Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Манк М. -> "Биология развития млекопитающих " -> 28

Биология развития млекопитающих - Манк М.

Манк М. Биология развития млекопитающих — М.: Мир, 1990. — 406 c.
ISBN 5-03-001333-4
Скачать (прямая ссылка): biologiyarazvitiyamlekopitaushih1990.djvu
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 162 >> Следующая

альбумина (БСА), при комнатной температуре.
3.2. Классификация стадий развития
Для раннего постимплантационного развития характерны быстрое образование
новых тканей и значительные морфологические изменения. Поэтому для
интерпретации любого экспе-
1 Состав среды РВ1 приводится в гл. 13, разд. 3.1.1.
70
Глава 3
Таблица 3.1. Извлечение эмбрионов
Препарирование эмбрионов
1. Вырежьте матку и поместите ее в 50-мм чашку Петри со средой РВ1 + +
10% ЭТС.
2. При помощи часового пинцета надорвите матку по антимезометриальному
краю каждого места имплантации (рис. 3.2,А), обиажив децидуальную
капсулу. Скользищим движением пинцета вдоль мезометриальной стенки матки
отделите децидуальную капсулу с зародышем (decidua) (рис.3.2,Б).
Перенесите ее в чистую чашку Петри с такой же средой.
3. Захватите мезометриальный (тупой) конец капсулы пинцетом. Введите
сложенные концы пинцета по средней линии (примерно на треть длины капсулы
от мезометриального конца) и погружайте их в ткань, пока они не коснутси
дна чашки (рис. 3.2, В). Раздвиньте концы пинцета. Дециду-альнаи капсула
должна наполовину разорватьси (рис. 3.2,Г).
4. Осторожно выталкивайте эмбрион из децидуальной капсулы. Когда он почти
полностью освободитси, захватите пинцетом эктоплацентарный ко-иус и
извлеките зародыш из децидуальной капсулы.
Удаление оболочки Рейхерта
1. Фиксируйте положение эмбриона, введя сложенные концы пинцета в
желточную полость сразу под эктоплацентарным конусом. Поставив в то же
положение сложенные концы второго пинцета (рис. 3.2, Д) и прижав, ведите
их в направлении эмбрионального полюса (рис. 3.2, Е). При этом разорвется
оболочка Рейхерта, обнажив ийцевой цилиндр.
2. Оболочка Рейхерта остается у эктоплацентарного конуса, так что большую
часть ее можно просто осторожно оторвать.
римента особую важность приобретает тщательная классификация стадий
развития. Ошибкой многих эмбриологов прошлого было использование возраста
эмбриона млекопитающего в качестве критерия стадии его развития. Заметные
вариации в эмбриональном развитии можно наблюдать даже у новорожденных
мышат, а при прохождении столь динамической фазы, как ранняя
предимплантационная, различия в возрасте всего лишь в несколько часов
могут сопровождаться очень значительными морфогенетическими изменениями.
Поэтому в качестве более точного и чувствительного способа стандартизации
экспериментов рекомендуется классифицировать эмбрионы на основе явно
выраженных морфологических признаков и определенных физических размеров.
В табл. 3.2 дана возможная схема классификации живых эмбрионов, но
использованные критерии можно уточнить или изменить в соответствии с
природой эксперимента.
Эксперименты с постимплантациониыми эмбрионами мыши___________71
Рис. 3.2. Схема операции извлечения 8-дневного эмбриона и удаления
оболочки Рейхерта. Соответствующие манипуляции описаны в тексте.
4. Выделение тканей или частей эмбриона
4.1. Микрохирургические операции на эмбрионах
Для операций используются силиконированные стеклянные иглы (разд. 9.3),
укрепленные в держателях лейцевского манипулятора, или заостренные
вольфрамовые иглы. Этими инструментами пользуются для нанесения прямых
разрезов, разделяющих эмбрион на отдельные области или фрагменты.
Бактериологические пластиковые чашки Петри (Sterilin) следует предпочесть
стеклянным, т. к. эмбрионы в них меньше скользят. В табл. 3.3 в качестве
примера описано препарирование задней части первичной полоски и 8-
дневного эмбриона (рис. 3.3,Л), но основные приемы этой операции можно
использовать для получения любой части эмбриона на любой стадии. Основной
принцип, которого следует при этом придер-
72
Глава 3
Таблица 3.2. Схема классификации стадий развития эмбриона мыши с 6-го по
11-й день'>
Дни беременности2) Ста- дия Морфологические признаки Размеры
(мм)?)
6-й день (У.) 1 Сформирован яйцевой цнлнндр. Четко различается
зародышевое/вне-зародышевое соединение 0,1x0,1
6-й день (П. П.) 2 Формирование проамниотической полости 0,2x0,2
7-й день (У.) 3 Проамниотическая полость внедряется во
внезародышевую область 0,25x0,25
7-й день (П. П.) 4 Формирование первичной полоски 0,3x0,4
7-й день (П.П.) 5 Появление амниотических складок 0,3x0,4
8-й день (У.) 6 Образование амниона 0,35X0,4
8-й день (У.) 7 Расширение амниотической полости. Головной
отросток 0,4X0,4
8-й день (П. П.) 8 Почка аллантоиса. Нервный желобок 0,5x0,4
8-й день (П. П.) 9 Образование головных складок. Зачаток сердца
0,55X0,5 Г
9-й день (У.) 10 1-7 сомитов. Нервные валики. Передняя кишка. Ось
не изогнута^ Сердце сокращается 1,0
9-н день (П. П.) 11 8-12 сомитов. Воротные вены. Передний и задняя
кншка. Ось изгибается. Слуховая плакода. Одна жаберная дуга.
Кровообращение в висцеральном желточном мешке 1,5
10-й день (У.) 12 13-20 сомитов. Полный поворот оси. Замыкание
переднего и открытый задний иейропор. Слияние головных складок. Две
жаберных дуги. Плакода хрусталика. Глазные бокалы. Обонятельная плакода
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 162 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed