Подготовка биологического материала для молекулярно-генетических идентификационных исследований при массовом поступлении неопознанных тел - Корниенко И.В.
ISBN 5-7509-0904-2
Скачать (прямая ссылка):
22R.6 76.96 250.00 212 2409 2886
22R.7 • 00.48 300.00 256 2695 3393
22R.I • 100.85 340.00 269 2819 3762
22R.9 « 103 47 ! 350.00 273 .......лт j 3860
Рисунок 9. Результаты типирования ДНК, выделенной из контаминированного костного фрагмента, по STR-локусам системы AmpFlSTR Profiler Plus РЕ Applied Biosystems: вехняя панель — D3S1358 , vWA, FGA;
вторая сверху панель D21S11, D18S51;
Amelogen in, D8S1179,
третья сверху панель — D5S818, D13S317, D7S820;
нижняя панель
— внутренний размерный стандарт GeneScan-500 ROX.
ABlA
PRISM
0«п*5сапФ3.1
•о
л___
100
•20
140 1в0 1«0 200 220 240 260 280 300 320 340 ЭвО
21 0 ^1-ТЭ4 к л / 734 к *
300
ISO,
0
||? 21 Q: 21*734 к « / 734 к •
240
120
1 в 21 R:2t»734 к * /
m
Dya/Sampt« MJnutM Sin Peak Haight Рмк Агм Oft» Point
Paafc _
r i 218,1 45.47 121.98 534 4078 1705
U 21 B. 2 58.21 178 71 152 1397 ; 21 S3
¦I 1 21 B. 3 60.21 184.71 122 1241 : 2258
• ) 218.4 73.33 236.01 129 1342 2750
f 218, 5 75.4» 244.24 127 1337 I 2631
а 210, 1 41.89 ' 100.21 340 2802 1571
u “210.2 43.17 111.80 300 2231 1619
и 210.» 48.40 135.30 210 1641 1615
t: 21Q. * 54.13 j 180.32 1 181 1626 2030
210. I «5.95 207.43 107 1290 2473
G 210.» 69.60 < 221.65 134 1478 2610
,w 210.7 88 «0 293.58 95 865 3330
С 21Q, 1 92.00 : 305.62 91 894 3450
? 21 Y. 1 51 95 151.65 218 1776 1948
¦ 21 Y. 2 52.91 1S5.S2 216 1807 i 1964
¦ 21Y. 3 65,73 206.60 112 1306 2485
• : my.4 68.91 218.97 126 1501 2584
¦
¦ 21Y.S 86.79 282.42 157 1589 j . .3217
it rt, t • 46.45 100-00 ЪоБ ?4Й ! 151*
; 21R,2 t 49.20 139.00 215 1634 1845
am.* • 51.55 150.00 220 1779 1933
21 H. 4 • 54.05 160.00 2 25 1653 2027
1 21 Я, 9 64,05 200.00 193 2186 2402
, 21R.9 • 77.01 250.00 263 2593 2886
* 21R.7 • 90.53 300.00 309 3036 3305
1.' 21 Я, • • 100 88 340.00 3tfl 3174 3763
r 21R.I • 103.47 350.00 330 3229 3660
t .
Рисунок 10. Результаты типирования ДНК, выделенной из контаминированного костного фрагмента после предварительного декальцинирования костной стружки, по STR-локусам системы
AmpFlSTR Profiler Plus PE Applied Biosystems: вехняя панель — D3S1358 , vWA, FGA; вторая сверху панель — Amelogenin, D8S1179, D21S11, D18S51;
третья сверху панель — D5S818, D13S317, D7S820; нижняя панель — внутренний размерный стандарт GeneScan-500 ROX.
тельно, не взаимодействующие с ДНК) прочные ассоциаты.
На продолжительность действия декальцинирующих растворов влияют несколько факторов, основными из которых является: 1) размер частиц костной пыли, 2) концентрация активного агента, 3) температура, при которой протекает процесс декальцинации, и 4) механическое перемешивание, ускоряющее доступ хелатора к костному порошку. При наиболее оптимальном варианте ткань необходимо извлекать из декальцинирующей жидкости немедленно после того, как из кости удалены последние следы минералов. Для этого необходимо постоянно наблюдать за ходом декальцинации.
Контроль за ходом декальцинации осуществляется в сочетании с заменой декальцинирующей жидкости. Для контроля за завершением декальцинации наиболее удобным является кальций-оксалатный метод, который позволяет обнаруживать кальций за счет преципитации нерастворимых гидроокиси и оксалата кальция. Для проведения этого теста берут приблизи-
тельно 3 мл использованной декальцинирующей жидкости (проверить, чтобы pH была нейтральной) и добавляют к нему 5 мл насыщенного раствора оксалата аммония, хорошо взбалтывают и оставляют на 30 минут. Образование преципитата свидетельствует о том, что в декальцинирующей жидкости имеется значительное количество кальция. Если же исследуемая жидкость остается прозрачной в течение 30 минут, то это означает, что декальцинация завершена.
