Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Красногорская Н.В. -> "Электромагнитные поля в биосфере" -> 142

Электромагнитные поля в биосфере - Красногорская Н.В.

Красногорская Н.В. Электромагнитные поля в биосфере — М.: Наука, 1984. — 329 c.
Скачать (прямая ссылка): elektromagnitniepolyavatmosfere1984.djv
Предыдущая << 1 .. 136 137 138 139 140 141 < 142 > 143 144 145 146 147 148 .. 171 >> Следующая

мл/чао) всех устройств примерно одинакова. В последней модели прибора
"Эльфор II" есть блок оптической регистрации фракций в процессе
разделения. Результаты оптического анализа обрабатываются и выводятся на
печатающее устройство в виде гистограммы.
При измерении электрокинетических характеристик клеток крови следует
иметь в виду, что вещества, добавляемые в кровь для предотвращения ее
коагуляции (антикоагулянты) могут существенно исказить результаты
измерений. В частности, прединкубация с гепарином приводит к необратимому
увеличению ЭФП клеток крови. Эффект действия гепарина пропорционален его
концентрации и характеризуется разной степенью влияния на субпопуляцию
клеток в гетерогенной суспензии /II/. Прединкубация форменных элементов
крови в течение 15 мин с 1%-м раствором цитрата натрия, 0.I35/S-M
раствором оксалата натрия, Ь,25 и 0,5%-м раотво-рами ЭДТА не оказывает
необратимого воздействия на величину заряда клеточной поверхности,
следовательно при электрокинетических измерениях зти вещества в данных
концентрациях могут быть использованы в ка-чеотве антикоагулянтов. При
длительной работе с клетками крови ЭШ эритроцитов уменьшается [12?. С
целью воспроизведения результатов из-
18. Зак. 1898
273
мерений ЭФП клеток крови их неоднократно "отмывают" центрифугированием и
затем помещают в известный буфер. Эти методичеокие процедуры могут
изменить поверхность клеток и тоже исказить результаты измерений. Так,
ЭФП эритроцитов, отмытых 0,85^-м раствором хлористого натрия,
увеличивается ДЗ/, однако они гибнут быстрее (особенно пятикратно отмытые
эритроциты), чем в плазме крови.
В последние годы было опубликовано несколько новых способов и устройств
по изучению электрокинетических характеристик клеток и использованию этих
характеристик для препаративного разделения.
В работах /14,15/ для измерения ЭФП эритроцитов использован метод
флуоресцентных зондов, который заключается в одновременной регистрации
объема клеток и интенсивности флуоресценции после добавления в суспензию
поликатионов, окрашенных флуоресцзин-изотиоционатом. Оказалось, что
средняя интенсивность флуоресценции в I мкм2 поверхности клетки
пропорциональна ЭФП эритроцитов и является мерой плотнооти поверхностных
отрицательных зарядов клетки.. С целью изучения распределения плотности
поверхностных отрицательных зарядов в работе /16/ использован метод
микрофотографий, полученных с помощью электронной микроскопии. Для
увеличения разницы в ЭФП отдельных групп клеток в гетерогенной суопенэии
поверхность клеток модифицируют путем добавления в суспензию микросфер
/177. Для получения узкоспецифичеокой модификации только одного вида
клеток микросферы предварительно иммунологически сенсибилизируют-,.т.е.
намного увеличивают их сродство с клетками определенного вида. После
такой обработки авторам удалось электрофоретически разделить два вида
эритроцитов (человеческие и индюшиные), которые до обработки имели
близкие значения ЭФП.
Интересен метод выделения эритроцитов из цельной крови путем
использования магнитного поля /18/. Сущность его заключается в том, что
при пропуокании цельной крови через фильтр (проволочную сетку, помещенную
между полюоами магнита) при определенных скоростях протока и
напряженности МП все эритроциты задерживаются, а лейкоциты и тромбоциты
проходят через сетку. Однако живые и неживые лимфоцита переферической
крови в неоднородном поле ведут себя по-разному - живые выталкиваются из
области сильного МП, а неживые перемещаются по градиенту его
напряженности /19/. Исходя из этого, методика выделения эритроцитов
магнитным путем нуждается в некотором уточнении.
Измерение ЭФП клеток находит в настоящее время применение при изучении
нормальных и патологических изменений в организме при различных внешних
воздействиях и заболеваниях: иммунологических, онкологических, сердечно-
сосудистых и др. /20-247.
В иммунологических и гистологических исследованиях на клетках животных
использовался проточный электрофорез /227. Значительная часть работ /21,
257 посвящена клиническому использованию клеточного электрофореза в
онкологии. Отмечено изменение ЭФП тромбоцитов в начальной
274
стадии инфаркта миокарда и при артериальном тромбозе в ограниченный
период времени (для инфаркта - в течение 10 час, для тромбоза - в течение
24 час) /26/. Дальнейшее изменение ЭФП проследить не удалось, так как
использование в лечебной практике антикоагулянтов (в особенности
гепарина) приводит к восстановлению нормального значения ЭФП. Стрессовые
состояния снижают ЭФП, что в значительной степени сказывается на
повышении агглютинации форменных элементов крови /27/. Любые
неблагоприятные воздействия на эритроциты ведут к разрушению менее
стойких стареющих эритроцитов, обладающих меньшим зарядом. Установлено
/28, 29/,что старение эритроцитов связано с увеличением положительно
заряженных групп на мембране. Исследование распределения эритроцитов по
фракциям при препаративном разделении проточным электрофорезом крови
Предыдущая << 1 .. 136 137 138 139 140 141 < 142 > 143 144 145 146 147 148 .. 171 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed