Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Ньюсхолм Э. -> "Регулфяция метаболизма " -> 22

Регулфяция метаболизма - Ньюсхолм Э.

Ньюсхолм Э., Старт К. Регулфяция метаболизма — М.: Москва, 1977. — 407 c.
Скачать (прямая ссылка): regulyaciyametabolizma1977.djvu
Предыдущая << 1 .. 16 17 18 19 20 21 < 22 > 23 24 25 26 27 28 .. 167 >> Следующая

Скорость ассоциации =k1-[S] (1—Ks),
Скорость диссоциации =&_1 • У3.
При равновесии оба эти процесса протекают с одинаковой скоростью, поэтому
k_г-Ys =k, [S)(\~Ys) =kx IS] —ky [S] Fs.
Разделив на Ks, получим
Следовательно,
-MSI.
n=-
IS]________ [S]
(2.1)
s— + kx [S] + [SJ'
Так как k-i/ki=Kd (константа диссоциации), то
у _ fS] _ [SJ/Ad s— *d+[S] — l + [SI//fd •-
Учитывая, что константа связывания /Сь равна kjk-i или 1//Cd, получим
«7 ^TbfS] /С) <iv
rs—~l+ЛГьр]"- 1}
Уравнения типа (2.1) и (2.2) описываются гиперболой в прямоугольной системе координат. Следовательно, кривая зависимости частичного насыщения белка (7s) от концентрации субстрата [S] является гиперболой (рис. 8).
Однако для фермента, который не только связывает субстрат, но также катализирует специфическую реакцию, график зависимости начальной скорости реакций от концентрации субстрата будет иметь форму гиперболы лишь при условии, что суммарная скорость зависит от концентрации фер-мент-субстратного комплекса PrS; в этом случае последний находится в зависимости от равновесного процесса связывания:
Pr+S ч 1 >-¦ PrS —Рг + Продукт.
Если &2 — комплексная константа (т. е. если существует несколько промежуточных состояний) или если фермент катализирует реакцию, включающую более одного субстрата, такая простая зависимость может не выполняться и гиперболические кривые не получаются (см. разд. Д).
2. РАВНОВЕСНОЕ ПРИСОЕДИНЕНИЕ К ПОЛИМЕРНЫМ БЕЛКАМ
Для белка, имеющего на каждую молекулу несколько центров связывания для одного и того же лиганда, взаимодействие между лигандом и белком может быть выражено уравнением (2.1) при условии, что все центры идентичны и между ними нет взаимодействия (т. е. связывание первой молекулы субстрата не влияет на способность к связыванию второй молекулы и т. д.). В случае тетрамерного белка с четырьмя связывающими субстрат участками можно рассмотреть следующие четыре- равновесных расстояния:
Кажущаяся константа связывания
Кы КЪ2
*Ьз
Кы
Если нет взаимодействия между связывающими центрами, микроскопическая (или внутренняя) константа связывания Жъ одинакова для каждого мономера и статистически связана
Реакция
Pr4 + S ¦< ¦ >- Pr4S Pr4S -f- S ¦< ¦ *- Pr4Sa Pr4S2 + S ¦< ¦ *- Pr^ Pr4S3 S < ^ Pr4S4
с кажущимися константами Кы, Къ2 и т. д. в зависимости от* числа свободных центров связывания в белковой молекуле1.. Для мономерного белка, участвующего в реакции Рг +
+ S^PrS, константа связывания (Къ) выражается равен-А-1 ством
*<¦=-&¦¦ <2-3>
Однако для тетрамера Рг4 реакции и константы связывания следующие:
Реакция Константа связывания
*i „ „ „ %
1
Pr4 + S : 4---1 Pr4S
Pr4s + S : *2 Pr4S2

Pr4S2 + S *3 = Pr«S«
^---3
Pr4S3 -(- S *4 Pr*S4
k-4
Кы = = 4!<ъ (2.4)-
къ* = -ЖГ = ~ТКь (2 5)' (2.6).
^4=Т&7 = -Г^Ь (2.7).
В реакции между полимерным белком и лигандом могут присутствовать все виды промежуточных компонентов (Pr4, Pr4S, Pr4S2, Pr4S3 и Pr4S4). Следовательно, частичное насыщение белка Рг4 лигандом S, которое определяется как общее количество связанных S, деленное на общее число имеющихся центров связывания, будет составлять
V [Pr„S] -f 2 [Pr4S2] + 3 [Pr„S3] + 4 [PraSa]
s ~ 4 flPrJ + [Pr4S] + [Pr4S2] + [Pr4S3] + [Pr4S4]) •
(В числителе для каждой молекулы в форме Pr4S2 два центра насыщены субстратом и, следовательно, Pr4S2 .следует умножить на 2; аналогично поступают в случае Pr4S3 и Pr4S4. В знаменателе общее количество доступных центров получа-
1 Понимание различий между микроскопической и кажущейся константами для центров связывания мономеров в полимерных белках иногда вызывает трудности. Если бы было возможно измерить константу для каждого мономера в отсутствие связывающих участков других мономеров, была бы получена микроскопическая константа связывания. Однако на практике константы связывания для каждого центра варьируют в зависимости от числа имеющихся связывающих центров в каждом полимере, то есть микроскопическая и кажущаяся константы статистически связаны. Например, в реакции, определяемой Кы, существует 4 участка, доступных для связывания
S, но лишь один из них насыщен лигандом, который может диссоциировать. Следовательно, Кы в 4 раза больше, чем Къ. Аналогично Къг = 3/г Къ, Кьз — 2/з Къ и /Сь4 — ‘/4 Къ.
Предыдущая << 1 .. 16 17 18 19 20 21 < 22 > 23 24 25 26 27 28 .. 167 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed