Иммунологические методы исследований - Лефковитса И.
ISBN 5-03-0011-70-6
Скачать (прямая ссылка):
2. Приготовление клеток костного мозга зародышей
Клетки костного мозга получают от 14—15-суточных зародышей (отдельно от самцов и самок). Пол доноров определяют визуально по внутренним тканям гонад. Костный мозг вымывают из бедренной и большеберцовой костей, пользуясь иглой № 26. Для получения суспензии, состоящей из отдельных клеток, препарат несколько раз осторожно пипетируют. Для сбора клеток используют охлажденную во льду среду МСИ (Gibco 410-1500) с осмоляльностью 0,350, которая содержит 5% инактивированной нагреванием (56 °С, 30 мин) и осветленной фильтрацией (фильтр Millipore с размером пор 0,45 мкм) куриной сыворотки, 100 ед./мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 2,5 ед./мл гепарина. Для инъекций используют суспензию, содержащую 2-108 клеток/мл. Перед этим суспензии клеток самцов и самок по отдельности фильтруют через 4 слоя стерильной мелкоячеистой хирургической марли и дважды промывают. При подсчете числа клеток эритроциты не учитывают. От одного 14-суточного зародыша в среднем можно получить
1—1,5-106 клеток, а от 15-суточного 2—3,5-106 клеток. В каждый зародыш через 6—12 ч после его облучения иглой № 30 внутривенно вводят по 30-106 клеток в максимальном объеме
0,15 мл.
Зародыши птиц в иммунологии
441
Литература
Altman P. L., Katz D. D., eds. (1979). Inbred and Genetically Defined Strains of Laboratory Animals, Part II, Federation of American Societies for Experimental Biology, Bethesda, Maryland.
Bell D. J., Freeman В. М., eds. (1971). Physiology and Biochemistry of the Domestic Fowl, Academic Press, New York.
Briles W. E., Bumstead N.. Ewert D. L., Gilmour D. G., Gogusev J., Hala K., Koch C., Longenecker В. М., Nordskog A. ft7.. Pink J. R. L„ Schierman L. ft7., Simonsen М., Toivanen A., Toivanen P., Vainio 0., Wick G. (1982). Immuno-genetics, 15, 441—447.
Burnet F. М., Boyer G. S. (1961). J. Pathol. Bacteriol., 81, 141—150.
Chanh Т. C., Chen C.-L. H., Cooper M. D. (1982). J. Immunol., 129, 2541— 2547.
Chen С. H., Chanh Т. C„ Cooper M. D. (1984). Eur. J. Immunol., 14, 385— 391
Chen C. L., Lehmeyer J., Cooper M. D. (1982). J. Immunol., 129, 2580—2585.
Eskola J., Toivanen P. (1974). Cell Immunol., 13, 459—471.
Ewert D. L., Cooper M. D. (1983). J. Immunol., 132, 2524—2530.
Festing M. F. W. (1979). Inbred Strains in Biomedical Research, Macmillan, New York.
Fitzsimmons R. C., Garrod E. M. F., Garnett I. (1973). Cell Immunol., 9, 377— 383.
Foppoli J. М., Ching L. K., Benedict A. A., Ivanyi J., Derka J., Wakerland E. К (1979). Immunogenetics, 8, 385—404.
Freeman W. H., Bracegirdle B. (1978). An Atlas of Embryology, Heinemann, London.
Gilmour D. G. (1984). In: Physiology and Biochemistry of the Domestic Fowl (M. Freeman, ed.), Vol. 5, Academic Press, New York.
Granfors K., Martin C„ Lassila O., Suvitaival R., Toivanen A., Toivanen P. (1982). Clin. Immunol. Immunopathol., 23, 459—469.
Hamburger V., Hamilton H. L. (1951). J. MorphoL, 88, 49—92.
Harry G. G., Cooper D. M. (1972). In: The UFAW Handbook on the Care and Management of Laboratory Animals (Universities Federation for Animal Welfare, eds.), 4th Ed, pp. 424—439, Churchill Livingstone, London.
Hasek М., Hraba T. (1955). Nature (London), 175, 764—765.
Houssaint E., Belo М., Le Douarin N. M. (1976). Dev. Biol., 53, 250—264,
Huang H. V., Dreyer W. J. (1978). J. Immunol., 121, 1738—1747.
Jotereau F. V., Houssaint E., Le Douarin N. M. (1980). Eur. J. Immunol., 10, 620—627.
Kermani-Arab V., Leslie G. A. (1978). J. Immunol., 119, 530—536.
Kincade P. ft7., Lawton A. R., Bockman D. E., Cooper M. D. (1970). Proc Natl. Acad. Sci. U.S.A., 67, 1918—1925.
Kornfeld S., Beug H., Doederlin G., Graf T. (1983). Exp. Cell Res., 143, 383— 394.
Lassila O., Eskola J., Toivanen P., Marten C., Dieterlen-Lievre F. (1978). Nature (London), 272, 353—354.
Lassila O., Eskola J., Toivanen P. (1979). J. Immunol., 123, 2091—2094.
Le Douarin N.. Jotereau F. (1975). J. Exp. Med., 142, 17—40.
Le Douarin N. М., Jotereau F., Houssaint E., Martin C., Dieterlen-Lievre F.
(1982). In: Ontogeny of Avian Lymphocytes in the Reticoloendothelial System (N. Cohen, N. M. Sigel, eds.), Vol. 3, pp. 589—616, Plenum, New York.
Longenecker В. M„ Sheridan S., Law G. R. /., Ruth R. F. (1970). Translantation 9, 544—557.
Longenecker В. М., Mosmann T. R., Shiozawa C. (1979). Immunogenetics, 9, 137—147.
29—1278
442 Глава 9.3
Lucas А. М., Jamroz С. (1961). Atlas of Avian Hematology. USDA Agriculture Monograph 25. U. S. Dept, of Agriculture, Washington, D. S.
Lydyard P. М., Ivanyi I. (1974). Transplantation, 17, 400—404.
Martin C. (1972). C. R. Soc. Biol. Scand., 166, 283.
Martin C., Beaupain D., Dieterlen-Lievre F. (1980). Dev. Biol., 75, 303.
Miller М. M„ Goto R„ Clark S. D. (1982). Dev. Biol., 94, 400—414.
Moore M. A. S., Owen J. J. T. (1965). Nature (London), 208, 956, 989—990.
Oliver P. D., Le Douarin N. M. (1984). J. Immunol., 1748—1755.
Payne L. N. (1972). In: The UFAW Handbook on the Care and Management of Laboratory Animals (Universities Federation for Animal Welfare, eds.), 4th Ed., pp. 440—460, Churchill, London.