Электромагнитные поля в биосфере - Красногорская Н.В.
Скачать (прямая ссылка):
возрастных групп эритроцитов, взаимодействие антигенов и антител на
клеточных поверхностях - во всех зтих областях важную роль играют элек-
троюшетические характеристики клеток, связанные с их биологическими
функциями.
271
Использование в клинической практике электрокинетических характеристик
клеток крови основано на том, что дал поддержания оптимального состояния
гемостаза организма форменные элементы крови должны обладать устойчивым
зарядом /3/. Изменение его является интегральным показателем сложных
патологических изменений кровообращения и биохимических сдвигов в
организме.
В электрокинетических измерениях экспериментально определяемым параметром
является скорость движения клетки в суспензии под действием постоянного
однородного электрического поля, по которой рассчитывают электрокинетиче
ский потенциал и плотность поверхностного заряда иосле-дуемых клеток.
Общепринято использовать нормированную скорость - отношение окорости
движения клетки в электрическом поле к его напряженности -
электрофоретическую подвижность (ЭФП). При оформлении результатов
электрокинетических измерений целесообразно пользоваться экспериментально
полученной гистограммой о подобранным шагом по подвижностям, а в случае
сравнительно гомогенной суопензии - средним значением ЭФП и ди-оперсией.
Для гетерогенных суспензий, состоящих из нескольких субпопуляций клеток,
среднее значение ЭФП оерии измерений теряет смысл.
Наиболее распространенными в настоящее время методами измерения ЭФП
являются мшсроэлектрофорез, метод препаративного разделения по зарядам
частиц гетерогенной суспензии в свободном потоке /4-6/ и метод лазерной
допплеровской спектроскопии [1]. Во всех перечисленных методах измеряется
ЭФП клеток, разница между ними заключается лишь в опособах регистрации.
В работе /8/ описана микроэлектрофоретическая полуавтоматическая
установка, в которой вместо традиционной методики измерения времени
прохождения клеткой заданного пути определяется расстояние, пройденное ею
в электрическом поле за фиксированное время. Это позволяет повысить
точность одного измерения, и оократигь общее число измерений при
среднеквадратичной погрешности не более 3%. Следует также отметить
автоматическую установку /9/ для микроэлектрофореза, где используется
гелий-неоновый лазер и вращающийся с заданной скоростью диск с
радиальными щелями, через которые отраженный от движущихся клеток свет
лазера, попадает на фотодетектор. Сигнал с детектора поступает на
электронное уотройство, преобразующее сдвиг чаототы на величину ЭФП
клеток. Этот метод измерения ЭФП более чувствителен, чем метод
допплеровской спектроскопии и позволяет определить ЭФП клеток с высокой
точноотью за короткий промежуток времени,
В настоящее время известны две промышленные установки для
микроэлектрофореза: цитоферометр "Оптон" (ФРГ) и "Пармоквант" (ГДР).
Цитоферо-метр - компактный и простой в обращении прибор. Но ручной режим
работы делает измерения очень трудоемкими и длительными с погрешностью
более 3%. "Пармоквант" /10/ - полностью автоматизированный прибор для
микро-электрофореза. В нем предусмотрены три режима работы: ручной,
полуав-
272
тематический и автоматический; используются разные варианты обработки
результатов измерений на ЭВМ и вывод результатов на печатающее
устройство. Полная автоматизалия ввода пробы, измерений и обработки
результатов позволяет быстро (ЭФП ота клеток измеряется за несколько
минут) и с высокой точностью (1%) получить результаты в виде таблицы или
гистограммы с результатами расчета основных значений (среднего значения
ЭФП, дисперсии, чиола измеренных клеток).
Принцип метода препаративного разделения по зарядам /4-б/ заключается в
том, что гетерогенная суспензия, подлежащая разделению! вводится тонкой
струйкой в равномерно текущий поток жидкости, поперек которого приложено
электрическое поле. Вследствие различного смещения клеток под действием
поля исходная отруя разделяется на фракции, которые отбираются
коллектором в разные пробирки. Этот метод позволяет быстро (десятки-сотни
секунд) без больших повреждений препаративно разделить по зарядам разные
биологические оуопензии - клеточные, субклеточные, молекулярные.
Разрешапцая способность этого'метода неоколько меньше, чем метода
электрофореза на поддерживающих средах, но он незаменим в тех случаях,
когда необходима выоокая скорость разделения.
С середины 70-х годов несколько фирм ФРГ (Бендер и Хобейн, Лабомед,
ДЕСАГА, Биотроник) и США (Бриикман Инструменте) освоили промышленный
выпуок приборов для рассматриваемого метода препаративного разделения
электрофорезом в свободном потоке (модели Эльфор-5, ФФ-48). Эти приборы
имеют прямоугольную камеру, эффективное термостатирование, инжектор для
равномерного ввода суспензии в камеру разделения и некоторые
непринципиальные технические различия. Разрешающая способность приборов
по измерению подвижностей (порядка I0"V/c*B) и производительность (1-3
