Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Лазуркина Ю.С. -> "Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот" -> 104

Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот - Лазуркина Ю.С.

Лазуркина Ю.С. Физические методы исследования белков и нуклеиновых кислот — Наука, 1967. — 343 c.
Скачать (прямая ссылка): fizmetodiisledovaniyabelkov1967.djvu
Предыдущая << 1 .. 98 99 100 101 102 103 < 104 > 105 106 107 108 109 110 .. 133 >> Следующая

мента также увеличатся за счет секториальной формы ячейки. Общее число молекул полимера в слое, естественно, не изменяется. При этих условиях
'где ct — концентрация молекул полимера в момент времени t в области плато; со — начальная концентрация; хм — расстояние мениска от оси вращения; xt — расстояние границы седиментации от оси вращения.
Граница седиментации определяется положением слоя с концентрацией
Для экспериментального определения коэффициента седиментации s строится график зависимости \пх от времени. Коэффициент седиментации, согласно уравнению (20а), равен отношению тангенса угла наклона соответствующей прямой к со2.
Отступления от линейности наблюдаются в двух случаях: при сильной зависимости коэффициента седиментации от концентрации и тогда, когда растворитель ведет себя как сжимаемая жидкость. Первое выражается в увеличении коэффициента седиментации со временем, так как в силу секториального разбавления раствора концентрация, а следовательно, вязкость и коэффициент трения f уменьшаются. Во втором случае эффект носит противоположный характер ввиду того, что со временем граница продвигается в область все большей плотности и все большей вязкости растворителя. В обоих случаях для вычисления коэффициента седиментации необходимо применять специальные экстраполяционные приемы для приведения 1п х к нулевому моменту времени [27]. Обычно при малых концентрациях зависимость 1п х от с линейна и применение особых методов экстраполяции не требуется.
При измерении молекулярного веса необходимо, чтобы все вели чины, входящие в выражение (19), были измерены при одной и той же температуре. Если, однако, коэффициент седиментации измерен при некоторой температуре, отличной от температуры, при которой определен, например, коэффициент диффузии Д то он может быть приведен к этой температуре. Кроме того, так как коэффициент седиментации (точнее, константа седиментации, см. ниже) является характеристикой индивидуального вещества, необходимо приведение этой величины к некоторым стандартным условиям с определенными температурой, плотностью и вязкостью растворителя. В качестве стандартных условий принимается температура 20°, а плотность и вязкость растворителя — соответствующие этой температуре. Как видно из уравнения (166), коэффициент седиментации s обратно пропорционален коэффициенту трения f. Если изменения температуры невелики, то коэффициент трения f пропорционален вязкости раство-
2
рителя "П, которая в свою очередь обратно пропорциональна температуре растворителя. Таким образом, приведение к заданной темпе-
ратуре производится умножением s< на —, где индекс г относится
По
к условиям опыта, а индекс 0 — к заданным условиям. С другой стороны, коэффициент седиментации s пропорционален (1—Vpp), т. е. с увеличением температуры s увеличивается, так как уменьшается плотность среды рр. Увеличение коэффициента седиментации за счет плотности до некоторой степени компенсируется изменением удельного парциального объема V, который увеличивается с температурой для большинства полимеров на 5 * 10-4 см3/г -град. Следовательно, поправка на плотность вводится множителем -—_^оРо. и
1 - vt Pt
приведенное значение коэффициента седиментации равно:
s = sth--~ItPo . (21)
По 1 — Vt Р?
Значения вязкости % и г|0, плотности р0 и Pt могут быть либо взяты из таблиц, либо определяются опытным путем. Парциальный объем V при заданной температуре определяется экспериментально, а переход к стандартным условиям производится с учетом приведенного выше коэффициента. Основной вклад в выражение (21) вносит
сомножитель —, второй сомножитель в большинстве случаев значило
П; -
тельно меньше —. и часто может быть заменен единицеи.
По
При работе с водными буферными системами коэффициент седиментации приводят к 20° и к вязкости воды аналогичным способом:
_ „ ^ 1 У20Р20
^20, W —•
По 1— Vtpt
Вследствие гидродинамического взаимодействия макромолекул коэффициент седиментации зависит от концентрации седи-ментирующего материала. Эта зависимость для различных веществ выражена в различной мере, и, следовательно, величина s, измеренная при какой-то одной концентрации, не может служить однозначной характеристикой размеров и формы макромолекул. Для исключения взаимодействия макромолекул коэффициент седиментации экстраполируют к бесконечному разбавлению. Полученное таким образом значение называется константой седиментации____s?. которая^ характеризует индивидуальную молекулу.
В табл. 2 приведены значения констант седиментации и молекулярных весов некоторых белков [35]. Часто пользуются так назы-
Таблица 2
Константы седиментации и молекулярный вес для некоторых белков [35]
Предыдущая << 1 .. 98 99 100 101 102 103 < 104 > 105 106 107 108 109 110 .. 133 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed