в зависимости от цели и объекта исследования. На первых этапах работы можно испытать несколько видов, чтобы выбрать наиболее надежный. Мелкий бутоны и нежные корни хорошо фиксируются в водных фиксаторах, крупные бутоны и толстые корни — в спиртовых. Трудносмачи-ваемые объекты (пыльники, почки и др.) для успешной фиксации можно обработать сначала спиртовым препаратом (несколько минут), а затем водным. Хлорофилл, сахара, жиры при фиксации обычно извлекаются из клеток, митохондрии — разрушаются, поэтому не обнаруживаются при изучении объектов под микроскопом. Ниже приведен состав некоторых ядерных фиксаторов.
Фиксатор С. Г. Н а в а ш и и а (10:4: 1) * используют для фиксации корней (не слишком плотных и толстых) и мелких эмбриологических объектов. Продолжительность фиксации 24 ч в темноте.
Состав: хромовая кислота 1%-й раствор — 10 ч.; формалин — 16%-й — 4 ч.; ледяная уксусная кислота— 1 ч.
Фиксатор готовят перед употреблением, так как он быстро портится. Этот фиксатор относится к группе водных, он действует очень мягко и хорошо сохраняет структуру хромосом'.
Фиксатор Карнуа (6:3:1) широко используют в цитологической и эмбриологической практике для изготовления по-
* В скобках дано условное обозначение соотношения компонентов фиксирующей смеси.
стоянных микротомных и давленых препаратов. Продолжительность фиксации от 2 до 12 ч.
Состав: абсолютный этиловый спирт или его 96%-й раствор—
6 ч.; хлороформ — 3 ч.; ледяная уксусная кислота—1 ч.
Относится к группе спиртовых, быстро проникает почти в любые объекты, действует не так мягко, как фиксатор Навашина.
«Уксусный алкоголь», или фиксатор Кларка (3: 1), широко применяют в цитологических и эмбриологических исследованиях, особенно для изготовления давленых препаратов. Материал выдерживают в фиксаторе от 2 до 12 ч, а иногда и хранят в нем при 0—3°С.
Состав: абсолютный этиловый спирт или его 96%-й раствор— 3 ч.; ледяная уксусная кислота— 1 ч.
Действует подобно фиксатору Карнуа. Уксусную кислоту иногда заменяют пропионовой. На основе последней разработай состав нескольких фиксаторов для растительных объектов:
пропионовая кислота—1 ч., 96%-й раствор этилового спирта— 3 ч.;
пропионовая кислота—100 мл, 96%-й раствор этилового спирта—100 мл, гидроксид железа — 0,4 г (перед тем как поместить объект в этот фиксатор, на каждые 10 мл смеси добавляют несколько капель кармина);
пропионовая кислота—1 ч., хлороформ — 4 ч., абсолютный этиловый спирт— 3 ч.;
формалин — 1 ч., 96%-й раствор этилового спирта—15 ч., пропионовая кислота — 2 ч. (рассчитан на 1—2 ч действия и применяется для растительных и животных объектов).
Фиксатор Флемминга используют для мелких объектов.
Состав: хромовая кислота, 1%-й раствор — 25 мл; осмиевая кислота, 2%-й— 5 мл; ледяная уксусная кислота— 10 мл; вода— 60 мл.
Материал фиксируют не менее суток, а затем промывают в воде.
Фиксатор Шампи. Продолжительность фиксации 24 ч.
Состав: хромовая кислота, 1%-й раствор — 35 мл; бихромат калия, 3%-й — 35 мл; осмиевая кислота, 2%-й—15 мл; ледяная уксусная кислота — 2—4 капли.
Фиксатор Я. С. Модилевского (9:2:2:2) используют в эмбриологической практике. Продолжительность фиксации 24 н.'
Состав: хромовая кислота, 1%-й раствор — 9 ч.; формалин» 16%-й — 2 ч.; бихромат калия, 5%-й раствор — 2 ч.; уксусная кислота, 5% -й раствор — 2 ч.
Фиксатор водный, мягкого действия.
Фиксатор Чемберлена (почти универсальный) применяют для эмбриологических и анатомических исследований*
особенно крупных объектов. Продолжительность фиксации 16 ч. В этом фиксаторе материал можно хранить.
Состав: этиловый спирт, 50—70%-й раствор — 90 ч.; формалин— 5 ч.; ледяная уксусная кислота — 5 ч. По действию занимает промежуточное положение между фиксаторами Карнуа и Навашииа.
Фиксатор Батталья используют в цитологической практике в двух соотношениях / — 5: 1 : 1 : 1 и 2— 5: 5: 1 : 1 (во втором объекты можно хранить). Продолжительность обработки 5 мин.
Состав фиксатора 1: этиловый спирт, 96%-й раствор — 5 ч.; хлороформ—1 ч.; формалин, 16%-й—1 ч.; ледяная уксусная кислота — 1 ч.
Состав фиксатора 2: этиловый спирт, 96%-й раствор — 5 ч.; хлороформ — 5 ч.; формалин, 16%-й—1 ч.; ледяная уксусная кислота — 1ч.
Фиксатор Ныо комера (6 : 3 : 1 : 1 : 1) в последние годы применяют для изучения мейоза у зерновых культур на давленых препаратах. Молодые колосья фиксируют в течение суток при комнатной температуре, затем заливают свежим фиксатором и хранят в холодильнике до анализа. Пыльники окрашивают ацс-токарм'ш-гом. Фиксатор используют и для изучения корней.
Предыдущая << 1 .. 19 20 21 22 23 24 < 25 > 26 27 28 29 30 31 .. 110 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed