Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: Электрофорез и ультрацентрифугирование - Остерман Л.А.
Скачать (прямая ссылка):
Салицилат натрия 115 Самоограничение миграции 74 Сведберга, единица 223 Сдвиг заряда при электрофорезе 87 Сенджера, метод 133 Серебром, окраска белков % Силиконирование формы для ПААГ 12
Сильно сшитый ПААГ 14 Сканирование гелей 92 Скорость
миграции белка 15 оседания частиц 176, 225 Скрытые разрывы в ДНК 147 Созерна, метод 162 Солюбилизаторы 110 Сорбция - белков на ПААГ 47 ДНК на стекле 156 на диализной пленке 158 «Спейсеры» 26 Стадиера, прибор 29 Стерилизация сахарозы 212 Структура геля агарозы 14 Сужение белковых зон 74 Счет радиоактивности после центрифугирования 258 «Сшивка» акриламидного геля 8
ТЕМЕД (тетраметилэтилендиамин) 9 Тетразолиевая соль 102 Тефлоновые прокладки для ПААГ 12 Тиоглнколевая кислота 46, 79 Толуидиновая синяя 152
«Трек» 5, 27 1,10-Фенантролин 63 Ферменты 52, 90, 101 Фиколл 208
Фиксация пептидов в геле формальдегидом 93
Флавинмононуклеотид 86 Флотация 240 Флюоресцамин 98
ФМСФ (фенилметилсульфонилфто-рид) 63, 105 Формаэан 102
Формамид в градиенте сахарозы 236 Формирующий гель 66 Формирование градиента плотности 242
Фосфопротеиды, окраска в геле 94 Фракционирование ДНК по составу 266
Хроматина
электрофорез 56, 65, 81, 86, 127 центрифугирование 274
Цетавлон1И, 85, 154 Цистамин 84, 88 ,
Шунтирующий ток 12
Щелочной градиент сахарозы 238 Щелочные белки 81 Щелочные красители 95
Экспоненциальный градиент 217 Электропроводность буфера 39—41 Электрофорез в растворе сахарозы 119
Электрофоретическая подвижность 14, 57 элюция 106, 118, 158, 164 Эндосмос 17 Этилендиакрилат 8
Amido Black 91 Aquasol 110
Coomassie Brilliant Blue (CBB R-250, CBB G-250) 91 DAPI 151
Density Marker Beads 208 Econofluor 110 Fast Green 93 Ficoll-Paque 208 Fluram 98 Lubrol WX 85 Maxidens 221
MTT (Methyl thiazolyl blue) 102
Meldolablue 102
Naphtalene Black 91
NCS (Nuclear Chicago solubilizer) 110
NTB (Nitro blue tetrazolium) 102
PAGE blue 83, PAGE blue G-90 91
PMS (Phenazine methosulfate) *02
Protosol 110
Remazol 14
Soluene 110
Stains all 94, 151
Tracker dye 47
ОГЛАВЛЕНИЕ
Часть первая ЭЛЕКТРОФОРЕЗ
Введение .............................................................. 3
Глава 1
Гели для электрофореза................................................. 7
.Полиакриламидный гель (ПААГ).......................................... 7
Исходные материалы................................................ 7
Процесс полимеризации ПААГ........................................ 10
Выбор концентраций мономеров...................................... 13
Агароза................................................................ 16
Смешанный гель (агароза+ПААГ).......................................... 20
Ацетатцеллюлозная пленка, импрегнированная ПААГ........................ 21
Глава 2
Техника приготовления гелей и аппаратура............................... 21
Вертикально расположенные трубки....................................... 21
вертикально расположенные пластины..................................... 26
Горизонтально расположенные пластины................................... 32
Глава 3
Электрофорез белков.................................................... 37
Замечания общего характера............................................. 37
Миграция белков в геле............................................ 37
Напряженность электрического поля (#).......................... 38
Выбор буфера рабочего геля........................................ 40 >
Выделение тепла при электрофорезе................................. 42
Загрузка геля. Ширина белковых зон................................ 44
Введение мочевины и 0-меркаптоэтанола. Некоторые артефакты . 46
Лидирующие красители.............................................. 47
Разделение белков по размерам и заряду................................. 48
Выбор рабочего буфера............................................. 48
: Использование мочевины............................................... 50
Загрузка геля и подготовка препарата.............................. 52
^ Некоторые примеры.................................................... 53
Разделение белков по размеру с использованием ДДС-Na................... 56
Существо метода . ................................................ 56
Выбор пористости геля............................................. 59
Присутствие мочевины и неионных детергентов........................ 60
Выбор рабочего буфера геля......................................... 61
Подготовка белкового препарата..................................... 68
Проведение электрофореза........................................... 63
Окрашивание и элюция белков........................................ 64
Ступенчатый электрофорез (disc-electrophoresis)........................ 66
Градиент пористости ПААГ............................................... 73
