Исследование биологического материала на металлические яды добрым методом - Крылова А.Н.
Скачать (прямая ссылка):
Отделяют водную фазу и слой ССЦ встряхивают с 5 мл 0,5 н. НС1 — в присутствии серебра снова появляется зеленая окраска ССЦ (отличие от ртути).
Границей обнаружения серебра является содержание его в 100 г органа в количестве 0,05 мг. При положительной реакции с дитизоном производят основное исследование на серебро реакцией осаждения хлорида серебра.
2. Осаждение хлорида серебра: к 100 мл минерализата добавляют 0,5 г NaCl. Независимо от появления осадка минерализат нагревают приблизительно до 80° и оставляют не менее чем на 2 ч (если за это время не образуется осадок, то оставляют минерализат до следующего дня). Скоагулированный осадок отфильтровывают1, промывают фильтр один раз холодным раствором 0.5 н. НС1 и растворяют осадок AgCl в 0,5—4 мл и более 8 н. NH4OH (в зависимости от величины осадка). Аммиачный фильтрат исследуют:
1. При объеме аммиачного раствора хлорида серебра более 2 мл проделывают макрореакции: а) к '/з
раствора [Ag(NH3)2lCl добавляют HNO3 до рН<1,0, снова наблюдают образование мути или выпадение белого творожистого осадка AgCl;
б) к '/» раствора [Ag(NH3)2lC! добавляют в равном объеме насыщенный раствор KI, наблюдают образование осадка нли мути желтого цвета Agl.
Границей возможного обнаружения серебра макрореакциями служит содержание его в 100 г органа в количестве 1 мг.
1 Отфильтрованный минерализат используют для других реакций на «металлические» яды.
49
. -<i * jr, w.'i'j* '*j
__4... *<.. ~v ¦X» '* ¦ ’' ¦(*“ *. I *' У ¦' .*, f i *• >
*; Рис. 5. Кристаллы [Ag(NH3b]Cl.
v Рис. 6. Кристаллы [Ag(CSN2H4)2l • ¦ [C,H9NR07]
« ; Piic. 7. Кристаллы 2AgCI • 3AuClj-
.« ...«•. * - ' ¦ 1 -¦« . tiRbCI
2. При объеме аммиачного раствора хлорида серебра менее 2 мл проделывают микрореакции:
а) 1—2 капли раствора [Ад(ЫНз)г1С1 помещают на предметное стекло и покрывают часовым стеклом — через 20—30 мин наблюдают образование мелких бесцветных кристаллов в виде треугольников, четырехугольников. Спустя более длительное время, кристаллы окрашиваются в серовато-фиолетовый цвет за счет восстановления серебра. Чувствительность МО-4 мг (рис. 5);
б) 1—2 капли аммиачного раствора хлорида серебра помещают на фильтровальную бумагу, на которую предварительно была нанесена капля сульфата железа
(II) —в присутствии серебра в центре пятна появляется
черная окраска за счет Металлического серебра, а по краям красно-оранжевое кольцо гидроокиси железа
(III). Чувствительность 5-10_3 мг;
в) 1—2 капли раствора [Ag(NH3)2lCl упаривают, на остаток наносят по капле насыщенных растворов тиомо-чевины и пикрата калия — в присутствии серебра наблюдают образование кристаллов пикрата тиомочевин-иого комплекса серебра [Ag(CSN2H4)2] • [C6H2N3O7] желтоватого цвета в виде призм или сростков из них. Чувствительность 3-10-5 мг (рис. 6);
^г) 1—2 капли раствора [Ag(NH3)2]Cl упаривают, на остаток наносят каплю солянокислого раствора, содержащего хлориды рубидия и золота. Через 5—10 мин наблюдают по краям капли образование гранатовокрасных призматических кристаллов и сростков из них тройной соли хлоридов серебра, рубидия и цезия 2AgCl-3AuCl3-6RbCl. Чувствительность 1 -10“4 мг
(рис. 7).
Границей обнаружения серебра микрореакциями после осаждения хлорида серебра является содержание серебра в 100 г органа в кол/ичестве 0,05 мг.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Объемный метод. Титрование роданид-ионом в присутствии в качестве индикатора дитизона используют при резко положительном результате макрореакций на серебро.
В делительиую воронку помещают 50 мл минерализата, добавляют 3 мл ССЦ (или СНС13), 1 мл 0,01% раствора дитизона и титруют 0,01 н. раствором роданида аммония при периодическом встряхивании до тех пор, пока золотисто-желтый цвет слоя ССЦ не изменится на зеленый.
1 мл 0,01 II. раствора роданида аммония соответствует 1,08 мг серебра.
Формула для расчета:
а-К- 1,08-V-100 V^Ti
где х — количество серебра в 100 г органа, мг;
а — объем 0,01 н. раствора роданида аммония, мл;
К — поправка к 0,01 н. раствору роданида аммония;
51
V — объем Минерализата, полученный разрушением органических веществ, мл;
Vi — объем минерализата, взятого для определения, мл; п — навеска органа, г.
Серебро определяется титровайием растворами ро-данидов при содержании его в 100 г органа в количестве 2—20 мг и более.
Фотоэлектроколориметрический метод. При небольших осадках AgCl, особенно выпадающих только при стоянии минерализата, производят фотоэлектроколор^ метрическое определение по AgHDz. Последний легко экстрагируется в широких пределах концентраций серебра.
Методика: 1—5 мл минерализата помещают в делительную воронку, добавляют 1 мл 8 н. H2SO4, 1 мл 10% раствора сульфата гидроксиламииа и экстрагируют 5 мл ССЦ (СНС13), добавляя сначала 1 мл 0,01% раствора дитизона в ССЦ, а затем по каплям, пока при встряхивании в течение 30 с слой СС14 не будет более изменять зеленую окраску на желтую. Отделяют органическую фазу, промывают водный слой небольшим количеством ССЦ, присоединяя его затем к основному экстракту. Экстракт промывают водой, а затем 0,3 н. NH4OH до обесцвечивания. Если экстракт СС14 при этом имеет розовый оттенок (что может быть в результате образования Ag2Dz при промывании щелочью), то встряхивают его с 5 мл 0,2 н. H2S04. Измеряют объем экстракта, а затем светопоглощение его на фотоэлектроколориметре в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм; раствором сравнения служит ССЦ. Максимальное светопоглощение раствора AgHDz е ССЦ наблюдают при 426 нм.
