Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Кондрахин И.П. -> "Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики" -> 53

Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.

Кондрахин И.П., Архипов А.В., Левченко В.И., Таланов Г.А., Фролова Л.А., Новиков В.Э. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики: Справочник. Под редакцией Сайтаниди В.Н. — М.: Колос, 2004. — 520 c.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка): metodvetkllabdia2004.djvu
Предыдущая << 1 .. 47 48 49 50 51 52 < 53 > 54 55 56 57 58 59 .. 246 >> Следующая


18. Схема постановки реакции для определения билирубина

Реактив, мл
Контроль для общего билирубина, мл
Общий билирубин, мл
Контроль для связанного билирубина, мл
Связанный билирубин, мл

Разведенная сы-
0,5
0,5
0,5
0,5

воротка 1: 1





Кофеиновый ре-
1,75
1,75



актив





0,9%-ный раствор
0,25

2
1,75

NaCl



Диазосмесь

0,25

0,25

Из показателя оптической плотности проб общего и связанного билирубина вычитают показатель оптической плотности контрольных проб и по калибровочному графику определяют содержание общего и связанного билирубина в мг/100 мл сыворотки крови или в мкмоль/л, а по разнице между ними — содержание свободного (неконъюгированного) билирубина.

Источник: 20.

Клиническое значение. Билирубин — желчный пигмент, образуется в клетках ретикулоэндотелиальной системы печени и селезенки при распаде гемоглобина, миоглобина, ци-тохромов. Он ядовит, плохо растворим в воде. При поступлении с кровью в печень в гепатоцитах происходит обезвреживание его пу-

112

тем присоединения глюкуроновой кислоты. Соединения билирубина с глюкуроновой кислотой (моно- и диглюкурониды) растворимы в воде и непосредственно реагируют с диазореактивом. В этих соединениях заключен так называемый прямой (связанный) билирубин, который выделяется в желчь и поступает в кишечник, где превращается в уробилиноген.

В сыворотке крови животных содержится билирубин, связанный с глюкуроновой кислотой, или прямореагирующий, и конъ-югированный свободный непрямореагирующий билирубин.

Повышение содержания билирубина в сыворотке крови (гиперби-лирубинемия, желтуха) отмечается при гепатите, циррозе печени, острой токсической гепатодистрофии, опухолях печени. При этих болезнях увеличивается уровень в крови как несвязанного (свободного), так и связанного (конъюгированного) билирубина. При гемолитической желтухе, обусловленной гемолитическими ядами или кровопаразитами (протозоо), концентрация билирубина в крови повышается в основном за счет свободного (несвязанного) билирубина. В последнее время разделению билирубина на фракции в клинике не придают особого значения, оценивают в основном количество общего билирубина.

Коллоидно-осадочные пробы. Для оценки белковосинтетизиру-ющей функции печени, диагностики и прогнозирования бронхопневмонии и других патологических состояний широко используют осадочные пробы. Применение их основано на изменениях коллоидной устойчивости белков в сыворотке крови.

У здоровых животных белки в сыворотке крови находятся в коллоидном состоянии и отличаются высокой устойчивостью. При многих заболеваниях изменяется белковый спектр сыворотки крови, наступает диспротеинемия — снижение содержания альбуминов и повышение количества глобулинов, вследствие чего коллоидная устойчивость белков сыворотки крови снижается, под действием определенных веществ наступает преципитация, приводящая к помутнению.

Предложено много осадочных проб с применением реакции Токата (пробы Токата, Гросса, сулемовая); тимоловая проба; кофеин-холестериновая проба; цинк-сульфатная проба; реакция Валь-тмана; золото-коллоидная проба; проба с сульфатом меди и др.

Хотя осадочные пробы не специфические, однако позволяют устанавливать степень нарушения соотношений между альбуминами и глобулинами сыворотки крови. Положительные коллоидно-осадочные пробы чаще обусловлены увеличением содержания глобулинов и уменьшением количества альбуминов. Ускорение коллоидно-осадочных реакций наблюдается также вследствие увеличения грубодисперсных белков —у-глобулинов при нормальном коэффициенте альбуминов (глобулинов).

8 — 4196

113

Осадочные пробы в сочетании с данными клинического состояния животных, наличием признаков заболевания печени, легких или других органов — ценные диагностические тесты.

Сулемовая проба. Принцип. Сулема в присутствии мелкодисперсных коллоидов (белков) образует коллоидный раствор солей ртути. Нарушение дисперсности белковых фракций сыворотки крови вызывает осаждение грубодисперсных частиц.

Реактивы: при исследовании сыворотки крови крупного рогатого скота 100 мг двухлористой ртути растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл (100 мг%-ный). При исследовании сыворотки крови кур и лошадей берут 600 мг сулемы, растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл (600 мг%-ный);

натрия хлорид, 154 ммоль/л (0,9%-ный). 9 г соли растворяют дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 1 л.

Оборудование: микробюретка на 2 или 5 мл с оттянутым носиком; стаканчики на 50 мл.

Ход определения. В стаканчик вносят 1 мл 0,9%-ного раствора натрия хлорида и 0,5 мл сыворотки крови, перемешивают. Из микробюретки (или пипетки) медленно, по каплям с интервалом 20—30 с титруют до стойкого помутнения, при котором через вертикальный слой жидкости нельзя прочитать газетный текст. Результат выражают в мл раствора сулемы, пошедшего на титрование.

Источник: 43.

Примечание. Концентрация раствора сулемы для сыворотки крови крупного рогатого скота, лошадей и кур нами (И. П. Кондрахин) подобрана опытным путем.
Предыдущая << 1 .. 47 48 49 50 51 52 < 53 > 54 55 56 57 58 59 .. 246 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed