Иммунологические методы исследований - Лефковитса И.
ISBN 5-03-0011-70-6
Скачать (прямая ссылка):
III. Разделение по размеру: гель-проннкающая хроматография 107
A. Введение..................................................107
Б. Реагенты и условия элюции.................................107
B. Использование для очистки и характеристики МГФР . . 108
Г. Аналитический вариант.....................................]08
Д. Переход к препаративному разделению.......................109
IV. Разделение по заряду: хроматография на ионообменных носителях и гидроксиапатите...........................................109
А. Ионообменная хроматография (ИОХ)..........................109
Б. Хроматография на гидроксиапатите..........................ИЗ
V. Разделение по гидрофобным свойствам: обратнофазовая хроматография ................................................П5
A. Введение..................................................115
Б. Реагенты и условия элюции.................................
B. Использование обратнофазовой хроматографии . . . . | |g
Г. Общие замечания для аналитического варианта разделения 121 Д. Препаративное выделение..............................123
VI. Количественное определение белка и пределы чувствительности 123
А. Введение..................................................123
Оглавление
521
Б. Реагенты и условия элюции................................124
В. Определение по УФ-поглощению при 280 и 205 нм 125
Г. Сравнение ошибок при количественном определении белка по поглощению УФ-света и колориметрическими методами 125
VII. Очистка белков...........................................128
A. Предварительные замечания................................128
Б. Некоторые необоснованные представления...................129
B. Работа с образцом........................................129
Г. Применение...............................................130
Д. Препаративное разделение.................................131
Литература..................................................131
Глава 7. ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ ЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ ИММУНОГЛОБУЛ ИНОВ (Джеффрн У. Хенсон) .............................133
I. Введение...................................................133
II. ВЖХ: теория, практика и оборудование.......................134
A. Теория...................................................134
Б. Практика.................................................136
B. Оборудование.............................................137
III. Использование ВЖХ для очнсткн и исследования иммуноглобулинов .........................................................139
A. Общие замечания..........................................139
Б. Гель-проникающая ВЖХ (ГП-ВЖХ)............................139
B. Обратнофазовая ВЖХ (ОФ-ВЖХ)..............................143
Г. ВЖХ на гидроксиапатите (ГА-ВЖХ)..........................145
IV. Обсуждение.................................................148
Литература..................................................148
Глава 8. ПОЛУЧЕНИЕ ЛИПОСОМ, СОДЕРЖАЩИХ МЕМБРАННЫЕ БЕЛКИ ЛИМФОЦИТОВ (Питер Робннсон)......................................150
I. Введение...................................................150
II. Выделение мембранных белков................................150
A. Принцип метода...........................................151
Б. Приготовление препаратов клеточных мембран .... 151
B. Выделение мембранных гликопротеннов......................152
Г. Очистка индивидуальных белков с помощью аффинной хроматографии ............................................153
III. Получение лнпосом..........................................154
A. Принцип метода...........................................154
Б. Получение клеточных лнпидов..............................154
B. Синтетические лнпндные смесн.............................155
Г. Получение лнпосом с использованием полистирольных гранул SM2................................................155
Д. Получение лнпосом после удаления детергента диализом 156 Е. Очистка липосом.....................................156
IV. Применение.................................................157
А. Активация цитотоксических Т-клеток.......................157
Б. Перенос макромолекул за счет слияния липосом с клетками 158 Литература.............................................158
Глава 9. ОБНАРУЖЕНИЕ ГЛИКОЛИПИДНЫХ АНТИГЕНОВ С ПОМОЩЬЮ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ (М. Брокхаус) ... 159
I. Введение...................................................159
II. Предварительные тесты......................................160
III. Экстракция лнпидов.........................................160
