Культура животных клеток - Конки Д.
ISBN 5-03-000359-2
Скачать (прямая ссылка):
с
Рис. 8.3. Клиренс лекарственного препарата из плазмы при внутривенном введении. С — максимальная концентрация в плазме, ti/г — время полужизни лекарства. Точками выделена область под кривой для Т=1 ч (мкг/мл/ч).
Таблица 8.1. Сравнение теоретической^ концентрации в плазме и фармакокинетических данных [28] для ряда противоопухолевых химиотерапевтических агентов
Лекарство Доза Теоретическая кон Измеренный пара
центрация в плазме, метр СХТ, мкг/мл/ч
мкг/мл
Мелфалан 0,6 мг/кг 0,86 0,87---5,50
Цитозинарабинозид 10 мг/кг 14,29 15,23
BCNU2» 2,25 мг/кг 3,21 1,02
5-Фторурацил 15 мг/кг 21,43 13---21
Цисплатин 100 мг/м2> 3,8 1,42---2,52
Винбластин 0,2 мг/кг 0,29 0,116---0,254
!) Вычисления делались в расчете на возможного пациента весом 60 кг с 70%-иым жидкостным компартментом.
2) 1,3-бис-(2-х лорэти л)-1-нитрозомочевииа.
Естественно, что на основании выбранных концентраций всегда можно нарисовать график зависимости эффекта препарата от его концентрации; выбор тех или иных доз лекарственных веществ часто отражает чувствительность методов, выбираемых разными исследователями.
5. Продолжительность воздействия лекарственного препарата
Результаты фармакокинетических исследований показывают, что максимальный эффект лекарственного вещества проявляется в течение 1 ч после его внутривенного введения и по этой причине многими исследователями выбирается 1-часовой период воздействия. Это время оказывается достаточным для проявления действия алкилирующих агентов — препаратов, действующих в продолжение всего клеточного цикла. Для препаратов, действующих в определенной фазе клеточного цикла, таких как метотрексат и винбластин, требуется более долгий период воздействия в течение нескольких клеточных циклов. Было показано, однако, что увеличение периода воздействия многих противоопухолевых химиотерапевтических агентов приводит к постепенному снижению значения ИД50 (дозы, ингибирующей жизнеспособность клеток на 50%) [29] (рис. 8.4). Лимитирующим фактором при коротких периодах воздействия может оказаться также скорость проникновения лекарства. Чувствительность клеток к кратковременному воздействию лекарства зависит также от метода исследования: после 1-часовой инкубации клеток с алкилирующими агентами отмечается высокий уровень гибели клеток при клонировании их в суспензии, а при клонировании их на стекле или пластике такая продолжительность воздействия оказывается неэффективной.
В конечном счете вопрос о длительности инкубации решается в каждом случае экспериментально. Если достоверный результат достигается после 1-часового воздействия, то этот период и следует использовать. Многие препараты необратимо связываются с компонентами клеток, так что истинная про-
Тис. 8.4. Влияние продолжительности воздействия препарата на значение ИД50 для 6-меркаптопурина (МП), тиогуанина (ТГ), метотрексата (МТ), циклофосфамида (ЦФ), хлорамбуцила (ХА), мустина (МУ), тиофосфамида (ТФ) и винбластина (ВБ) для клеток HeLa в тесте на микротитровальных пластинках (разд. 9.4.2). Лекарства заменяли на свежие каждые 24 ч, если чувствительность определяли через 48 и 72 ч, н через 24, 48 и 72 ч при 7-дневном испытании. На оси абсцисс показан разрыв между днями.
(Воспроизводится с разрешения издателей [29]).
должительность воздействия может превышать 1 ч благодаря удержанию клетками лекарства. Действие других лекарств, например антиметаболитов и антитубулинов, оказывается преимущественно обратимым, если не задело чувствительной фазы клеточного цикла; в этом случае может потребоваться увеличение времени воздействия на один или несколько клеточных циклов. Резистентность клеток после короткого времени воздействия может означать, что клетки находились в неподходящей фазе .клеточного цикла во время воздействия лекарства. Истинно
же резистентные клетки (то есть клетки, сохраняющие жизнеспособность после воздействия лекарства в течение чувствительной фазы цикла) могут быть однозначно выявлены только после достаточно длительного воздействия.
Независимо от выбранной продолжительности воздействия она должна сохраняться постоянной при сравнении действия
Таблица 8.2. Стабильность растворов некоторых противоопухолевых химиотерапевтических агентов при 37 "С11
Лекарство Данные о стабильности Ссылка
Адриамицнн Стабилен в течение 48 ч лрединку-
бации
Блеомицнн ---»---
5-Фторурацил ---»--- Вилсон (неопубли
Цитозинараби- ---»---
нозид кованные дан
