Иммунологические методы исследований - Лефковитса И.
ISBN 5-03-0011-70-6
Скачать (прямая ссылка):
240 Глава 13
---------------------------------------------------------------------7 -
к ИЛ-2 клеток. После их культивирования в течение двУх дней в лунке панелей для микротитрования в присутствии язбытка ИЛ-2 можно измерить включенную радиоактивность, ^сли принять, что в этих условиях пролиферируют все клетки, то можно оценить число регистрируемых импульсов на клетку. После этих подсчетов становится очевидным, что наблюдаемое в опыте включение радиоактивности может «обеспечить» 5%-ная примесь пролиферирующих клеток другого типа.
В заключение хотелось бы отметить, что для предварительной активации клеток мы предпочитаем использовать не ЛПС, а анти-^М-антитела. В последнем случае при рекультивировании наблюдается меньший фон и кривые титрования лучше воспроизводятся. В целом для В-бластов, полученных в результате активации с помощью антител против IgM, характерны лучшие соотношения сигнал/фон и более выраженные ответы в пересчете на одну клетку.
Литература
Andersson J., Melchers F. (1981). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 78, 2497— 2501.
Andersson J., Schreier М. H., Melchers F. (1980). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 77, 1612—1616.
Brooks K, Yuan D., Uhr J. \V., Krammer P. H., Vitetta E. S. (1983). Nature (London), 302, 825—826.
Corbel C„ Melchers F. (1983). Eur. J. Immunol., 13, 528—533.
Dutton R. W., Falkoff R., Hirst J. A., Hoffman М., Kappler J. W„ Kettman J. R., Lesley J. F., Vann D. (1971). Prog. Immunol., 1, 355—368.
Elkins K., Cambier J. C. (1983). J. Immunol., 136, 1247—1251.
Howard М., Kessler S., Chused Т., Paul W. E. (1981). Proc. Natl. Acad. Sci.
U.S.A., 78, 5788—5792.
Howard М., Farrar J., Hilfiker М., Johnson B., Takatsu K., Hamaoka T„ Paul W. E. (1982). J. Exp. Med., 155, 914—923.
Isakson P. С., Pure E., Vitetta E. S., Krammer P. H. (1982). J. Exp. Med., 155, 734—748.
Iscove N. N.. Melchers F. (1978). J. Exp. Med., 147, 923—933.
Leanderson T„ Forni L. (1984). Eur. J. Immunol., in press.
Leanderson Т., Lundgren E., Ruuth E., Borg H., Persson H., Coutinho A. (1982).
Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 79, 7455—7459.
Leptin M. (1983). Ph. D. thesis, Ruprecht-Karls-universitat Heidelberg.
Lernhardt W., Corbel C., Wall R., Melchers F. (1982). Nature (London), 300, 55—357.
Melchers F., Andersson J., Lernhardt W., Schreier М. H. (1980). Eur. J. Immunol., 10, 679—685.
Morgan D. A., Ruscetti F. W., Gallo R. (1976). Science, 193, 1007—1010. Nakamura М., Manser Т., Pearson G. D. N., Daley M. J., Gefter M. L. (1984).
Nature (London), 307, 381—382.
Paige C. J., Schreier М. H., Sidman C. L. (1982). Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 79, 4756—4760.
Parker D. C. (1982). J. Immunol., 129, 469—474.
Schimpl A., Wecker E. (1972). Nature (London), 237, 15—17.
Yoshizakt K„ Nakagawa Т., Fukunaga K., Kaieda Т., Marugama S., Kisliimoto S., Yamamura Y., Klshimoto T. (1983). J. Immunol., 130, 1241—1246.
Глава 14
\
Создание клеточного микроокружения
I. ВВЕДЕНИЕ
О природе ранних предшественников В-клеточного ряда и
о клеточных или молекулярных параметрах, контролирующих дифференцировку этих предшественников, известно очень мало. Результаты многих исследований свидетельствуют о том, что клеточное микроокружение может оказывать существенное влияние на процесс созревания стволовых клеток (Porter, Whelan, 1981). Однако вопрос о том, зависит ли дифференци-ровка предшественников В-клеток от микроокружения, создаваемого клетками ретикулярной соединительной ткани (мезо-дермального происхождения), эпителиальными клетками, дендритными ретикулярными клетками и макрофагами, все еще остается предметом дискуссий.
Как показано в ряде опытов, у предварительно облученных и обработанных 89Sr или облученных и спленэктомированных мышей удается восстановить кроветворение, используя в качестве источника предшественников В-клеток различные ткани зародышей и взрослых животных (Phillips, Miller, 1974; Ro-zing et al., 1977; Auerbach, 1978; Paige et al., 1979). Отсюда следует, что дифференцировка предшественников В-клеток не ограничена какой-либо отдельной тканью. Вместе с тем на основании такого рода опытов трудно сделать окончательное заключение, поскольку использованные клеточные популяции могут содержать элементы, способные создавать эктопическое микроокружение в различных тканях реципиента. Более того, за В-клеточную дифференцировку, наблюдаемую в этих опытах, могут быть ответственны присутствующие в донорской популяции пре-В-клетки, которые способны созревать без специфического микроокружения.
С другой стороны, целый ряд данных свидетельствует в пользу идеи взаимодействия между предшественниками В-клеток и стромальными клетками первичных лимфоидных органов. Используя морфологические отличия в форме ядер у курицы и перепела, можно установить происхождение и проследить судьбу клеток, мигрирующих из рудимента фабрицие-
предшественников
Роланд X. Гислер, Анита Сёдерберг, Фриц Леде?манн
\
\
16—1278
242 Глава 14
