Исследование биологического материала на металлические яды добрым методом - Крылова А.Н.
Скачать (прямая ссылка):
1 п. НС! в течение 30 с. Солянокислый реэкстракг делят на четыре части и производят реакции: а) к 1 мл реэк-сгракта добавляют КОН до pH 5,0 (по универсальной индикаторной бумаге) и 3—4 капли 5% раствора выделяется осадок Zn2Fe(GN)6 белого цвета;
б) к 1 мл реэкстракта добавляют КОН до pH 5,0 (и
3—4 капли свежеприготовленного 5% раствора Na2S: образуется осадок ZnS белого цвета; в) к 0,5 мл реэкстракта добавляют 10% раствор КОН до pH 7,0—7,5 и 1 мл СНС13, 2—3 капли 0,01 % раствора дитизона в СНСЦ и встряхивают: образуется Zn(HDz)2, окрашивающий СНС13 от розового до красного цвета1; г) на предметном стекле упаривают 3-4 капли солянокислого реэкстракта, остаток растворяют в капле 10% раствора уксусной кислоты и добавляют каплю раствора (NH4)2Hg(SCN)4. в присутствии цинка образуются бесцветные кристаллы ZnHg(SCN)4 в виде «дендритов» или одиночных клинообразных кристаллов (рис. 15).
* При проведении слепого опыта с реактивами слой хлороформа должен оставаться зеленым.
89
Границей обнаружения является содержание цинка в 100 г органа в количестве 1 мг.
При специальном задании качественное исследование производят, как описано выше, но основное значение придают результатам микрокристаллической реакции.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
При обнаружении цинка проводят количественное определение комплексонометрическим методом.
Оптимальные условия экстракции те же, что и для качественного обнаружения цинка, по необходимо отделение кадмия. Минерализат для экстракции берут в количестве не более 50 мл.
Определению не мешает присутствие до 50 мг железа (III) и меди (II) и до 10 мг кадмия (II) в экстрагируемом объеме. Из водных растворов цинк легко экстрагируется: 20 мг цинка полностью экстрагируются при троекратной экстракции. Цинк в большем количестве экстрагируют до полного извлечения.
Перед определением цинка отделяют кадмий экстракцией в виде ДДТК из сильнощелочной среды, как описано выше, а экстракты используют для определения кадмия.
Если обнаружен кадмий в естественном количестве (=?^2 мг в 100 г органа), то экстракцию его производят один раз при рН^12,0 и хлороформный экстракт отбрасывают, а из водной фазы экстрагируют цинк.
В случае обнаружения кадмия в большом количестве производят исчерпывающую экстракцию (контроль--качественные реакции на - кадмий в реэкстракте) и г. экстрактах определяют кадмий, как описано, а цинк выделяют из водной фазы экстракцией.
Методика: к 40—50 мл минерализата добавляют
20 мл 10% раствора К, Na-тартрата, 10 мл раствора глицерина (1:10), жидкость нейтрализуют 8 н. КОН в присутствии 1—2 капель нильского голубого до появления розового окрашивания, добавляют 5 мл щелочи,
10 мл 1% Иа(ДДТК) и экстрагируют СсЦДДТКЬ хлороформом. Оставшуюся водную фазу объединяют с промывными водами, прибавляют по каплям 4 н. H2S04 до pH 8,5 (появление мути и контроль по универсальной индикаторной бумаге) и энергично встряхивают в течение 30 с с 15 мл СНС13. Слой СНС13 отделяют. Добав-
90
ляют 10 мл 1% раствора Ыа(ДДТК) и снова экстрагируют 15 мл СНС13 в течение 30 с. Экстракцию повторяют
2 раза и более до полного извлечения цинка (контроль— качественные реакции на цинк). Экстракты объединяют, промывают водой и производят реэкстрак-цию энергичным встряхиванием в течение 60 с с 10 мл 0,2 н. НС1. После отделения водной фазы реэкстракцию повторяют 2 раза по 30 с. Реэкстракты объединяют, промывают 2—3 мл СНС13,(переносят в коническую кол-бу емкостью 300 мл, добавляют воду до 150—180 мл, 1 мл 20% раствора лимонной кислоты, 10 мл аммиачного буферного раствора и титруют 0,01 н. раствором комплексона Ш в присутствии эриохрома черного ЕТ-00 до перехода красно-фиолетовой окраски в голубую.
1 мл 0,01 н. раствора комплексона Ш соответствует содержанию 0,33 мг цинка.
Формула для расчета:
а-/СО,33-1МОО
*
где х — количество цинка в 100 г органа, мл; а — объем 0,01 н. раствора комплексона III, мл; К — поправка к 0,01 и. раствору комплексона III; V — объем минерализата, полученного после разрушения, мл; Vt — объем минерализата, взятого для определения, мл; п — навеска органа, в г.
Цинк определяется в количестве 1 —100 мг и более в 100 г органа.
СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКАЯ ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
Цинк может быть обнаружен дробным методом как естественная составная часть организма. Дробным методом в 100 г печени было определено 2,73—6,71 мг и в 100 г почек 1,76—6,16 мг цинка. Возрастные и половые различия отмечены не были (А. Н. Крылова).
Н. А. Горбачевой1 методом хроматографического выделения определены следующие границы естественного содержания цинка у человека в норме в 100 г органа:
1 Горбачева Н. А. Хроматографическое выделение цинка из биологического материала при судебно-химических исследованиях. — <Суд.-мед. экспертиза». Сообщение II, 1961, Д'г 3, с. 39—42.
91
в печени 3,36—6 мг; в почках 2,61—5,28 мг; в стенках желудка 0,5—2,9 мг; в стенках кишечника 1,03—2 мг..
