Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
Снижение уровня кальция в крови при вторичной остеодистрофии связано, вероятно, с гипофункцией околощитовидных желез и недостаточным синтезом паратгормона.
Резко выраженную гипокальциемию наблюдают при послеродовом парезе. Объясняется такое явление, очевидно, гиперсекрецией кальцитонина, вырабатываемого С-клетками щитовидной железы, который в противоположность паратгормону способствует минерализации кости и понижает уровень кальция в крови.
Причиной гипокальциемии может быть гипофункция околощитовидных желез. Так как кальций участвует в нервно-мышечном возбуждении, то при его резком снижении появляются тонические, клонические судороги и парезы.
Гипокальциемия возможна при гломерулонефрите, интерсти-циальном нефрите, когда наступает гипопротеинемия, а следовательно, потеря связанного с белком кальция; при остром панкреатите из-за избытка глюкогона; опухоли щитовидной железы в связи с избыточной продукцией кальцитонина.
Повышение содержания кальция в крови может быть при передозировке витамина D, гиперфункции паращитовидных желез, длительном применении антоцидов при язвенной болезни.
Определение неорганического фосфора в сыворотке крови с ва-надат-молибденовым реактивом (по Пулсу в модификации В. Ф. Коромыслова и Л. А. Кудрявцевой). Принцип. Фосфор в безбелковом фильтрате дает лимонно-желтое окрашивание с вана-
82
дат-молибденовым реактивом. Степень окраски измеряют на фо-тоэлектроколориметре.
Реактивы: 20%-ный раствор трихлоруксусной кислоты;
реактив на фосфор. Готовят его смешиванием 500 мл 0,234%-ного раствора аммония ванадата, 1000 мл 2,5 н. (2,5 моль/л) раствора соляной кислоты и 1000 мл 3,53%-ного раствора молибденовокислого аммония. 0,234%-ный раствор аммония ванадата готовят путем растворения 2,34 г вещества в 500 мл горячей дистиллированной воды, добавляют 28,0 мл концентрированной соляной кислоты плотностью 1,19, охлаждают до 20 °С и доводят до 1 л дистиллированной водой. Для получения 3,53%-ного раствора молибденовокислого аммония 35,3 г соли растворяют в 700 мл дистиллированной воды, затем все количество переносят в мерную колбу на 1 л и дистиллированной водой доводят до метки. 2,5 моль/л раствор соляной кислоты готовят путем доведения 207,5 мл концентрированной соляной кислоты до 1 л дистиллированной водой. Реактив на фосфор хранят в склянке из темного стекла не более 2 мес;
основной стандартный раствор фосфора. 4,394 г однозамещен-ного фосфорнокислого калия (KH2PO4 х. ч., ч. д. а.), высушенного до постоянной массы в эксикаторе над концентрированной серной кислотой, растворяют віл дистиллированной воды. 1 мл раствора содержит 1 мг фосфора;
5 мг%-ный рабочий стандартный раствор фосфора. 5 мл основного стандартного раствора фосфора доводят в мерной колбе на 100 мл дистиллированной водой до метки.
Оборудование: фотоэлектроколориметр; колбы конические термостойкие на 1 л; колбы мерные на 50, 100, 500, 1000 мл; электроплитка; пипетки; пробирки; центрифуга.
Ход определения. В центрифужную пробирку вносят 2,5 мл дистиллированной воды, 0,5 мл сыворотки, 2 мл раствора трихлоруксусной кислоты, перемешивают и через 10 мин центрифугируют 15 мин при 3000 мин-1. С помощью шприца и пипетки, не затрагивая осадка, берут 2,5 мл центрифугата, добавляют 2,5 мл реактива на фосфор, перемешивают и через 10 мин колориметрируют на ФЭКе с синим светофильтром в кювете с толщиной слоя 1 см против дистиллированной воды. Параллельно готовят стандартную пробу: к 0,5 мл рабочего стандарта 5 мг%-ного раствора фосфора добавляют 2,5 мл дистиллированной воды и 2 мл раствора трихлоруксусной кислоты, смешивают. Затем берут 2,5 мл этого раствора, вносят в пробирку, добавляют 2,5 мл реактива на фосфор и через 10 мин колориметрируют в том же режиме, что и пробу сыворотки.
Расчет ведут по формуле
X = (А/Б) ¦ 5,
где х—количество фосфора, содержащегося в 100 мл сыворотки, мг; А — экстинкция испытуемого образца; Б — экстинкция стандартного раствора; 5 — коэффициент для перевода в мг%.
6*
83
Для выражения содержания фосфора в ммоль/л в качестве коэффициента берут 1,615 или величину в мг% умножают на 0,323 (приложение 4).
Примечание. Сыворотка должна быть отделена от эритроцитов не позже чем через 1 ч после взятия крови. Она должна быть свободна от гемолиза, липемии, жел-тушности. Допустимо хранение сыворотки или плазмы в течение 1 сут при комнатной температуре, 4 сут при — 4—8 °С. Клиническое значение. Фосфор — один из основных структурных элементов организма. Все виды обмена в организме неразрывно связаны с превращением фосфорной кислоты. Фосфор входит в структуру нуклеиновых кислот, благодаря фосфори-лированию осуществляется кишечная адсорбция, гликолиз, прямое окисление углеводов, транспорт липидов, обмен аминокислот и т. д. Макроэргические фосфорные соединения, среди которых центральное место занимает АТФ, — универсальные донаторы и аккумуляторы энергии. 80—85 % фосфора содержится в скелете. В крови он присутствует в неорганической и в органической формах. Органический фосфор связан с белками и липидами. Всего в крови животного и человека содержится около 10 фракций фосфорных соединений.
