Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Конки Д. -> "Культура животных клеток" -> 77

Культура животных клеток - Конки Д.

Конки Д., Эрба Э., Френши Р., Гриффитс Б. Культура животных клеток — М.: Мир, 1989. — 333 c.
ISBN 5-03-000359-2
Скачать (прямая ссылка): kulturajivotnihkletok1989.djvu
Предыдущая << 1 .. 71 72 73 74 75 76 < 77 > 78 79 80 81 82 83 .. 136 >> Следующая

-1
-Х’’4 «¦••*>’{
¦ • ¦. "у л>^кт0мъжгж «одами образца
Регулятор давления Ап» о втекающей жидкости
Рис. 6.3. Схема тока жидкости в приборе FC210 модель 50.
Подача образцов. Система подачи образцов содержит чувствительное к объему устройство для измерения .концентрации клеток, встроенный фильтр одноразового пользования для задержки клеточных агрегатов и вакуумный вытеснитель. Камера входа образца приспособлена для соединения с сосудом
с клеточной суспензией объемом до 30 мл. Все части, имеющие контакт с анализируемым образцом, могут легко сниматься для стерилизации.
2.1.2. Цифровой процессор денных, модель 2103
Процессор 2103 представляет собой многократный анализатор, который воспринимает, хранит и выводит на дисплей две однопараметрические гистограммы данных, цитограммы (двухпараметрический точечный график на встроенный запоминающий осциллограф) и включает периферическое оборудование для накопления данных.
2.1.3. Многомраметрический процессор сигнеиов, модель FC300
Среди многих полезных операций, осуществляемых FC300, отметим следующие:
а) Выбор сигналов из четырех детекторов для вывода на оси X и У цитограммы.
б) Выбор способа анализа сигнала детектора, измерение высоты, площади (или ширины) пика.
в) Выбор логарифмической или линейной шкалы по осям X и У.
г) Определение двух интересующих участков на цитограмме для дифференциального просчета и для сортировки. Эти участки могут быть любой формы, ограниченной двумя парами параллельных линий.
Субпопуляция для сортировки может определяться по размеру и флуоресценции, как, например:
д) Установление интервала для выравнивания смещения двух лазерных лучей вдоль тока клеток.
е) Наблюдение импульсов детектора в зависимости от времени.
ж) Снабжение задней панели коннекторами с временем задержки 45 или 120 мкс для всех поступающих сигналов, сопровождающихся специальными импульсами для удобного перевода в лабораторный компьютер.
2.1.4. Медуль клеточного сортере, модель FC400
Этот модуль обеспечивает физическое разделение субпопуляций клеток в раздельные сборные сосуды.
Тумблер «Отброс совпадений» может быть установлен в положения «Включено» и «Выключено». При положении «Включено» отобранные клетки будут собираться только в том случае, если нет примеси клеток с другими параметрами. Такой режим устанавливается, когда требуется высокая чистота от-
бираемых клеток (95% или выше). При установке тумблера в положение «Выключено» отобранные клетки будут собираться независимо от того, содержатся ли в этой фракции примесные клеши. Такой режим используется, когда требуется максимальный выход клеток, например когда эти клетки редко встречаются в популяции.
На передней панели FC400 установлено несколько контрольных тумблеров. Они обеспечивают выбор числа капель при работе в режиме антисовпадений независимо от числа капель, отклоняющихся на тип команды, и выбор «леток внутри и вне выбранного для сбора интервала. Предусмотрена также временная задержка между выдачей сигнала и ответом.
Имеется также тест-система, позволяющая видеть центральный, левый и правый токи капель. Эта система позволяет проверять стабильность сортера.
Размер и частота образующихся капель определяются главным образом размером отверстия, установленного на выходе проточной ячейки. Поставляются ячейки с отверстиями трех различных диаметров: 50, 75 и 100 М'КМ.
Прибор снабжен устройством для счета клеток. При включенном устройстве прибор автоматически останавливается, когда будет набрано заданное количество клеток. О работе этого устройства свидетельствует горящая сигнальная лампочка. Устройство может быть отключено, и при определенном положении тумблера сортировка клеток продолжается без автоматической остановки.
2.2. Клеточный сортер с активируемой флуоресценцией FACS 440 фирмы Becton Dickinson
2.2.1. Регистрация клеток
Как и в системе Ortho, сигналы светорассеяния и флуоресценции поступают от клеток, когда они пересекают лазерный луч высокой интенсивности (рис. 6.4). Они освещаются ультрафиолетовым аргоновым лазером мощностью 2 или 5 Вт, имеющим первичные эмиссии 800 мВт при длине волны 514,5 нм и 700 мВт — при 488 нм, а также вторичные эмиссии при 501,7; 457,9; 418 и 351,1 нм.
Главное отличие между системами FACS и Ortho Cytof-luorograf заключается в том, что освещение образца в системе FACS происходит в свободно текущем потоке жидкости вне выравнивающей клетки камеры в отличие от анализа внутри проточной ячейки в системе Ortho. Рассеянный свет регистрируется твердофазным детектором со спектральной чувствительностью от 330 до 1100 нм. Апертурная диафрагма ирисного типа позволяет регистрировать рассеяние под малыми углами
Детекторы и оптика для флуоресценции Котировочное вращение
Юст. смещение Юст. вращение
Зеркала
(Г ^
Предыдущая << 1 .. 71 72 73 74 75 76 < 77 > 78 79 80 81 82 83 .. 136 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed