Кроветворная и лимфоидная ткань - Лурия Е.А.
Скачать (прямая ссылка):
Почернение автографа, вызываемое меченым преципитатом, свидетельствовало о включении метки в антиген. Результаты определения a-f-глобулина и альбумина в процессе роста культур показали, что культуры синтезируют эти белки в течение 24 дней in vitro (табл. 4). Степень синтеза коррелирует с кроветворением культур и
в большей степени определяется составом питательной среды. Так, введение в среду 1-глютамина способствует не только пролиферации и поддержанию дифференцировки кроветворных клеток, но и более интенсивному и длительному синтезу a-f-глобулина и альбумина (см. табл. 4).
Таблица 4
Сывороточный альбумин (А) и эмбриональный a-f-глобулин в органных культурах печени мышиных эмбрионов
(по Е. А. Лурия и др., 1969)
— ' — - - - ... - I I I .... 1.1 . .щ ШШ.Л 1
3 Время культивирозания (в днях)
Культура V без глюгамина с глютамином
3 5 7 9 12 15 19 23 25
А + ++ 4 4 : 4
a-f + + + 444 4 4 4 4
А + + + 44 ;
Печень a-f +++ 4 4 4
18-дневных А + 4-+ 4 44 + + + 444 4 4
эмбрионов a-f + +- + ¦|" j|i II ||И _ 44 4
А 444 444 4
a-f 4.4 4 44 Л-
t
Костный мозг А - / ' „ п _ --- 7 г 1
взрослых a-f . !г. ---. / -: ¦ _ f ; ,
Кость эмбриона А --- ' -1 * ~ • f ' И - .
a-f . . . у
Условные обозначения: три плюса (-|—|—|-) — четкая положительная реакция на a-f-глобулин (альбумин); концентрация антигена в культуральной среде равна концентрации его в препарате тест-системы; два плюса (-Ы-) — концентрация антигена меньше, чем в тест-системе; плюс (+) — слабая положительная реакция; минус (—) — антиген в среде не выявляется.
Наличие истинного синтеза a-f-глобулина подтверждается иммуноавторадиографически — по включению меченой аминокислоты в исследуемые антигены.
Интересно отметить, что при культивировании эмбриональной печени на среде с добавлением 10—15% свежей человеческой сыворотки наблюдалась более интенсивная пролиферации культур, выражающаяся в формировании обширных многослойных эпителиальных мембран, образовании печеночных балок, разрастании желчных протоков и активации гемопоэза. В таких условиях более длительно поддерживалось эритроидное кроветворение, чем при куль-
Рис. 14. а, б Локализация 1 - f-глобулина п срезах 10-дневной культуры эмбриональной печени (по Н. В Энгельгардт н др.).
тпвнровании на сыворотке крупного рогатого скота. На 10 -11-й лень в эксплантате обнаруживались очаги, в состав которых входило от нескольких десятков до сотни элементов эрнтроидного ряда дифференцировки. В культурах встречались очаги, объединяющие до 40 мегакариоцитов. Интенсивность синтеза сывороточных белков при виеденни свежей неииактивнрованион сыворотки также возрастает.
Исключение из питательной среды эмбрионального экстракта приводит к замещению печеночного эпителия соедн нительнон тканью, что выражается и п прекращении синтеза a-f-глобулина после 8 — 10 дней культивирования. С этим коррелирует и угасание кроветворения.
Как известно, альбумин синтезируется печенью в течение всей жизни, а a-f-глобулнн только в период эмбриогенеза. У мышей и крыс некоторое количество a-f-глобулина обнаруживается в сыворотке в течение первых недель после рождения, а затем исчезает совсем. Следует отметить. что гемопоэз в печени мышей и крыс захватывает вторую половину внутриутробного развития и наблюдается в течение первых дней после рождения. Поэтому можно предполагать, что альбумин не влияет на эмбриональный гемопоэз, в то время как синтез a-f-глобулина находится в связи с этим процессом.
Методом флюоресцирующих антител показано, что и культурах эмбриональной печени синтез u-f-глобулина происходит действительно в эпителиальных клетках. При этом наблюдается свечение не всей печеночной паренхимы, а отдельных балок (рис. 14). Это может указывать либо на гетерогенность популяции печеночного эпителия, либо на асинхронность синтетического процесса.
Интересно, что синтез u-f-глобулина был обнаружен не только в клетках эмбриональной печени, но и в желточном мешке крысиных эмбрионов, который, как известно, является местом эмбрионального кроветворения (Gillin a. oth., 1967). Можно предполагать, что синтез a-f-глобулина имеет прямое отношение к воздействиям, оказываемым эмбриональной печеночной паренхимой на кроветворную ткань и обеспечивающим длительное поддержание миелоидного кроветворения в органных культурах эмбриональной печени. Другие ткани эмбриона данного белка не синтезируют.
