Биология развития млекопитающих - Манк М.
ISBN 5-03-001333-4
Скачать (прямая ссылка):
359
Оральная контрацепция 5 мг норэтистерона
Кломифен 50 мг
чХГ
i
t
Операция
_L_
Дни цикла 1 5 11 12 13 14 15 16 17
5 9
Кломифен 150 мг/день
| Менструация--------------------------f--------------------------
Операция
Рис. 14.1. Режимы, обычно применяемые для стимуляции суперовуляции у
доноров, которым предстоит лапароскопическая стерилизация. А.
Фиксированный день операции - день кровотечения регулируется применением
гормонов.
Б. День операции варьирует в зависимости от дня менструации.
способные оплодотворяться in vitro, но в тех случаях, когда пациентки в
течение длительного периода принимали внутрь контрацептивные средства,
выход ооцитов очень низок.
3. Сбор ооцитов
Сбор ооцитов производится либо визуально путем лапароскопии, либо
трансвезикально, трансвагинально или трансуретрально с использованием
ультразвукового просвечивания яичников [10]. Лапароскопический сбор
ооцитов применяют значительно чаще, чем ультразвуковой; вероятно, это
объясняется тем, что гинекологи в своей повседневной практике лучше
знакомы именно с этой оперативной техникой. Однако методы, использующие
ультразвук, не требуют большого числа помощников, выполняются без общего
наркоза, в любой удобный исследователю день. Не удивительно, что эти
методы постепенно приобретают все больше сторонников.
3.1. Лапароскопический сбор ооцитов
Детальное описание процедуры лапароскопии и аспирации фолликулов не
входит в задачу этой книги. Мы считаем целесообразным дать лишь общие
представления, которые помогли бы эмбриологам, участвующим в
оплодотворении in vitro, понять хирургическую процедуру и свою роль в
подготовке к операции. Более детальное описание сделано Крафтом [11].
Под общим наркозом делают небольшой надрез кожи ниже пупка и в брюшную
полось вводят иглу Veress с газовым краном в открытом положении. Газовую
смесь (обычно это 100%-ный С02, см. разд. 3.4) накачивают через иглу со
скоростью 1 л/мин. При этом регистрируется внутрибрюшинное давление,
которое не должно превышать давления покоя для иглы более чем на 5 мм
ртутного столба, свидетельствуя о том, что игла правильно введена в
перитонеальную полость. Брюш-
360
Глава 14
ную полость наполняют примерно 2,5 л газа. Иглу Veress удаляют, разрез
кожи увеличивают до 1,5 см и вводят в перитонеальную полость
лапароскопический троакар и канюлю. Через канюлю вводят лапароскоп с
волоконным световодом. Если место введения было выбрано правильно, можно
различить содержимое брюшной полости. После осмотра органов таза для
облегчения доступа к яичнику над лобковой линией волос делается второй
разрез длиной 1 см, через который вводится захватывающий пинцет. Этим
пинцетом находят и захватывают связку яичника. Манипулируя его
положением, можно найти оптимальный доступ к фолликулам. Если яичник
подвижен, поворотом связки можно даже перевернуть его нижней стороной
вверх.
Как только будут обнаружены фолликулы и выбран наиболее удобный способ
подхода к ним, троакар и канюлю для отсасывающей иглы вводят латерально
между двумя предыдущими разрезами. Ассистент захватывающим пинцетом
удерживает яичник в нужном положении, тем временем через канюлю проходит
отсасывающая игла и прокалывает соответствующий фолликул. Фолликул не
следует прокалывать в самом тонком месте, так как быстрое падение
внутреннего давления может вызвать разрыв стенки фолликула, вследствие
чего края отверстия не будут достаточно плотно прилегать к игле.
Отсасывание производится с помощью специального вакуумного насоса (Craft
Suction Unit, Rocket of London) при 80-100 мм ртутного столба или вручную
шприцем на 20 мл. Как только стенки фолликула спадутся, отсасывание
прекращают и пробирку с аспиратом (фолликулярной жидкостью) передают
эмбриологу для исследования. Если ооцит обнаружен, иглу извлекают и
отсасывают следующий фолликул. Если ооцита в первом аспирате нет,
фолликул наполняют средой для вымывания ооцитов (табл. 14.2), которую
затем также отсасывают. При этом следует перемещать кончик иглы внутри
фолликула, что повышает вероятность соскабливания яйца с гранулезных
клеток, к которым оно может быть все еще прикреплено. Подобные промывания
фолликула делают до тех пор, пока не будет найден ооцит. После аспирации
всех фолликулов собирают жидкость из уте-ро-ректальной ямки, так как яйцо
может оказаться в излившейся фолликулярной жидкости. И наконец, проверив,
нет ли кровотечения яичника, выпускают газ из брюшной полости и
накладывают швы на разрез кожи.
3.2. Инструменты для сбора ооцитов путем лапароскопии
К подготовке инструментов для лапароскопии следует отнестись с такой же
тщательностью, как и к любой другой работе, связанной с культивированием
тканей. Необходимо объяснить
Оплодотворение ооцитов человека
361
А Система игл с одним просветом
Троакар Monash и канюля
Игла 14G х 22 см с тефлоновой выстилкой (используйте троакар Monash и
канюлю R29.f
Игла18G.
Позволяющая промыватг в обоих направлениях
