Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
Наиболее часто в клинических лабораториях пламенную фотометрию используют для определения содержания калия и натрия, тем более что обычные химические методы определения этих элементов сложны и неточны.
На российском рынке на сегодняшний день представлено значительное количество пламенных фотометров различных фирм. Наиболее оптимален для работы диагностической клинической лаборатории отечественный ФПА-02, поставляемый с компрессором.
1.5. АТОМНО-АБСОРБЦИОННЫЕ СПЕКТРОФОТОМЕТРЫ
Атомная абсорбциометрия используется для количественного определения содержания металлов в растворах. Принцип работы атомных абсорбциометров основан на поглощении ультрафиолетового или видимого излучения атомами газа. Для перевода образца растворенного вещества в газообразное состояние раствор впрыскивают в пламя. В качестве источника излучения применяют лампу с полым катодом из того же металла, что и определяется в данный момент. Спектральная ширина линии, испускаемой источником света, как и линии поглощения того же самого элемента в пламени, порядка 0,001 нм, поэтому мешающее поглощение других присутствующих элементов практически исключено.
Температура пламени, как и в случае пламенной фотометрии, определяется горючей газовой смесью. При определении элементов, образующих труднодиссоциирующие соединения (алюминий, бериллий, кремний, ванадий, молибден), используют высокотемпературное пламя (ацетилен — оксид азота). Для клинической лаборатории в большинстве случаев достаточно воздушно-пропано-вого пламени.
11
Фотометры для атомной абсорбции — высокочувствительные приборы, но для каждого определяемого элемента должна быть своя лампа, что конструктивно усложняет прибор.
Как и в пламенном фотометре, в атомно-абсорбционном для распыления используют различные эжекторы. Интенсивность распыления зависит от условий их работы, на что, в свою очередь, влияет вязкость раствора. Поэтому при работе с вязкими, богатыми белком жидкостями, такими, как сыворотка крови, разведение должно быть всегда одним и тем же.
Преимущество атомной абсорбциометрии перед традиционными методами анализа проявляется в полной мере в клинической лаборатории при определении таких микроэлементов, как медь, марганец, цинк, а также при токсикологических исследованиях при определении содержания ртути.
Из представленных на рынке атомно-абсорбционных спектрофотометров можно выделить отечественный «Квант-2А» с пламенной атомизацией и его модификации, отличающиеся комплектацией и другими способами атомизации образца, а также «Анали-тик-2000» и «Спираль-17». Однако все приборы весьма дорогие.
1.6. ПОЛЯРИМЕТРЫ
Приборы этой группы применяются для поляриметрического анализа, основанного на измерении угла вращения плоскости поляризации луча света, прошедшего через оптически активную среду.
Многие вещества способны изменять плоскость поляризации поляризованного света, причем угол изменения плоскости поляризации бывает пропорционален концентрации этого вещества. Поляриметры имеют источник света — поляризатор — прозрачную кристаллическую пластинку, пропускающую свет, поляризованный в определенной плоскости; устройство для кювет с анализируемым веществом и анализатор — вторую пластинку, пропускающую поляризованный свет, вращая которую можно измерить угол смещения поляризации в луче света, прошедшем через раствор, по отношению к плоскости исходного луча.
Таким образом, свет проходит через светофильтр, пропускающий только узкий диапазон длин волн, конденсор, формирующий луч, поляризатор, кварцевую пластинку, кювету с анализируемым веществом, анализатор, объектив и окуляр и попадает в глаз исследователя. Вращением регулирующего устройства выравнивается освещенность двух (или иногда трех) полей, наблюдаемых исследователем в объективе. Регулирующее устройство имеет градуировку, по которой определяется угол смещения поляризации и в конечном итоге концентрация вещества.
При вращении анализатора в поляриметрах П-161М и П-161CM и две наружные части поля освещаются или затемняются в зависимости от угла поворота, а средняя часть поля меняет освещенность в обратном порядке. Показания с оптической шкалы ре-
12
гистрируют при положении, когда средняя часть поля затемняется одинаково с крайними, а границы полей исчезают. Определение правовращающих веществ на CM проводится на шкале 0—35°, а левовращающих — от 360 до 325°, при этом угол вращения определяется как разница между 360° и величиной отсчета по шкале. В автоматических поляриметрах «Р 3002 KRUSS» или «Polartronic N Н8» никакого вращения анализатора не требуется, все результаты сразу высвечиваются на шкале дисплея, но стоимость этих приборов в 10 раз выше.
Особое место занимают специализированные поляриметры — сахариметры, специально предназначенные для определения содержания Сахаров в различных жидкостях. В лабораторной клинической практике широко применяется для анализа глюкозы в моче поляриметр MP-1010, используемый и для выявления фальсификации меда сахаром при ветеринарно-санитарной экспертизе. Чаще всего с этой целью пользуются поляриметрами П-161М и СУ-5.
