Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.
Скачать (прямая ссылка):
1966).
Начиная с 5—6-го дня культивирования происходит регенерация лимфоидной ткани в корковой области эксплантатов. Как при эксплантации лимфатических узлов, так и при культивировании тимуса регенерация происходит в форме образования лимфоидных фолликулов, часто имеющих характерные просветленные центры. Такие структуры свойственны лимфатическим узлам, но не встречаются в ин-тактном тимусе in vivo, что отражает разную иммунологическую роль этих органов. Известно, что в тимус не проникают антигены и в нем не происходит дифференцировка ацтителообразующих клеток. В то же время при непосредственном введении антигена в тимус в нем образуются вторичные фолликулы и появляются плазматические клетки.
В культуральной среде, использованной для эксплантации тимуса, присутствует комплекс чужеродных антигенов, которые содержатся в гетерогенной сыворотке и курином эмбриональном экстракте. Можно предположить, что именно вследствие антигенного раздражения регенерация лимфоидной ткани идет в культурах по пути образования лимфоидных фолликулов. В органных культурах лимфатических узлов наблюдается восстановление только коркового слоя; мозговой слой при этом не регенерирует.
Таким образом, органные культуры обеспечивают и длительную пролиферацию лимфоидной ткани и ее регенерацию in vitro. Каковы источники этой регенерации, т. е. за счет каких элементов (ретикулярных клеток или лимфоцитов) она происходит? Как уже указывалось, эксплантация лимфатических узлов от доноров, облученных 2000 р, показала, что из такой облученной стромы лимфоциты не образуются. Однако не исключено, что при столь высокой дозе облучения изменяются свойства ретикулярных клеток и их возможности к дифференцировке.
В плазменных культурах лимфатических узлов А. А. Максимов описывал превращение ретикулярных клеток в лимфоциты. О процессе трансформации А. А. Максимов судил по содержанию в лимфоцитах пигмента, характерного для ретикулярных клеток. Однако вряд ли такой маркер в настоящее время можно считать надежным. На основании морфологических наблюдений за органными культурами последовательных сроков можно сделать вывод, что основным (и, может быть, единственным) источником регенерации лимфоидной ткани являются жизнеспособные лимфоциты, которые сохраняются по периферии эксплантата. В группах этих элементов на 4—5-й день культивирования обнаруживаются митозы, и в последующем на их месте образуются вторичные лимфоидные фолликулы.
Эти наблюдения хорошо согласуются с данными об источниках регенерации лимфоидной и кроветворной ткани при трансплантации in vivo.
Образование структур, характеризующих взаимосвязь лимфоцитов и клеток стромы
Хотя все другие методы эксплантации, кроме органных культур, не обеспечивают сколько-нибудь длительного поддержания дифференцировки лимфоцитов, случаи сохранения незначительного количества лимфоцитов, находящихся в тесном контакте с клетками стромы, описаны в ряде систем (Н. Попов, 1928; Klein, 1958, 1959).
При культивировании лимфоцитов совместно с клетками сердечной мышцы эмбриона, с куриными фибробластами или эпителием щитовидной железы человека удавалось получить переживание небольшого числа лимфоцитов в течение нескольких недель (Bloom, 1928, 1937; Pulvertaft, 1959).
Создается впечатление, что тесный контакт лимфоцитов с другими клетками обеспечивает их длительное сохранение
in vitro. Лимфоциты имеют, как известно, небольшое количество цитоплазмы и незначительное число митохондрий. Общий объем митохондрий в цитоплазме малого лимфоцита составляет 0,5— 1,3 мк3, а в клетке печени — 800 мк3 (Trowell, 1965). Поэтому можно предположить, что лимфоциты при установлении контакта с другими клетками — «кормушками» получают из них необходимые продукты метаболизма и энергию в виде АТФ.
Морфологические наблюдения указывают на то, что такие отношения, по-видимому, действительно существуют. При этом лимфоцит, по словам Trowell, выступает скорее как «активный паразит», чем ретикулярные и эпителиальные клетки являются «активными кормушками». Описано, что лимфоциты могут выпускать тонкие, иглообразные нити— псевдоподии, достигающие иногда 100 мк в длину (Pappenheimer, 1913; DeBruyn, 1945; Pulvertaft, Jayne, 1953; Shelton, Rice, 1959). В культурах тимуса и селезенки эмбриона человека лимфоциты способны образовывать длинные отростки и устанавливать связь с ретикулярными клетками (Klein, 1958).
В органных культурах лимфатических узлов на миллипорных фильтрах в зоне роста частой находкой являются характерные группы, представленные ретикулярной клеткой — «кормушкой», окруженной лимфоцитами. Лимфоциты, расположенные на фильтре вне контакта с ретикулярными клетками, быстро подвергаются дегенеративным изменениям.
В образовании вторичных лимфоидных фолликулов в органных культурах можно усматривать особый тип связи ретикулярных клеток и лимфоцитов. Во многих случаях лимфоидный фолликул формируется вокруг характерных сферических структур, образованных ретикулярными клетками.
Поведение лимфоидной ткани в органных культурах показывает, насколько важно для поддержания дифференцировки лимфоцитов in vitro их взаимодействие со стромаль-ными клетками. Эта проблема заслуживает тщательного изучения. Один из подходов к ее разработке может состоять в совмещении в органной культуре лимфоцитов с чистыми линиями стромальных клеток из монослойных культур тимуса, селезенки, лимфоузлов, периферической крови и перитонеального экссудата. Из таких экспериментов могут быть получены сведения о специфических особенностях различных типов стромы лимфоидной ткани и об их влиянии на дифференцировки лимфоцитов.
