Иммунологические методы исследований - Лефковитса И.
ISBN 5-03-0011-70-6
Скачать (прямая ссылка):
Литература...................................................231
Глава 13. ТЕСТЫ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ЛИМФОКИНОВ, ПОДДЕРЖИВАЮЩИХ РОСТ В-КЛЕТОК (Томас Леандерсон) .... 232
I. Введение...................................................232
II. Материалы..................................................233
III. Условия предварительной активации .... .... 236
IV. Условия рекультивирования..................................238
V. Измерение активности пролиферации..........................239
Литература...................................................240
Глава 14. СОЗДАНИЕ КЛЕТОЧНОГО МИКРООКРУЖЕНИЯ ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ В-КЛЕТОК in vitro (Роланд X. Гислер, Анита Сёдерберг, Фриц Ледерманн) .... 241
I. Введение...................................................241
II. Принцип метода.............................................242
III. Материалы..................................................243
A. Мыши.................................................243
Б. Солевые растворы и среды.............................243
B. Микроносители для прикрепляющихся клеток ... 244
Г. Сефадекс G-I0........................................244
Д. Пластиковая культуральная посуда ..................... 245
IV. Проведение опытов.......................................... 245
А Сбор клеток костного мозга мыши.......................245
Б. Создание микроокружения костномозговых клеток . . . 245
В. Приготовление костномозговых предшественников В-клеток 246
Г. Созревание культур...................................247
Д. Определение функционально активных В-клеток . . . 247
V. Дополнительные замечания...................................251
Литература...................................................252
Глава 15. ДИФФЕРЕНЦИРОВКА ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ В^КЛЕ-ТОК В ПОЛУЖИДКИХ АГАРОВЫХ КУЛЬТУРАХ (К. Дж. Пэйдж,
Е. Скарвалл, X. Саутер, С. Мэгазайни)...............................254
I. Введение...................................................254
II. Экспериментальные методы...................................255
524 Оглавление
A. Приготовление агара ...................................... 256
Б. Приготовление среды.......................................257
B. Приготовление двухслойных культур.........................258
Г. Обнаружение секретируемых антител.........................260
Д. Стимуляторы и условия роста...............................263
III. Краткий перечень полученных результатов....................266
A. Частота встречаемости и абсолютное число клоногенных пре-
В-клеток в процессе онтогенеза...............................266
Б. Временные характеристики процесса образования зон гемолиза ..................................................267
B. Фенотип клеточной поверхности.............................267
Литература...................................................267
Глава 16. ВЫДЕЛЕНИЕ КЛОНОВ АЛЛОРЕАКТИВНЫХ Т-ХЕЛПЕ-РОВ ЧЕЛОВЕКА И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИХ В КАЧЕСТВЕ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ АКТИВАТОРОВ В-КЛЕТОК (А. Ланцавечия) . . 269
I. Цель и принцип метода.......................................269
II. Материалы...................................................270
A. Среда и добавки...........................................270
Б. Интерлейкин-2 (ИЛ-2)......................................270
B. Среда для роста Т-клеток (GM).............................271
Г. Клеточные суспензии.......................................271
Д. Источник клеток-стимуляторов..............................272
Е. Иммуноферментный анализ ..................................272
III. Методика....................................................273
A. Отбор аллореактивных Т-клеток.............................273
Б. Клонирование аллореактивных Т-клеток...................... 274
B. Культивирование клонов аллореактивных Т-клеток . . . 274
Г. Пролиферативный тест......................................275
Д. Хелперный тест активации В-клеток......................... 275
IV. Критическая оценка.......................................... 276
Литература...................................................280
Глава 17. ЦИТОЛИТИЧЕСКИЕ Т-КЛЕТОЧНЫЕ КЛОНЫ И ГИБРИДОМЫ (X. фон Бёмер, В. Хаас)............................................281
I. Введение....................................................281
II. Материалы...................................................281
A. Сбалансированный солевой раствор..........................281
Б. Среда без Саг+ н Mg2+..................................... 282
B. Солевой раствор для ГКН-буфера............................282