Жизненные процессы и гидростатическое давление - Крисс А.Е.
Скачать (прямая ссылка):
другие свойства. Повое в этой области - открытие способности высокого
давления ренатурнровать белок, денатурированный нагреванием.
Johnson a. Campbell (1946) обратили внимание на уменьшение
количества преципитата белка, образовавшегося после нагревания раствора
сывороточного глобулина в течение 20 мин. при 65° и атмосферном давлении,
когда этот раствор затем помещали под давление 10 000 ф/д2 на длительный
срок (табл. 6). Как видно из таблицы, процент флокулированного белка
почти не изменился через 65 час. пребывания при атмосферном давлении
раствора сывороточного глобулина, подвергавшегося тепловой денатурации в
присутствии или в отсутствии алкоголя. Однако за этот срок под давлением
10 000 ф/д2 количество флокулята уменьшилось на 31% за счет перехода его
части в раствор, не содержащий алкоголя. Растворимость белка,
денатурированного совместным действием нагревания и алкоголя,
восстанавливалась под влиянием давления не в столь значительной степени.
Таблица 6. Влияние высокого давления на преципитат сывороточного
глобулина" выпавшего из раствора* после его нагревания (Johnson,
Campbell, 1946)
Концен Белок Пре Через 64 часа пребывания при комнат Уменьше
трация в раство ципи ной температуре ние пре
под атмосферным при 10 000 ф/дг
давлением
белок в преципи белок в преципи
растворе, тат (А), растворе. тат (Б),
мг/мл % МГ/МЛ %
0 4,40 40.1 4,30 41.3 5.28 28.6 31.1
0,2 3,12 57,5 3,10 57.8 3.55 51,7 10.5
0,3 2,58 64,9 2.53 65,6 2.87 61.0 7.0
* Раствор содержал 0,735% сывороточного глобулина.
Таблица 7. ренатурация высоким давлением яичного бедка, денатурированного
теплом (Тонгур, 1948, 1949)
Бедок Температура 1 1 Действие дав- Отношение
Белок в раство Вязкость •
и продолжи 1 Давление, 1 ления после растворимо
ре в изоэлект- a g
тельность атм 1 денатурации, го белка к
ричеекой точке Е S
нагревания , часы исходному, %
" ь
Й д S
Ч> сц -
•2 °в
и
Исходный Без нагрева I __ 100 _
___ --->
Денатурированный 62°, 10 мин. 1 --- К2 -
-- --- ---
Ренатурированный - 2000 16 100 -
-- --- ---
" ¦--- 3000 8 97 -
-- --- ---
Исходный Без нагрева 1 --- ---
1,74 0,019 0,08
Денатурированный 65°, 10 мин. 1 --- ---
1,44 0,031 0,12
Ренатуриров анныц 2000 40 ~
1,68 0,023 0,09
Более детально явление ренатурации высоким давлении белка
подвергавшегося тепловой денатурации, исследовали Тонгур и сотр.
(1948,1949, 1950, 1954).
Первые опыты проводили (Тонгур, 1948, 1949) с яичным белком. Его
нагревали при 62°, а затем ставили под давление 2000 и 3000 атм.
Денатурирующий эффект нагревания выражался в выпадении из раствора 18%
белка, но образовавшийся коагулят переходил в раствор полностью или почти
полностью под ука-зйнным давлением в течение нескольких часов.
Иммунологические свойства нативного, денатурированного и
ренатурированного сывороточного альбумина (Тонгур, Касаточ-кин, 1954)
показаны ниже.
Антиген (белок)
Нативный . .
Денатурированный .... Ренатуриров энный ....
Сыворотка Сыворотка
от денату от ренату
рированно рированно
го белка го белка
1/800 V4000
74000 У2000
V1000 74000
Примечание. Титр сыворотки, полученной от нативного белка составлял
'Лооо. Цифры показывают максимальные разведения сыворотки, при которых
еще наблюдалась преципитация.
Дальнейшее изучение ренатурированного давлением яичного белка после
тепловой денатурации его показало (Тонгур, Казьмина, 1950), что помимо
растворимости в значительной мере восстанавливаются такие свойства, как
вязкость и перевариваемость трипсином.
Аналогичные результаты были получены с кристаллическим сывороточным
альбумином. Ренатурированный белок по растворимости, вязкости, углу
вращения плоскости поляризации, степени и скорости перевариваемости
