Исследование биологических макромолекул электрофокусированием иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами - Остерман Л.А.
Скачать (прямая ссылка):
Эффективность счета черенковского излучения в силу тех же причин существенно зависит от объема препарата. Для счета 32Р оптимальный объем воды лежит в интервале 10—15 мл. Для зависимость от объема более «острая» — оптимум лежит вблизи 10 мл. Оптимальные объем и расположение образца для счета черенковского излучения следует подбирать и обязательно воспроизводить при сопоставлении счета нескольких препаратов.
Даже в наилучших условиях эффективность счета черенковского излучения для 3Ф обычно не превышает 25—30%. Для ее увеличения можно использовать добавки, сдвигающие весь спектр излучения в более длинноволновую область. В качестве
такой добавки (англ. «shifter») используют, например, 2-нафти-ламин-6,8-дисульфокислоту (в концентрации 100 мг/мл). Есть сведения, что при этом эффективность счета черенковского излучения S2P удается увеличить до 50%.
•V-СЧЕТЧИКИ С ТВЕРДЫМ СЦИНТИЛЛЯТОРОМ
Препараты для счета ^-излучения либо вносят в специальные стаканчики прибора, либо просчитывают в пробирках любого размера, помещающихся в этих стаканчиках. 7-Излучение легко проходит через стенки пробирки и стаканчика. Стаканчик опускают в колодец, высверленный в центре кристалла твердого сцинтиллятора, диаметром в 2 или 3 дюйма. К кристаллу примыкают фотокатоды ФЭУ. Из-за высокой энергии излучения в 4-счетчиках не используют схему совпадений — тепловые «шумы» ФЭУ отсекаются установлением высокого нижнего порога усиления. Зато для более полного улавливания квантов света, выходящих во все стороны из кристалла сцинтиллятора, имеет смысл установить два или три независимо работающих ФЭУ. Импульсы, регистрируемые каждым из них, поступают на вход одного усилителя; таким образом, число их суммируется.
Иногда, в зависимости от уровня жидкости в пробирке, глубина опускания стаканчика в кристалл может регулироваться. Мощная свинцовая защита препятствует попаданию в кристалл ^-излучения от препаратов, ожидающих просчета в автоматических счетчиках, куда загружается несколько сот образцов. Система регистрации импульсов сцинтилляции, порождаемых вторичными электронами {фотоэлектронами и комптоновскими), такая же, как в счетчиках 0-излучения. Регулируемые нижний и верхний пороги позволяют «вырезать» определенный участок спектра амплитуд, например область одного из фотоэлектронов (см. рис. 50). Для удобства работы с -^-излучениями разных энергий часто предусматриваются переключатели диапазонов усиления, например для регистрации излучений с энергиями до 500, 1000 или 2000 КэВ. Современные счетчики имеют два канала усиления для одновременного счета двух f-излучений. Регулированием высоты порогов усиления можно обеспечить счет импульсов от каждого из "f-излучателей, например ,г51 и “*1, в разных каналах.
Эффективность счета ^-излучения составляет обычно 70— 75%. Потери в счете, как уже упоминалось, обусловлены «непродуктивным» прохождением части ^-квантов через всю толщину кристалла и вдоль оси колодца, к-Счетчики последних моделей фирмы «Beckman» автоматически определяют эффективность счета и печатают истинные значения радиоактивности, выраженные числом распадов в минуту.
РЕГУЛИРОВАНИЕ (НАСТРОЙКА) ЖИДКОСТНОГО СЦИНТИЛЛЯЦИОННОГО СЧЕТЧИКА
В таком счетчике имеется обычно два или три канала для одновременного счета радиоактивности двух (реже трех) изотопов в одном препарате. Каждый из этих «рабочих» каналов может настраиваться экспериментатором независимо от остальных. Кроме этого, в современных приборах имеется еще два канала «стандартизации», настройка которых фиксирована на заводе. Назначение этих каналов будет ясно из дальнейшего.
Термином «канал» обозначают электрическую цепь, в которую обязательно входят устройства для регулирования порогов и для счета импульсов. У счетчиков с линейными усилителями (фирм «Packard», «Nuclear-Chicago») последние тоже входят в цепочки каналов, а степень создаваемого ими усиления регулируется независимо в каждом из них. Такое расположение усилителей позволяет сортировать импульсы излучения малых и больших энергий (с помощью порогов) в наиболее выгодных условиях. Например, усиление в канале, предназначенном для регистрации 3Н, можно сделать большим (50% от максимального), а в канале, настраиваемом на регистрацию 14С, — малым (7% от максимального). Тогда амплитуды импульсов, отбираемых пороговыми устройствами и поступающих далее на счетчики, будут иметь один и тот же порядок величины в обоих каналах. Схема совпадений всегда стоит до разветвления регистрируемых импульсов по каналам. Она сразу же (или после предварительного небольшого усиления) отсеивает шумовые импульсы, генерируемые фотоумножителями.
В счетчиках с логарифмическими усилителями (фирм «Beckman», «Intertechnique») благодаря сближению максимальных амплитуд импульсов (.«сжатию» спектров амплитуд — см. выше) пользуются одним усилителем, стоящим сразу после схемы совпадений. Регулировка усиления осуществляется на заводе. Импульсы напряжения с выходных клемм этого усилителя одновременно подаются на вход всех каналов, и далее в каждом канале происходит их сортировка по амплитудам с помощью пороговых устройств.
