Жизненные процессы и гидростатическое давление - Крисс А.Е.
Скачать (прямая ссылка):
Таблица 2. Действие повышенного гидростатического давления на вязкость
белковых веществ, углеводов и жиров (Ebbecke, Haubrich. 1936)
Тем Давление, атм
Вещество пера 1 200 400 600 800 2^.100
тура, Hof
°С
Молоко ........ 2,27 2,32 2,39 2,48 2,53 111
Яичный желток .... --- 465 548 581 738 160
Рыбная слизь..... --- 1333 1482 1606 1704 177.8 133
1 н. раствор глюкозы . . . --- 1,09 --- 1.69 --- 1,73 103
2 н. раствор глюкозы . . . --- 3,49 3,58 3,69 3,74 3,76 108
1 н. раствор сахарозы . . --- 3.39 3,48 3,52 3,51 3,75 111
2 н. раствор сахарозы . . 27,0 27,0 27,3 28,7 29,9 111
Насыщенный раствор саха
розы ........ --- 51.5 --- 57.9 61,2 62,0 120
2,5%-ный раствор крахмала --- 29! 19 --- 46.25 56,51 66,45 228
Мед......... --- 3473 4944 5856 7013 7880 227
Жидкий парафин .... 19,5 16.51 24,54 37,51 55,92 79,17 480
Ментоловое масло .... 20 4,65 6,30 8,51 11,96 15,61 336
Касторовое масло .... 20,3 1016 1384 1848 2454 3238 318
Оливковое масло .... 18.5 83.51 118,0 156,8 207,4 264.7 317
Рыбий жир ...... 20 53.88 75.78 96,83 125.5 156,6 291
Ореховое масло..... 20,4 79,43 108.2 143,7 184,2 228,3 288
Установлено (Basset, Macheboeuf, Sandor, 1933), что кровяная
сыворотка, сохраняющая прозрачность после действия давления 3000 атм в
течение 30 мин., с повышением давления при той же экспозиции начинает
опалесцировать, затем становится клейкой. Давление 13 000 атм вызывает
уже полную желатини-зацию. Дальнейшие опыты показали, что раздельно
подвергну-
тые высокому давлению альбуминовые и глобулпновые фракции кровяной
сыворотки неодинаково чувствительны к давлению. Глобулины коагулировали
при 7000 атм, тогда как растворы альбумина не претерпевали изменений даже
при 19 ООО атм.
Устойчивость альбумина в нейтральной среде к действию сверхвысокого
давления побудили Macheboeuf, Basset, Barbu, Le Saget et Nunez (1950)
поставить опыты по влиянию pH на эту устойчивость. Выяснилось, что после
16-часовой продолжительности давления 10 000 атм, при pH, близком к
изозлектри-ческой точке (4,3-4,7), молекулы альбумина образовывали нити.
Раствор белка разделялся на две фазы, различающиеся но концентрации
нитей; часть их выпадала в осадок. В опытах, где pH был несколько выше -
4,85, двухфазность раствора отсутствовала, появлялся осадок, жидкость над
которым была прозрачной. В более кислой среде (pH 3,9) альбумин не
претерпевал изменений - раствор оставался прозрачным.
Серия более детальных исследований денатурации яичного белка и
гемоглобина под действием повышенного давления была опубликована Suzuki
et al.
В первых работах (Suzuki К., 1957, 1958) автор установил, что с
повышением давления на яичный белок, начиная с 3000 - 4000 атм, плавно
уменьшается содержание азота в надосадоч-ной жидкости до порога давления
(6000 атм), после которого концентрация азота мало или совсем не
изменяется. Влияние pH на Денатурацию белка было максимальным в
изоэлектриче-ской точке: наибольшая величина мутности и наименьшее
содержание азота наблюдали в надосадочной жидкости. Отмечено также явно
задерживающее действие температуры (71,5°) на денатурацию овальбумина при
высоком давлении.
Процесс денатурации овальбумина под действием высокого давления был
изучен с помощью и других методов (Suzuki С., Suzuki К., 1962): по
растворимости, изменению угла вращения плоскости поляризации и
протеолизу. Оптический метод применялся, поскольку он позволял судить об
изменениях во вторичной структуре белка, тогда как отношение к протеазам
полнее выявляло отличие денатурированного белка от нативного.
Исследования показали, что результаты определения денатурирующего
влияния высокого давления по растворимости и протеолизу совпадали:
денатурация овальбумина начиналась под давлением около 5000 атм и
заканчивалась под давлением около 9000 атм (рис. 1). Совладение
наблюдалось также в кривых денатурации, полученных по растворимости и
оптическим методом (рис. 2). Авторы отмечают, что под высоким давлением
изменения угла вращения плоскости поляризации были значительно меньшими,
чем в результате денатурации овальбумина теплом и мочевиной; о полноте
денатурации белка под давлением свидетельствовали полнота осаждения и
гидролитического разложения его бактериальной протеазой.
2 4 В в ;L
Ааблеиае, 1D3 кг/см2
Рис. 1.Денатурация белка под давлением
Данные полученные: 1 - методом протеолиза; 2 - шГрастворимости (Suzuki
С., Suzuki К., 1962)
