Феромоны насекомых - Лебедева К.В.
Скачать (прямая ссылка):
Результаты тестов могут иногда искажаться по причинам, которые бывает трудно найти. При работе аппаратуры, например электродвигателей, могут возникать ультразвуки. Как показано в опытах с непарным шелкопрядом Porthetria dispar, они нарушают ответы самцов на феромон [327].
Определив оптимальные условия тестирования, надо строго соблюдать их, а если это невозможно, регистрировать отклонения от них. Чем более стандартны условия, тем меньше разброс данных.
Способы оценки результатов биотестов. В тестах, где используют в каждом опыте несколько насекомых, определяют за учетный отрезок времени количество насекомых, проявляющих ключевую реакцию или группу реакций. Если учитываемые реакции наблюдаются и спонтанно, без действия феромонов, то определяют фоновую активность за такой же промежуток времени перед опытом. Иногда определяют активность за два или большее число последовательных отрезков времени, усредняя затем эти результаты [305, 308]. Продолжительность учетного отрезка зависит от вида насекомого и способа тестирования. В ольфактометрах с движущимся воздухом в тестах с чешуекрылыми это время, как правило, не более минуты, а обычно меньше [284, 305, 308]. В аренных ольфактометрах с неподвижным воздухом продолжительность тестов с жуками может измеряться десятками минут с многократной регистрацией ответов [297]. При недостатке насекомых можно получить неплохие результаты, если учитывать у каждого насекомого отдельно разные ответы, оценивая каждый ответ числом баллов, пропорциональным биологическому "весу" ответа [32В]. Результаты опытов в ольфактометрах оцениваются как процент ответов R по формулам, аналогичным следующей.
R = ¦ 100 [305].
N-rn
245
Здесь г - число насекомых, давших ключевой ответ; г0 — число насекомых, проявивших ответ спонтанно (фоновая активность) и /V — общее число насекомых в опыте.
В трубчатых ольфактометрах Соуэра учитывают или число насекомых, собравшихся в конце трубы, где находится приманка, или распределение их по секциям, на которые размечается труба [284, 308]. В туннельных ольфактометрах, кроме показателей, упомянутых ранее, могут учитываться длительность разных элементов поведения, число повторов тех или иных действий, скорость движения и т.п.
Поведение — явление статистическое, и при самой лучшей организации тестов неизбежен разброс результатов. Например, при снятии зависимости доза — ответ у зерновой моли Sitotroga cerealella в ольфактометре Соуэра коэффициент вариации ответов был около 20% [284]. Это необходимо учитывать при планировании тестов.
Общая оценка методов ольфактометрии. Как видно из обзора ольфакто-метров и методов тестирования, для биотестирования феромонов с точки зрения обнаружения их аттрактивности наиболее пригодны ольфактометры типа туннельного. С их помощью можно недвусмысленно оценить способность феромона возбуждать анемотаксис в полете, а также вызывать другие ответы. В известной степени это можно сделать и в трубчатых ольфактометрах, однако в них большинство насекомых приближается к источнику запаха не в полете, а по субстрату, но эти два способа передвижения далеко не равноценны. Большинство других ольфактометров и биотестов дают менее определенные результаты. В ольфактометрах одновременно наблюдается целый ряд реакций в рвзных соотношениях, которые обычно невозможно оценить. Такие тесты только показывают, что вещество вызывает те или иные виды ответов насекомых, но будет ли вещество привлекательно в природе, на основе этих тестов с уверенностью сказать нельзя. В целом большинство тестов и методов может быть отнесено к категории недискриминирующих (между разными видами ответов) [273]. К дискриминирующим, основным требованием которых является представление пахучего стимула в форме, которая возбуждала бы только один вид ответов или давала бы возможность измерять разные ответы отдельно [273], могут быть отнесены немногие тесты (например, тесты в туннельном ольфактометре с потоком воздуха, равномерно насыщенного феромоном, для оценки анемотаксиса). Предполагают [273], что для организации дискриминирующих тестов более удобно представлять насекомым не пространственные, а временные изменения запаховой стимуляции. Например, ортокинез, клинокинез, а также вызванные запахом анемотаксис и визуальная ориентация к объектам могут быть возбуждены, если воздух будет протекать горизонтально или вертикально через арену и содержать запах, сила которого будет изменяться во времени.
Несмотря на недостатки простых биотестов, они, очевидно, будут всегда использоваться благодаря их простоте. Необходимо только четко представлять их ограничения и контролировать полученные с их помощью результаты при необходимости болев адекватными с точки зрения поставленной задачи тестами.
Поведенческое тестирование в ловушках в природе
Испытания в ловушках в природе — метод, с помощью которого проверяются все другие методы тестирования и выносится заключительная оценка об аттрактивности вещества. Насекомые реагируют издали на выставленные приманки, если они, конечно, удовлетворяют их требова-
