Биология развития млекопитающих - Манк М.
ISBN 5-03-001333-4
Скачать (прямая ссылка):
Б Система игл с двумя просветами
Фиксированный набор трубок х? С
Игла с выстилкой Mark 2
Иглы без выстилки Mark 3
Игла с двойным просветом (Craft), с выстилкой или без,градуирован" ная на
дистальном конце
Набор трубок для введения
Среда для промывания
Троакар и канюля (Craft)
Рис. 14.2. Типы игл, используемых для лапароскопического сбора ооцитов.
медицинскому персоналу, что подготовка инструментов для сбора ооцитов и
культивирования эмбрионов выходит за рамки обычной стерилизации. По
нашему мнению, контроль за подготовкой инструментов должен осуществлять
эмбриолог.
Для фолликулярной аспирации используется целый ряд игл. Они могут иметь
один или два канала. В случае игл с единственным каналом, после
отсасывания фолликулярной жидкости пробка, закупоривающая трубку для
сбора, удаляется и промывающая среда поступает по игле назад в фолликул.
Как только фолликул наполнится, трубка для сбора закрывается и жидкость
нз фолликула отсасывается снова (см. рис. 14.2,Л). Иглы с двойным каналом
позволяют производить постоянное промывание фолликула. Отсасывание
осуществляется через канал большего диаметра, канал меньшего диаметра
служит для наполнения фолликула без извлечения иглы (рис. 14.2,Б).
Единственный недостаток этой системы заключается в том, что овальная
форма иглы затрудняет получение нужного отверстия в капсуле яичника.
Можно приобрести круглые иглы с двойными каналами (Go Medical Industries
Castle-
24-171
3.2.1. Типы игл, используемых для сбора ооцитов
362
Глава 14
med, UK)- У игл некоторых типов (Renou, Craft, Mkl, Mk2; Rocket Ltd)
аспирационный канал выстлан тефлоновым шлангом. Его гладкие стенки
снижают вероятность потери в аспира-ционной системе липких скоплений
кумулюсных клеток. Однако, если не принять необходимых предосторожностей
при подготовке игл и не производить частой смены тефлоновых вставок,
последние в результате повторных стерилизаций могут деформироваться. У
игл новых моделей (Craft МкЗ) такие вкладыши отсутствуют.
3.2.2. Внутренние вкладыши игл
Мы производим замену тефлонового вкладыша игл после одного или двух
использований. Старую тефлоновую трубку следует вытянуть из иглы, а скос
острия иглы просмотреть под препаровальным микроскопом. Обнаруженные
зазубрины или шероховатости можно устранить с помощью тонкозернистого
шлифовального бруска. После этого иглу тщательно прополаскивают
ультрачистой водой для культуры тканей. Новую тефлоновую трубку
протягивают через иглу. Поскольку при нагревании трубка сокращается, ее
конец обрезают на расстоянии 2 см от конца иглы. После стерилизации его
срезают на уровне скоса. Перед стерилизацией выстилающую трубку тщательно
споласкивают ультрачистой водой для культуры. Автоклавиро-ванию мы
предпочитаем стерилизацию двойных готовых игл в горячем сушильном шкафу
при 160 °С в течение 2 ч.
3.3. Подготовка инструментов для лапароскопии
Мы не советуем пользоваться общепринятым способом дезинфекции
инструментов для лапароскопии-10-мин обработкой в растворе
глутаральдегида (Cidex, Surgicos Ltd). Эта процедура не убивает спор, но
является вирицидной и бактерицидной. Она обеспечивает необходимую
деконтаминацию инструментов между оперированием разных пациентов. Однако
важно учесть, что раствор глутаральдегида обладает высокой токсичностью и
адгезивностью. Он может оставлять следы на перчатках хирурга или
операционной сестры, на инструментах. В связи с этим следует предпочесть
стерилизацию путем авто-клавирования.
3.4. Газы, используемые для лапароскопии
Существенное значение имеет контроль за постоянством pH жидкости,
окружающей яйцо. При стандартных процедурах лапароскопии брюшная полость
наполняется 100%-ным СО2.
Оплодотворение ооцитов человека
363
Учитывая высокую скорость реабсорбции, можно полагать, что это наиболее
безопасная из газовых смесей в случае неожиданного повреждения крупного
сосуда.
Было бы логично предположить, что длительный контакт тонкостенного
фолликула с СОг вызовет понижение внутрифол-ликулярного pH, однако прямые
свидетельства в пользу этой гипотезы отсутствуют. С другой стороны, нет
сомнения в том, что отсасывание газа вместе с содержимым фолликула может
снизить pH отсосанной жидкости, особенно если газ замкнут над
фолликулярным аспиратом в плотно закрытых пробирках. Исходя из этих
соображений, 100%-ному СОг при аспирации ооцитов предпочитают газовые
смеси, содержащие физиологический уровень СОг (например, 5% C02:5%
02:90%Хг) [12]. Сначала брюшная полость наполняется для безопасности С02,
а затем, когда будет фиксировано положение канюли в перитонеальной
полости, накачивается смесь с уменьшенным количеством С02.
Поскольку фолликулярная жидкость обладает слабыми буферными свойствами,
следует как можно быстрее извлечь ооцит из аспирационной жидкости и
перенести в соответствующим образом забуференную среду. Если лаборатория
расположена не в непосредственной близости от операционной, необходим
передвижной столик со стереомикроскопом, снабженным нагревательным
