Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.
Скачать (прямая ссылка):
В органных культурах костного мозга человека, костного мозга мыши на костной строме и в эксплантатах Эмбриональной печени мегакариоциты встречаются в течение нескольких недель. Часто они образуют очаги-колонии, объединяющие более десятка клеток. Эти очаги обнаруживаются в культурах свыше 20 дней.
Эритропоэз
Возможность прогрессивной дифференцировки элементов эрнтроидного ряда в большой степени зависит от того, эмбриональная или взрослая кроветворная ткань используется для эксплантации, а также от метода постановки культур.
В большинстве исследований по эксплантации костного мозга в плазменном сгустке приводятся сведения о выселении эритроидных элементов с последующей их дегенерацией в течение первых дней культивирования. Однако имеются некоторые данные, указывающие на возможность дифференцировки клеток эрнтроидного ряда и в этих условиях. Так, в плазменных культурах костного мозга кролика Rachmiewitz и Rosin (1943) описали созревание эритроидных элементов. При культивировании костного мозга в сывороточно-агаровых культурах среди нормобластов встречаются митозы и в редких случаях происходит выталкивание ядра из поздних нормабластов, хотя большинство клеток подвергается дегенерации без дифференцировки (Pulvertaft, Humble, 1956).
В плазменных культурах эмбриональной печени человека С. В. Беневоленская (1929) наблюдала эритропоэз, который продолжается в течение 7 —10 дней. Зрелые безъядерные эритроциты сохранялись в сосудах эксплантата более недели после прекращения эритропоэза. По данным Sorieul (1966), эритроидное и миелоидное кроветворение в печени эмбрионов мыши при культивировании во вращающихся пробирках сохраняется до 3 недель. Следует отметить, что работы О. В. Беневоленской и Sorieul являются единственными, в которых описано эритроидное кроветворение в течение длительного периода времени in vitro.
В органных культурах, поставленных по методу Wolff и Haffen (1952) и Е. А. Лурия и др. (1966), эритроидное кроветворение угасает так же, как и в большинстве случаев при использовании Погружных культур, т. е. раньше, чем миелоидное. При культивировании эмбриональной печени эритроидное кроветворение прекращается после 5 дней in vitro.
Есть данные о том, что ряд воздействий позволяет продлить эритропоэз in vitro. Например, в органных культурах костного мозга 18—19-дневного эмбриона цыпленка при эксплантации совместно с печенью куриного эмбриона описано поддержание эрнтроидного кроветворения около 2
недель, в то время как в контрольных культурах оно прекращается через 3 дня (Salvatorelli, 1967). Экстракт и диализат из эмбриональной печени оказывали стимулирующее воздействие на эритроидное кроветворение также в культурах костного мозга (Salvatorelli, 1967). Поддержание эритропоэза в культурах эмбриональной печени мыши описано и при введения в культуральную среду плазмы от анемичных животных (Gallien-Lartique, 1966, 1967).
7. ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ
НА ДИФФЕРЕНЦИРОВКУ КРОВЕТВОРНОЙ
ТКАНИ JN VITRO
Поведение кроветворной ткани в культурах служит хорошей демонстрацией зависимости между дифференциров-кой ее клеток и действием внешних факторов — идеи, которую настойчиво проводил А. А. Максимов. При изоляции кроветворной ткани и особенно при разобщении ее клеток кроветворение прекращается. Именно такая ситуация создается в суспензионных и монослойных культурах, а также в зоне роста плазменных культур. Наоборот, в органных культурах сохраняются взаимодействия клеток как внутри самой ткани, так и с соседними тканями, входящими в состав кроветворных органов. При этом, как было изложено, в органных культурах создаются условия для длительного поддержания кроветворения. Наиболее существенными для дифференцировки кроветворных клеток in vitro представляются локальные межклеточные взаимодействия (внутритканевые и межтканевые) и в особенности взаимодействие с элементами стромы. Этот вывод, следующий из нашего опыта работы с органными культурами, хорошо согласуется с данными, что трансплантированные кроветворные клетки нуждаются для дифференцировки в контакте с генетически полноценной стромой кроветворных органов (McCulloch, Till, 1970) и что тип кроветворения (преимущественное направление дифференцировки потомков стволовых кроветворных клеток) определяется стромой кроветворного органа (Wolf, Trentin, 1968; М. С. Дидух, А. Я. Фриденштейн,
1970). На модели гетеропотной трансплантации (А. Я. Фриденштейн и др., 1968, 1971) отчетливо видно, что объем стромы служит, кроме того, главным фактором, лимитирующим размер кроветворной и лимфоидной ткани, регенерирующей в трансплантатах. При таких пересадках избыточного разрастания стромы почти не происходит,
и поэтому кроветворная и лимфоидная ткани, образующиеся на месте пересадок, оказываются по объему близкими к размерам исходных трансплантатов.
Строма кроветворной ткани в условиях органных культур (в отличие от монослойных культур) также почти не разрастается. Это, очевидно, и способствует той дифферен-цировке стромальных элементов, которая делает их в органных культурах подходящей подложкой для пролиферации и созревания кроветворных клеток. Подобная зависимость кроветворения от взаимодействия со стромой обеспечивает сохранение кроветворных клеток в органных культурах, но с другой стороны ограничивает их пролиферацию. Все это необходимо учитывать при дальнейшем усовершенствовании метода органных культур, если стремиться к увеличению клеточной массы кроветворной ткани, образующейся в ходе культивирования.
