Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Крылова А.Н. -> "Исследование биологического материала на металлические яды добрым методом " -> 21

Исследование биологического материала на металлические яды добрым методом - Крылова А.Н.

Крылова А.Н. Исследование биологического материала на металлические яды добрым методом — М.: Медицина, 1975. — 101 c.
Скачать (прямая ссылка): issledovaniyabiologicheskogomateriala1975.djvu
Предыдущая << 1 .. 15 16 17 18 19 20 < 21 > 22 23 24 25 26 27 .. 37 >> Следующая

Для этого используют простые и наглядные реакции, обладающие соответствующей чувствительностью и специфичностью по отношению к свинцу, ртути и серебру, которые могут находиться в реэкстракте. Чувствительность их составляет: для реакций образования смешанных кристаллов тетрароданомеркуроата меди и цинка и гексацианоферроата кадмия и меди 1 • 10-4 мг меди, а для реакции образования пиридинроданового комплекса 1 -10~3 мг меди в 3 мл экстрагента.
Методика: 10 мл минерализата нейтрализуют МНЮН до pH 3,0 по 2,4-динитрофенолу и 'встряхивают с 5 мл раствора РЬ(ДДТКЬ, хлороформный слой окрашивается в пределах от желтого-до кЯйЙвЙ^ого нвета яа счет введенной или естественно сод姧5Яйся меди. Хлороформный экстракт промывают 6 а затем дистил-
лированной волой до pH 5,0 и с??ова*встряхивают с 1 % раствором HgCI?, добавляя ее дробно по каплям до 0,5 мл и более (в зависимости от окраски СНСК-слоя) цо обесцвечивания хлороформного экстракта. Добавляют 0,5—1 мл 'воды, энергично встряхивают, водный слой отделяют, делят на 3 равные части и производят реакции: 1) добавляют 0,2 г ZnS04 и несколько капель
раствора тетрароданомеркуроата аммония, в присутствии меди осадок окрашивается в розовато-лиловый цвет; 2) добавляют 10 капель 2% раствора CdCb и 1—2 капли 5% раствора гексациа'ноферроата калия, в присутствии меди осадок окращивается в лиловый
R5
цвет; 3) к водному раствору добавляют но каплям (1—2 мл) пиридинроданового реактива до появления мути или выпадения осадка, а затем и 1—2 мл СНС13, в присутствии меди СНС13 окрашивается в изумруднозеленый цвет.
Границей обнаружения меди является ее содержание в количестве 0,4 мг в 100 г органа.
Медь, содержащаяся в естественном состоянии в организме в норме, как правило, при этом не обнаруживается.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Качественными реакциями можно исключить только количество меди меньше или равное 0,4 мг в 100 г органа.
При слабом окрашивании экстракта Си(ДДТК)г определяют количество меди фотоэлектроколориметриче-ским методом, измеряя светопоглощение экстракта, а затем используют экстракт для проведения подтверждающих реакций.
Максимальное светопоглощение раствора Си (ДДТК) 2 в СНС1з наблюдают при 435 нм.
При интенсивиой коричневой окраске экстракта Си (ДДТК) 2 производят комплексонометрическое определение меди.
Фотоэлектроколориметрический метод. 5—10 мл минерализата нейтрализуют до pH 3,0. Добавляют 5 мл СНС13 и 2 мл раствора РЬ (ДДТК) 2 в СНС13, энергично экстрагируют в Течение 30 с. Отделяют слой СНСЬ и снова экстрагиоЙЙЙубг-2 мд хлороформного раствора РЬ(ДДТК)г- ЭкуВшарю продолжают до получения бесцветного сло^'етрв%!': Полученные экстракты объединяют, промывают *од<5й, измеряют полученный объем и светопоглощение на фотоэлектроколориметрс в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при 435 нм.| Раствором сравнения служит СНСЬ.
Закон Бера соблюдается в пределах концентраций меди: 2-10~4 — 1 • 10~2 мг/мл.
Построение калибровочного графика. Калибровочный график строят по точным растворам, приготовленным из стандартного раствора меди (II). Отмеривают определенные количества меди (II), добавляют 4 н. H2SO4 до 10 мл и производят экстракцию Си (ДДТК) 2, как описано при определении меди, с расчетом, чтобы в ко-
55
нечном объеме экстракта соблюдалась концентрация меди.в пределах подчинения закону Бера.
Формул.а для расчета:
__CVa-KlOO
где х — количество меди в 100 г органа, мг;
С — концентрация меди в колориметрируемом растворе, мг/мл; у,, — объем экстракта Си(ДДТК)г, мл;
V — объем минерализата, полученного разрушением органических веществ, мл;
Vt — объем минерализата, взятого для экстракции, мл; п — навеска органа, г.
Медь определяется фотоэлектроколориметрическим методом по ее ДДТК, если в 100 г органа ее содержится 0,05—1 мг и более.
Комплексонометрический .метод. Объем минерализата выбирают в зависимости от результатов качественных реакций. Экстракцию Си(ДДТК)г при значительном . объеме минерализата, взятого для определения, следует производить очень энергично. Раствор РЬ(ДДТК)2 нужно брать дробно по мере надобности. ¦Избытка РЬ(ДДТК)г следует избегать, так как разложение его 6 н. НС1 происходит медленно, а присутствие свинца в большом количестве мешает титрованию меди (II).
То же относится и к ршгти^^^^^Ьорую используют для разложения Си (ДДТК) 2- избыток рту-
ти (II) связывают в комплекга^^^^Нр«м избытка KI.
При титровании меди (11^ИЛ^ксоном III оптимальный pH среды равен 8,0, во время титрования он понижается, поэтому необходимо перед концом титрования добавить NH4OH до pH 8,0.
Методика: 20—50 мл минерализата нейтрализуют концентрированной NH4OH по 2, 4-динитрофенолу до появления слабо-желтого окрашивания. Добавлением
4 н. H2SO4 устанавливают pH 3,0 по универсальной индикаторной' бумаге. Переносят в делительную воронку, добавляют 10 мл раствора РЬ(ДДТК)*в СНС13 и энергично встряхивают в течение 30 с. При интенсивном темио-коричневом окрашивании CHCI3 последний отделяют и продолжают экстракцию отдельными Порциями
Предыдущая << 1 .. 15 16 17 18 19 20 < 21 > 22 23 24 25 26 27 .. 37 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed