Происхождение предбиологических систем - Опарин А.И.
Скачать (прямая ссылка):
Состав реакционных смесей, в которых образуется полимер цитидиловой кислоты, приведен в табл. 1. Единственным нуклеотидом, способным к поликонденсации, оказалась 2'(3')-цитидиловая кислота. Смесь цитидиловой и адениловой кислот дает весьма интересные продукты, требующие дальнейшего изучения. Возможно, кроме того, что уридиловая кислота может сополимеризо-ваться с цитидиловой кислотой. Содержание аденина при использовании смеси цитидиловой и адениловой кислот определяли колориметрически по методу Дэвиса и Морриса [1]. Состав соединения, образующегося из смеси цитидиловой и уридиловой кислот, устанавливали путем сравнения ультрафиолетового спектра поглощения синтезированного соединения со спектрами стандартных смесей цитидиловой и уридиловой кислот. Для удобства в табл. 1 приве-
Таблица 1
Состав реакционных смесей *
Продукт Компоненты смеси ** Время, Выход, Содержа Содер
час % ние жание,
фосфора, ЦМФ, ,%
%
1-53/2 ЦМФ (5 г) f ПФК (20 г) + 2 0,6 9,1 ---
+ мочевина (4 г)
2-4/2 ЦМФ (5 г) + ПФК (20 г) + 2 0,5 9,6 ---
мочевина (4 г)
2-75/2 ЦМФ (5 г) + ПФК (Ю г) 1 1,7 9,8 ---
2-91/А ЦМФ (5 г) + ПФК (10 г) 1 0,8 9,3 ---
2-73/А ЦМФ (0,5 г) + 1 0,6 9,9 75
+ АМФ (0,5 г) + ПФК (2 г)
2-73/В ЦМФ (0,7 г) + 1 0,8 10,5 80
+ АМФ (0,3 г) + ПФК (2 г)
2-76/А ЦМФ(1 г)+АМФ(1 г) + 1 1.0 10,4 60
+ ПФК (4 г)
2-76/В ЦМФ (1 г) + АМФ (1 г) + 1 1,5 10,4 60
+ ПФК(4 г)
2-89/2 ЦМФ (1 г) + УМФ (1 г) + 1 0,2 7,6 70---80
+ ПФК(4 г)
* Температура во всех опытах была 65°.
** Все нуклеотиды имели структуру 3'(2')-
дено содержание цитидиловой кислоты, вычисленное как разность полученных величин. Необходимо отметить, что мы недавно обнаружили в исходной цитидиловой кислоте следы примесей трех различных соединений, одно из которых, очевидно, является аде-ниловой кислотой. Другой примесью может быть цитидин, а третья представляет собой неизвестное вещество, поглощающее в ультрафиолете. В контрольных опытах, однако, было показано, что все три примеси в процессе очистки полностью удалялись.
В спектрах поглощения полученных соединений не наблюдается аномалий. На фиг. 2 приведен спектр одного из производных цитидиловой кислоты (2-75/2), снятый в кислой и щелочной среде. Особый интерес представляет тот факт, что величина смещения максимума поглощения при использовании кислого раствора такая же, как при использовании свободной цитидиловой кислоты. Это свидетельствует о том, что аминогруппа цитозина не участвует в конденсации (но участвует в образовании, например, фосфоамид-ных эфирных связей).
Увеличение коэффициента поглощения в области адсорбционного максимума при инкубации щелочного раствора в течение 48 час (температура 37°) представляет собой гиперхромный эффект и выражается в процентах. Было показано [4], что такой сдвиг обусловлен расщеплением связей между нуклеотидами и что величина сдвига возрастает с увеличением длины олигонуклеотидных цепей.
Некоторые оптические свойства четырех производных цитиди-ловой кислоты суммированы в табл. 2. В ней же для сравнения
Таблица 2
Оптические свойства соединений
Соединения в 0,01 н. НС1 В 0,1 н . NaOH Г иперхромизм
\ianc’ ^мин’ X ^мин’
ммк ММК макс’ ммк
ммк
3'(2')-ЦМФ 279 240 272 250 0
Дицитидиловая * кис 278 240 270 250 8,7
лота
Трицитидиловая * кис 278 241 270 251 13,9
лота
Тетрацитидиловая * 278 241 270 251 15,3
кислота
Полицитидиловая * кис 278 241 270 251 15,9
лота (9,8)
1-53/2 278 240 270 252 (24)**
2-4/2 278 242 269 251 16
2-75/2 278 242 269 252 16
2-91/А 278 242 268 252 16
* Данные Микельсона [4].
** Единственное определение.
приведены свойства нескольких олигонуклеотидов цитидиловой кислоты, синтезированных Майкельсоном [4]. Величины гипер-хромизма щелочных растворов производных цитидиловой кислоты позволяют прийти к заключению, что их цепи состоят по крайней мере из 4—10 остатков. Тем не менее результаты предварительных определений с применением ферментов осложняют трактовку данных табл. 2.
