Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Лебедева К.В. -> "Феромоны насекомых" -> 10

Феромоны насекомых - Лебедева К.В.

Лебедева К.В., Миняйло В.А., Пятнова Ю.Б. Феромоны насекомых — М.: Наука, 1984. — 269 c.
Скачать (прямая ссылка): feromoninasekomih1984.djv
Предыдущая << 1 .. 4 5 6 7 8 9 < 10 > 11 12 13 14 15 16 .. 150 >> Следующая

Сделана попытка подсчитать количество феромона, которое за 1 ч испускает плодожорка G. molesta 3—11-дневного возраста. Для этого 50 самок помещали в стеклянную круглодонную колбу на-250 мл. К концу второго часа колбу заморозили до —20° С, удалили самок, смыли стенки гексаном (10 мл X 2), экстракт отфильтровали, сконцентрировали и анализировали ГЖХ. Нашли, что самка G. molesta испускает в среднем 3,2 нг/ч Z8DDAn 0,7 нг/ч Z8DDOL [ 187]. Аналогичный опыт с - самками G. molesta был проделан другими исследователями, которые нашли в смывах: со стенок колбы четыре компонента феромона -- Z8DDA : E8DDA(100 : 7) и Z8DDOL : DDOL (100 : 20). При этом соотношение Z8DDA и Z8DDOL было 100 : 30, а общее содержание феромона составляло 0,1—0,2 нг/самку [188]. Найдено также, что Z8DDOL эффективно усиливает активность смеси Z-и E8DDA [189].
МЕТОДЫ ОЧИСТКИ ЭКСТРАКТОВ ФЕРОМОНОВ ЧЕШУЕКРЫЛЫХ
Сырой экстракт феромона, каким бы способом он ни был получен, кроме быстрой экстракции чисто отпрепарированных желез или яйцекладов, нуждается в очистке, прежде чем будут идентифицированы его компоненты.
Для этого сырой экстракт иногда подвергают предварительной очистке вымораживанием, реже перегонке или перегонке с паром. Учитывая тот факт, что феромон может находиться в феромонной железе в связанном
17
состоянии, его омыляют (в случае спиртовых компонентов феромона), а затем ацилируют (в случае, елси компоненты феромона — ацетаты). Последние два способа, однако, не пригодны в том случае, если компонен ты феромона — альдегиды. Иногда сырой экстракт подвергают химической обработке с целью перевести в активный компонент феромона полупродукт его биосинтеза, который хранится в железе. Предварительным способом очистки экстракта можно считать также разделение сырого экстракта на кислую, щелочную и нейтральную фракции.
Для окончательной очистки экстракта (а иногда и для предварительной его идентификации) используют разные способы хроматографии: тонкослойную (ТСХ), адсорбционную, эксклюзионную и распределительную жидкостную хроматографию, а также препаративную ГЖХ.
Кроме того, используя свойство феромонов — их летучесть, применяют кодистилляцию летучих веществ непосредственно перед ГЖХ-анализом компонентов феромона.
Все эти методы очистки широко применяются, и, как правило .одновременно используют несколько методов для выделения одного и того же феромона. Каждая стадия любого метода очистки должна контролироваться биотестом.
Предварительные методы очистки экстракта
Вымораживание примесей из сырого экстракта
Основная масса посторонних примесей сырого экстракта может быть удалена из него низкотемпературным высаживанием. Для этого сырой экстракт упаривают почти досуха, а оставшееся масло растворяют в многократном (10—20-кратном) объеме ацетона или метанола. Многочасовое высаживание примесей проводят в интервале температур от —10 до —70 С [5, 46, 151]. Например, масло, выделенное из экстракта хлористым метиленом 1 млн. 200 тыс. самок P. interpunctella, очищали вымораживанием в метаноле при —20 С в течение 24 ч [191]. Экстракт хлористым метиленом 1829 кончиков брюшка Antheraea polyphemus после упаривания растворителя очищали вымораживанием примесей, добавив 200 мл ацетона и охладив ацетоновый раствор до —15° С в течение 36 ч [163].
Очистка сырого экстракта перегонкой
Перегонка в вакууме не популярна в очистке феромонов, так как приводит к значительным потерям активных компонентов (до 40%) [155, 46]. Также достаточно редко для очистки экстракта применяют перегонку с паром; в этом случае дистиллят собирают в подходящий растворитель [192—194]. Например, 43 г активного масла из экстракта 17 тыс. самок Naudaurelia cytherea cytherea перегоняли с паром и дистиллят собирали в свежеперегнанный хлористый метилен. Через 30 ч, когда дистиллят уже не был активным, объединенные фракции дистиллята сконцентрировали на колонке Вигрэ (30 см), перегнали ё потоке азота и получили 0,6 г активного бесцветного масла [169].
Очистка экстракта от кислот
Как правило, компоненты феромонов чешуекрылых относятся к нейтральным веществам, поэтому предварительным методом очистки может служить их выделение В4 нейтральную фракцию. Так, при подщелачивании экстракта 5 300 девственных самок A. fasciata 2,5%-раствором КОН в
18
безводном (или 5%-ном водном) метаноле удается освободиться от кислот и исследовать только нейтральную фракцию [74]. Этот способ был удачно использован также и при выделении феромона Anagasta kuehniella [44], совки Agrotis fucosa [186]. Бензольный экстракт 78 тыс. кончиков брюшка самок непарного шелкопряда P. dispar промывали КОН в водном метаноле в атмосфере азота 2,5 ч. К раствору добавили воду и пентан и оставили на ночь при —5° С. После отделения органического слоя водный слой экстрагировали пентаном. Пентановый экстракт сушили Na2 S04, а водный высаливали и обрабатывали последовательно метанолом, СС14, бензолом, пентаном. Объединенные! экстракты обработали гексаном и хлороформом. Получили органический слой с высокой активностью [149].
Предыдущая << 1 .. 4 5 6 7 8 9 < 10 > 11 12 13 14 15 16 .. 150 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed