Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Лурия Е.А. -> "Кроветворная и лимфоидная ткань" -> 27

Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.

Лурия Е.А. Кроветворная и лимфоидная ткань — М.: Медицина, 1972. — 158 c.
Скачать (прямая ссылка): krovetvornayailimftkan1972.djvu
Предыдущая << 1 .. 21 22 23 24 25 26 < 27 > 28 29 30 31 32 33 .. 68 >> Следующая

рованной среде, где число стволовых клеток составляет на 2-й день 5—10% от исходного и полностью исчезает к .концу 4-х суток.
Таким образом, и в первом и во втором случае стволовые кроветворные клетки в культурах сохраняются недолго — в течение нескольких суток. В каком состоянии они находятся? В экспериментах с введением в питательную среду возрастающих доз Н3-тимидина, вызывающих гибель клеток, находящихся в S-периоде, удалось показать, что большая часть стволовых кроветворных клеток 2-дневных культур, растущих на фидере, находится в состоянии активной пролиферации, в то время как стволовые клетки культур с кондиционированной средой — вне пролиферативного пула: число их под действием Н3-тимидина практически не менялось (McCulloch, Till, 1971). Эти четкие наблюдения свидетельствуют о том, что условия культивирования существенным образом влияют на состояние стволовых кроветворных клеток. Не исключено, что в данном случае условия культивирования способствуют сохранению той или иной части популяции стволовых клеток (пролиферирующей и покоящейся).
Таким образом, в агаровых культурах, в которых в течение 10— 14 дней обнаруживаются очаги миелоидных клеток, стволовые клетки сохраняются лишь в течение первых нескольких дней.
В органных культурах печени мышиных эмбрионов кроветворение поддерживается в течение 24—25 дней (Е. А. Лурия и др., 1969). Возникает вопрос: происходит ли в данных условиях поддержание линии стволовых кроветворных клеток? Длительность гемопоэза в таких культурах косвенно указывает на то, что в популяции присутствуют стволовые кроветворные клетки, постепенно выходящие в дифференцировку, так как сроки кроветворения in vitro намного превышают время пролиферации и дифференци-ровки любых несамоподдерживающихся предшественников.
Для определения количества стволовых кроветворных клеток в органных культурах был использован метод получения кроветворных колоний в селезенке облученных мышей (Н. В. Лациник, Е. А. Лурия, Н. Л. Самойлина, А. Я. Фри-денштейн, И. Л. Чертков, 1969).
Из эксплантатов печени 17—20-дневных мышиных эмбрионов после 7—23 дней культивирования готовили клеточные суспензии, которые для определения числа колониеобразующих единиц (КОЕ) вводили в количестве 4-104—6-104
клеток внутривенно сингенным мышам, облученным в дозе 850 р. На 9—10-й день после трансплантации мышей забивали и в их селезенках подсчитывали количество кроветворных колоний (рис. 18).
Клетки из 7—23-дневных культур после введения их облученным мышам дали образование типичных крупных кроветворных колоний в селезенке (табл. 5). По составу и структуре очаги представляли собой типичные кроветворные очаги, характерные для селезенки облученных мышей,
/
Рис. 18. Схема введения клеток, выращенных в орган, ных культурах эмбриональной печени, облученным
мышам-реципиентам.
/—печень 17—20-дневных мышиных эмбрионов; 2—культивирование в органных культурах в течение 7—23 дней; 3—получение взвеси клеток из культур; 4 — внутривенная трансплантация клеток мышам-реципиентам» облученным дозой 850 р;
5 — колонии кроветворной ткани в селезенках облученных мышей на 10 й день после трансплантации.
которым вводят кроветворные клетки. Среди них преобладали эритроидные очаги. В селезенках мышей, которым трансплантировали клетки из 13-дневных культур, на долю эритроидных колоний приходилось 77,9%, гранулоцитарные составляли 10,7%, мегакариоцитарные — 6,1%, смешанные— 5,3% (Н. В. Лациник и др., 1969).
Таким образом, в органных культурах эмбриональной печени по меньшей мере в течение 3 недель происходит не только размножение и созревание кроветворных клеток, но и поддерживается линия колониеобразующих, т. е., очевидно, стволовых кроветворных клеток.
Таблица 5
Колониеобразующие единицы в культурах эмбриональной печени (по Н. В. Лациник и др., 1969)
Длительность Число введенных жиз Число колоний на Число
культивиро неспособных ядерных селезенку* КОЕ на
вания (в днях) 105 клеток
7 66 8, 13, 16, 20, 21 23,6
7 132 25, 28, 31, 32, 32 22,3
12 54 17,20,21,21,22, 22,23 38,7
13 38 10, 14, 18, 19, 20, 51,5
22, 25, 25, 25
23 16,5 0, 0, 2, 3, 5 11,4
0 0, 0, 0, 0, 0, 0, 0,
0, 0, 0, 0
* Каждая цифра соответствует числу колоний на селезенку одного животного.
Судя по количеству колоний, число КОЕ в эксплантатах эмбриональной печени относительно велико (см. табл. 5.).
Концентрация КОЕ в органных культурах выше, чем в исходном материале. Их концентрация продолжает нарастать до 13-го дня культивирования, когда она составляет 51,5 на 105 клеток. В 23-дневных культурах число КОЕ снижается до 11,4 на 105 клеток, т. е. приближается к уровню, характерному для исходного материала (эмбриональной печени).
Предыдущая << 1 .. 21 22 23 24 25 26 < 27 > 28 29 30 31 32 33 .. 68 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed