Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Лазуркина Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 23

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркина Ю.С.

Лазуркина Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — Наука, 1967. — 343 c.
Скачать (прямая ссылка): fizmetodiisledovaniyabelkov1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 17 18 19 20 21 22 < 23 > 24 25 26 27 28 29 .. 133 >> Следующая

Методы исследования строения белков с регулярным чередованием аминокислот на отдельных сегментах цепей имеют ряд особенностей. Процесс изучения их структуры включает определение основного закона чередования аминокислотных остатков. Этот закон может быть установлен на основании рентгенографических исследований модельных соединений. Однако эти вопросы уже выходят за рамки данной главы.
3. Дифракция рентгеновских лучей под малыми углами на волокнах и растворах биополимеров
На рентгенограммах некоторых препаратов биополимеров в области малых углов дифракции от 1 град и меньше наблюда-юся специфические дифракционные эффекты. Хотя они могут иметь и различную природу, однако во всех случаях дают полезную информацию о структуре макромолекул биополимеров и о строении сложных молекулярных агрегатов.
Для наблюдения дифракции в области малых углов применяют специальную методику, позволяющую фиксировать рассеяние в непосредственной близости от первичного луча. Это достигается использованием очень тонких первичных пучков с малой угловой расходимостью. Для этого применяют длинные коллиматоры с малыми входными и выходными отверстиями, которые могут быть либо круглыми, либо щелевыми. Щелевые диафрагмы дают значительный выигрыш в интенсивности и поэтому используются чаще. Очень удобная и эффективная для работы в области малых углов дифракции схема коллимации была предложена Кратки [83]. Точечные диафрагмы применяют лишь тогда, когда необходимо иметь высокую разрешающую способность в двух измерениях. При работе с малыми углами применяются также фокусирующие методы съемки.
Теории и методам малоуглового рентгеновского рассеяния посвящена специальная монография [84].
Мы рассмотрим здесь два типа дифракционных картин биополимеров, наблюдаемых под малыми углами и покажем, какие данные могут быть из них получены.
а. Дискретное малоугловое рассеяние на тканях и волокнах биополимеров
Волокна многих фибриллярных белков дают в области малых углов дифракции систему дискретных меридиональных линейных рефлексов, сходную с тем, что обычно наблюдается для линейной дифракционной решетки. Подобного типа рефлексы можно наблюдать и на различных тканях, например на нервных волокнах [85], на мышцах [86], а также на агрегатах рибосом [87]. Рефлексы такого же типа, но только экваториальные, дают жидкие кристаллы многих биополимеров. Основные периоды, измеряемые по таким рентгенограммам, имеют порядок нескольких сотен ангстрем (700 А-— мышечные волокна, 200 А— агрегаты рибосом). Иногда число наблюдаемых порядков отражений для основного периода довольно велико (например, 27 порядков отражений для коллагена [88]).
Подобные дифракционные картины обусловлены наличием больших периодов . в распределении электронной плотности
вдоль волокна. Это распределение отражает основные особенности структурообразования сложных упорядоченных молекулярных комплексов, а также специфику строения их отдельных компонент. Поэтому малоугловое дискретное рассеяние может служить экспериментальной основой для построения моделей структуры важнейших биологических систем (таких, как мембраны, мышечные волокна и т. п.).
Обработка рентгенограмм с дискретным малоугловым рассеянием чаще всего сводится лишь к расчету основного периода, определяемого по формуле Брегга — Вульфа. Иногда анализируют относительные интенсивности различных порядков отражений, сопоставляя их с расчетными для определенных моделей. Модели строятся главным образом на основании электронномикроскопических данных.
К настоящему времени убедительно объяснить причину появления дискретных малоугловых максимумов удалось лишь в немногих случаях. К этим случаям относятся исследования полимеров глобулярных белков, таких, как F-актин и фибрин [89, 90]. Структурной единицей этих полимеров являются целые белковые глобулы. Естественно, что спирали, которые образуются из полимерных нитей подобного рода, имеют очень большой шаг и приводят к появлению на рентгенограммах слоевых линий с очень большим периодом. Протяженность этих слоевых линий зависит от толщин рассеивающих агрегатов цепочек. Эти толщины, определяемые размерами белковых глобул, велики, соответственно все слоевые линии наблюдаются в меридиональной части рентгенограммы. Существуют убедительные гипотезы, объясняющие большие периоды в мышечных волокнах [91].
Малоугловые рефлексы, наблюдаемые на рентгенограммах некоторых кератинов и парамиозина, удается объяснить как результат дифракции на биспиральных структурах. Эти структуры могут возникнуть при дополнительном закручивании спирали в спираль с большой величиной витка. Наблюдаемые при этом периоды близки к 200 А.
Во всех остальных случаях интерпретация малоуглового дискретного рассеяния на волокнах менее обоснована. Очень часто дискретные малоугловые рефлексы объясняют упорядоченным расположением белковых субъединиц в волокне (коллаген, миозин). Однако детального сравнения размеров субъединиц и величины периода, наблюдаемого под малыми углами, проведено не было.
Иногда малоугловые рефлексы объясняют как результат периодического расположения аморфных и кристаллических областей в волокнах (коллаген), однако и в этом случае убедительных доказательств представлено не было.
Предыдущая << 1 .. 17 18 19 20 21 22 < 23 > 24 25 26 27 28 29 .. 133 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed