Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.
Скачать (прямая ссылка):
хю* Х103
1 7,7 99 1,3 9 13 0^ 34 0,25
2 6 64 1,0 10 7 7** 26 0,3
3 14,5 303 2,0 10 7 ’ 7* 37 0,4
4 8,8 175 2,0 11 10,0* 23 0,2
5 9,0 69 0,7 11 10,0** 29 0,3
6 15,4 33 0,2 12 1 2 0,2
7 3,5* 64 1,7 12 2 7 0,35
7 3,5* 68 2,0 12 3 9 0,3
7 ¦ 3,5** 63 1,9 13 1 15 1,6
7 3,5** 66 2,0 13 2 54 2,7
8 3,5** 103 з,о 13 3 60 2,0
8 3,5* 108 3,0 14 1 3 0,3
8 3,5* 104 3,0 14 1 •3 0,3
; '/9^ 13,0* 24 0,2 14 6 0,3
¦ ¦. ¦ 14 \ J 5 0,25
V: ¦
* Кровь получена однократным пунктир ова ни ем сердца.
** Кровь получена 2—3-кратным пунктированием сердца* ЭКО — эффективность колониеобразования, показывающая, сколько колониеобразующих клеток присутствует среди 105 эксплактированных клеток.
3. СУСПЕНЗИОННЫЕ КУЛЬТУРЫ ЛИМФОИДНОЙ ТКАНИ И КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ
При культивировании лейкоцитов периферической крови, освобожденных от эритроцитов путем осаждения их желатиной, происходит быстрая дегенерация лимфоидных клеток. Иначе ведут себя лейкоциты, обработанные фитогемагглю-тинином (ФГА). Среди суспендированных в среде и прикрепившихся к стеклу лимфоцитов в таких культурах наблюдается трансформация лимфоцитов в крупные базофильные клетки типа лимфобластов, которые способны к 2—3 делениям. Длительных культур пока получить не удалось, срок их существования ограничивается 80 часами (Harris, Littleton, 1966). Фитогемагглютинин вызывает бласттрансфор-мацию лимфоцитов из периферической крови (Rabinowitz, 1963), из лимфатических узлов и миндалин людей (Winkels-tein, Craddock, 1965; Oettgen a. oth., 1966). В культурах ти-моцитов на ФГА реагирует только некоторая часть клеток, которые происходят главным образом из мозгового слоя ти-
муса. Представляется вероятным, что эти элементы являются зрелыми иммунологически компетентными клетками, способными к миграции из зобной железы в другие лимфоидные органы. Доказано, что трансформации подвергаются именно малые лимфоциты, тогда как их менее зрелые предшественники (большие и средние лимфоциты) к действию ФГА не чувствительны (Metcalf, Osmond, 1966; Rieke, 1966). Выдвинуто предположение, что на ФГА могут реагировать только зрелые иммунокомпетентные лимфоидные клетки (Weber, 1966; А. Я. Фриденштейн, И. Л. Чертков,
1969).
Как было показано в дальнейшем, не только ФГА (солевой экстракт из фасоли), но и ряд других агентов (экстракты из растений: лаконоса, пажитника греческого, конских бобов, чечевицы; эндотоксин стафилококков и стрептоли-зин) оказывают аналогичное действие на культуры лимфоцитов. При бласттрансформации в течение 30 часов клетки постепенно увеличиваются в размере, их цитоплазма приобретает базофилию, ядро увеличивается, в нем четко обозначаются ядрышки. Одновременно обнаруживаются и митозы, их максимум совпадает, с пиком образования лимфобластов. В культурах можно наблюдать все переходные формы ог лимфоцита до лимфобласта. Электронномикроскопический анализ трансформированных клеток показывает, что в них увеличивается число свободных рибосом, митохондрий, происходит образование лизосомоподобных включений, пузырьков гладкого эндоплазм этического ретикулума, интенсивное развитие аппарата Гольджи.
В трансформированных клетках наблюдается повышенная синтетическая активность. Уже через 15 минут после введения в культуру ФГА отмечается увеличение синтеза РНК, более сильный эффект проявляется через 2 часа. Синтез РНК в лимфобластах является ДНК-зависимым, так как он блокируется актиномицином D и, очевидно, связан с образованием новой информационной РНК- Одновременно с увеличением синтеза РНК возрастает и синтез белка. Только после повышения в лимфоцитах синтеза и-РНК и белков, в результате чего клетка проделывает процесс превращения (трансформации) в лимфобласт, начинается синтез ДНК. Это происходит не раньше чем через 24—36 часов культивирования. Обычно бласттрансформацию испытывают до 70—95% малых лимфоцитов в культивируемой популяции. Вопрос о механизме действия ФГА остается невыясненным.
Не исключено, что действие ФГА на лимфоциты заключается в дерепрессии части генома, чем обусловливается синтез новой и-РНК и белков, в результате чего малый лимфоцит проделывает трансформацию в лимфобласт [подробно этот вопрос разбирается в монографии А. Я. Фриден-штейна и И. JI. Черткова (1969)]. Можно предположить, что ФГА представляет собой широко распространенный антиген и возникающая под его влиянием бласттрансформация представляет собой иммунологическую реакцию малого лимфоцита на антиген.
