Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.
Скачать (прямая ссылка):
Костный мозг
Судя по имеющимся данным, судьба костного мозга в органных культурах в большой степени зависит от вида животных, от которых берется ткань для эксплантации, и от структуры той кости, из которой извлекается костный мозг.
В органных культурах костного мозга из трубчагых костей взрослых мышей, поставленных на мнллипорных фильтрах AUFS по методу множественных органных культур, кроветворение поддерживается не более 5 дней; в последу ющие сроки наблюдается пролиферация стромальных элементов. Применение мнллипорных фильтров в качество опорного субстрата для эксплантатов позволяет изучать не только высаженный кусочек, но и зону роста, которая образуется вокруг него (Т. О. Прусевнч, Е. А. Лурня, 1968).
На 5-й день эксплантаты уплощаются, вокруг них на фильтре образуется широкая зона роста, состоящая из фагоцитирующих макрофагов и гистиоцитов. В кусочке еще сохраняется большое количество миелоидных клеток и .мегакариоцитов. а также значительное число жировых клеток. Очаги миелоидных элементов, состоящие из десятков клеток, располагаются н в зоне роста над клетками соедини гельнотканного тина.
К 8-му дню наблюдается увеличение зоны роста, состоящей из гистиоцитов и фибробластов, которые лежат
неупорядоченно и на краях зоны роста имеют более крупные размеры. В поры фильтра проникают мелкие гистиоциты с компактным ядром и тонкими ветвящимися отростками. Очагов миелоидного кроветворения в таких культурах уже не обнаруживается, но в значительно*м количестве встречаются лейкоциты с пикнотическими ядрами.
На месте высаженного кусочка в центре зоны роста образуются тяжи из ориентированных фибробластов, отличающиеся более плотной упаковкой от окружающих клеток. Эти структуры дают положительную реакцию на щелочную фосфатазу. Присутствуют также очаги, состоящие из округлых макрофагов и гистиоцитов, цитоплазма которых заполнена крупными зернами пигмента.
В последующие дни в культурах повышается клеточная плотность и фильтры очищаются от детрита. На 14—18-й день в большинстве культур обнаруживаются очерченные поля фосфатазоположительной ткани, занимающие значительную поверхность фильтра. В них преобладают крупные фибробласты, имеющие большое ядро с несколькими ядрышками и полигональные очертания цитоплазмы. По морфологии эти клетки сходны с остеобластами.
В 18-дневных культурах обнаруживаются фосфатазопо-ложительные очаги из тесно примыкающих друг к другу полигональных клеток, между которыми иногда выявляется зернистое основное вещество и большое количество гранул, красящихся метахроматично. *
Таким образом, в органных культурах кусочков костного мозга из трубчатых костей взрослых мышей кроветворение продолжается недолго (в течение 5 дней). В последующие сроки в условиях органных культур формируются фосфатазоположительные очаги, состоящие из ориениро-ванных, компактно расположенных клеток, имеющих сходство с остеобластами. В отдельных участках происходит образование основного вещества. Однако типичных для костной ткани структур в виде костных балок с замурованными остеоцитами и отложения характерного основного вещества в культурах обнаружено не было. Эти морфологические картины могут указывать на то, что в культурах костного мозга мышей образуется остеогенная ткань, не дающая, однако, завершенного остеогенеза.
При эксплантации кусочков костного мозга из бедренной кости морской свинки кроветворные элементы также сохранялись недолго (около 6 дней). Затем возникала популяция гистиоцйтарных элементов, а на 12—14-й день
на фильтре обнаруживались очаги крупных, активно размножающихся фибробластов. Наблюдаемые очаги во многом сходны с описанными для монослойных культур костного мозга морских свинок. Однако в отличие от монослойных культур фибробласты в органных культурах обнаруживают многослойный рост, а также сохраняется популяция гистиоцитарных элементов, часть из которых врастает в поры фильтра и имеет морфологию звездчатых клеток.
В некоторых случаях в органных культурах костного мозга морской свинки выявляются участки фосфатазопо-ложительной остеогенной ткани, которая, однако не дифференцируется в кость.
В отличие от результатов, полученных с костным мозгом мышей и морских свинок, при эксплантации в органные культуры костного мозга из ребра человека наблюдалось интенсивное длительное кроветворение и типичное костеобразование. Костный мозг извлекался из ребер, удаленных при операциях у гематологически здоровых людей. Культивирование проводилось на фильтрах AUFS на среде, содержащей 20% сыворотки человека, куриный эмбриональный экстракт, глюкозу, 1 -глютамин, витамин С, антибиотики. В течение первых дней происходило выселение и пролиферация стромальных клеток, которые имели морфологию фибробластов. В тесном контакте с клетками стромы на фильтре наблюдалось интенсивное кроветворение. До 5 — 6-го дня в культурах происходит как миелоидное, так и эритроидное кроветворение, а в последующие сроки (до 18-го дня включительно) только миелоидное и мегакарио-цитарное. Вплоть до 15-го дня кроветворные клетки, находящиеся на разных стадиях созревания, составляют большую часть поверхностных зон эксплантата. Они образуют обширные сливные очаги, в которых представлены все категории мнелоидных элементов. Однако в отдельных местах можно наблюдать преимущественное скопление клеток, относящихся к какой-либо одной линии дифференцировки, например мегакариоцитов и мегакариобластов. Многочисленные митозы, а также метка Н3-тимидином свидетельствуют о длительной и интенсивной пролиферации миелоидной ткани человека в органных культурах. К 8 — 10-му дню клетки стромы в зоне роста на фильтрах приобретают отчетливые характеристики остеогенной ткани: они проявляют положительную реакцию на щелочную фосфатазу и окружаются основным веществом. В последующие сроки проис-
