Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.
Скачать (прямая ссылка):
Метод эксплантации в плазменном сгустке позволил получить ценные данные о поведении лимфоидной ткани и отдельных ее элементов в условиях изоляции от организма.
Селезенка
Первое исследование по эксплантации лимфоидной ткани относится к 1910 г., когда Carrel и Burrows провели культивирование фрагментов селезенки котенка в плазме кошки. Было отмечено, что через 24 часа из эксплантата выселяются эритроциты, гранулоциты и лимфоциты. На 2—3-й день в культурах появляются крупные клетки, способные к фагоцитозу, а лимфоциты постепенно исчезают. В последующие сроки зона роста приобретает соединительнотканный характер: клетки в ней располагаются в виде лучей, тянущихся от центра к периферии плазменного сгустка (А. Кронтовский, 1913).
В целом сходные результаты были получены и другими исследователями, которые уточнили некоторые детали поведения клеток в зоне роста. В культурах селезенки кролика были обнаружены клетки, промежуточные по морфологии между лимфоцитами, с одной стороны, и ретикулярными клетками и макрофагами — с другой (А. А. Максимов, 1916). Эти картины, а также разрастание в культурах поздних сроков фибробластов послужили основанием для предположения о трансформации в условиях тканевых культур лимфоцитов в полибласты, а последних — в фибробласты
(А. А. Максимов, 1916). Движение лимфоцитов в зоне роста имеет, как оказалось, амебоидный характер (Fazzari, 1926) и продолжается недолго: например, в культурах селезенки куриных эмбрионов и цыплят только в течение первых суток.
Состав зоны роста в первые дни культивирования зависит от возраста животного-донора: в культурах от 14-дневных куриных эмбрионов в зону роста выселяются кроветворные элементы, а из селезенки взрослых кур — в основном лимфоциты. Вместе с тем в поздние сроки в тех и в других культурах появляются гистиоциты и фибробласты, а выселившиеся лимфоциты и кроветворные клетки гибнут (Fischer, Carrel, 1930).
После 3—4 пассажей число свободных клеток в культурах резко уменьшается, затем после 6 пассажей исходная ткань становится губчатой, кусочек округляется и окружается зоной соединительнотканного роста. После 8 пассажей культура приобретает вид, типичный для чистых культур соединительной ткани (Fischer, Doljanski, 1929).
В длительных культурах селезенки описаны случаи спонтанного образования по периферии эксплантата маленьких очажков, состоящих из 6—8 полиморфных клеток (круглых, продолговатых, многоугольных), различных по размеру. Иногда такие клетки встречаются в большом количестве. Они способны внедряться в цитоплазму фибро-бластов, перемещаться в ней и выходить наружу (Fischer, Doljanski, 1929). Связь этих клеток с лимфоцитами остается неясной.
Лимфатические узлы
Культивированию фрагментов лимфатических узлов в плазменном сгустке посвящены классические исследования А. А. Максимова. Изучение культур А. А. Максимов проводил, применяя метод прижизненного наблюдения и введения витальных красителей, а также исследовал гистологические препараты. Основное внимание А. А. Максимов уделял клеточным трансформациям. И хотя он не располагал современными методами экспериментального анализа, которые появились лишь несколько десятилетий спустя (хромосомные маркеры, тимидиновая метка, изоспецифи-ческие сыворотки и др.), ему удалось сделать ряд важных заключений, многие из которых подтверждены с помощью современных приемов исследования, а другие еще и сейчас
стимулируют эксперименты, направленные к их проверке. В целом работы А. А. Максимова, выполненные в 20-х годах, остаются вполне современными до сих пор.
Эксплантированные фрагменты лимфатических узлов в течение первых суток окружаются зоной амебоидно подвижных клеток, которые передвигаются со скоростью 0,03 мм/мин, образуя псевдоподии (в культурах лимфатических узлов человека) (Lewis a. oth., 1921). Большинство выселяющихся клеток — это малые лимфоциты, которые в последующие дни дегенерируют. Некоторые лимфоциты, расположенные вблизи эксплантата, трансформируются, по мнению А. А. Максимова, в плазматические клетки, а многие ретикулярные клетки освобождаются из синцития и превращаются в фиксированные или свободные макрофаги. Эти элементы отличаются по характерному пузырьковидному ядру, часто в их цитоплазме обнаруживается пигмент, который окрашивается азур-эозином в зеленый цвет.
В последующие сроки в культурах появляется большое количество клеток, морфологически идентичных с фибро-бластами взрослой соединительной ткани. А. А. Максимов считал, что фибробласты происходят из клеток ретикулярного синцития, лежащего на периферии эксплантатов. Внутри кусочка и в областях, прилегающих к его границе, в ходе культивирования образуются гипертрофированные лимфоидные клетки. Морфологически они являются промежуточными для трансформации двух типов:
1) малых лимфоцитов в большие (типа гемоцитобла-стов);
2) лимфоцитов в макрофаги-полибласты, т. е. клетки, подобные тем, которые появляются в организме при воспалении. С течением времени количество лимфоцитов уменьшается и эксплантат превращается в более или менее бедную культуру фибробластов. ,
