Биохимия мембран. Рецепторы клеточных мембран. Том 4 - Кульберг А.Я.
Скачать (прямая ссылка):
Глюкагона 113-119 2(димер) + Печень крысы
Соматостатина 90 2 (40; 76) + ? Поджелудочная железа крысы
Энкефалина 100-110 2 (димер) - ? Мозг крысы
Холецистокинина 116 2 (40; 76) + ? Поджелудочная железа свиньи
Антигенсвязываю-щий В-лимфоцитов 180 2+2 {Н 2 L2) Н-52^-70, L-22 +
+ Лимфоциты селезенки
ной из их частей. Многочисленные примеры различий в строении
внутриклеточных участков рецепторов, отвечающих за их эф-фекторные
функции, приведены в гл. 2. Напротив, внеклеточные участки различных по
специфичности рецепторов обладают, видимо, сходством строения (общие
принципы структурной организации, способов формирования активных центров,
первичной структуры). Эти данные подробно обсуждаются в гл. 3. В
некоторых случаях различия между рецепторами связаны с их углеводным
компонентом. Так, в отличие от рецептора инсулина на мембранах
адипоцитов, содержащего углеводный компонент,
14
аналогичный рецептор на клетках мозга определимого количества углеводов в
своей молекуле не имеет.
Функциональная роль полипептидных цепей. Если молекула рецептора
построена из нескольких различающихся по строению полипептидных цепей, их
вклад в организацию активного центра рецептора, равно как участие в
реализации эффекторных свойств, может быть неодинаков. Это положение
иллюстрируют данные о строении рецептора инсулина. Одна из цепей этого
белка (а) участвует в образовании активного центра, в то время как другая
(Р) отвечает за эффекторные свойства рецептора. В других рецепторных
белках разноименные полипептидные цепи совместно участвуют в формировании
активного центра рецептора (см. табл. 1).
С помощью метода метки по сродству удается оценить вклад в организацию
активного центра рецептора боковых аминокислотных остатков полипептидных
цепей, образующих его молекулу. Для этого рецепторный белок с ковалентно
присоединенным к нему лигандом разделяют на полипептидные цепи и
определяют, с какой из цепей связан лиганд (см. разд. 3.1). Каким же
образом лиганд, содержащий только одну реакционноспособную группу, может
оказаться связанным с аминокислотными остатками двух полипептидных цепей,
если обе они участвуют в образовании активного центра? Такая возможность
существует потому, что при отсутствии стерических ограничений
реакционноспособная группировка лиганда способна вступать во^
взаимодействие с любым подходящим аминокислотным остатком в активном
центре, причем вероятность взаимодействия с боковыми остатками
соответствующих цепей будет зависеть от их пространственного расположения
относительно модифицированного лиганда после связывания его в активном
центре.
Метод метки по сродству получил широкое распространение при изучении
активных центров антител. Поскольку антигенсвя-зывающие рецепторы В-
лимфоцитов имеют иммуноглобулиновую природу и не отличаются по строению
своих активных центров от антител, данные, полученные при изучении
последних, приложимы для анализа организации активных центров рецепторов
В-лимфоцитов, а также рецепторов другой специфичности.
В связи с этим необходимо отметить, что реакционноспособный лиганд может
взаимодействовать как с тяжелой, так и легкой цепью молекулы антитела, но
в разных соотношениях. Это соотношение варьирует даже у одинаковых по
специфичности антител, продуцируемых разными клетками, и зависит от
особенностей строения цепей, которые в свою очередь влияют на
расположение в активном центре аминокислотных остатков каждой цепи.
Молекулы рецепторов, образованные парами различающихся или идентичных
полипептидных цепей, содержат активные центры, в образование которых тот
или иной вклад вносят обе цепи. Именно так устроены активные центры
антигенсвязывающих ре-
15
цепторов В- и Т-лимфоцитов (см. гл. 3,4), опиатные рецепторы. Сказанное
выше приложимо для структуры активного центра рецептора трансферина и
рецепторов энкефалина (см. табл. 1).
В случае, когда активный центр формируют идентичные полипептидные цепи,
образующие димер, конфигурация активного центра полностью симметрична.
При этом избирательность связывания лиганда значительно выше, чем при
асимметричной конфигурации центра, и, как следствие этого, сродство
лиганда к рецептору будет весьма велико. Этот вывод согласуется с данными
рентгеноструктурного анализа димера легких цепей иммуноглобулинов,
связывающих тринитрофенильную группу. Последняя целиком заполняет
глубокий щелеобразный карман между вариабельными районами этих целей (J.
Deisenhofer, 1982). Для сравнения можно привести реконструированную
структуру активного центра моноклонального антитела против фосфорилхолина
(рис. 3). Асимметричный по структуре активный центр этого антитела
сформирован при участии разноименных цепей: легкой и тяжелой.
Расположенный в полости центра низкомолекулярный лиганд занимает
небольшое пространство, контактируя лишь с несколькими из образующих его
коротких участков полипептидных цепей.
При существовании в молекуле рецептора нескольких полипептидных цепей
