Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
Снижение резервной щелочности крови свидетельствует о сдвиге кислотно-щелочного равновесия в сторону ацидоза, повышение — в сторону алкалоза.
Метаболический ацидоз отмечают при однотипном высоко-концентратном или силосо-жомовом кормлении, кетозе, вторичной остеодистрофии, ацидозе рубца, сахарном диабете, расстройствах желудочно-кишечного тракта, особенно при диарее молодняка, сердечной недостаточности, миоглобинурии, гипоксии, нефрите, почечной недостаточности, септических процессах и т. д. Респираторный ацидоз бывает вследствие замедления процесса отдачи углекислоты легкими. Такое явление наблюдается при расстройстве сердечной деятельности, отеке легких, тяжелой пневмонии, угнетении дыхательного центра, нахождении животных в среде с высокой концентрацией углекислоты в воздухе.
Состояние метаболического алкалоза у животных бывает при алкалозе рубца, введении в организм больших доз пищевой соды. Респираторный алкалоз наблюдается при усиленной гипервентиляции легких, вследствие выведения из организма большого количества углекислого газа, а также при содержании животных на большой высоте.
69
3.3.3. МЕТОДЫ ОЦЕНКИ состояния
ВОДНО-ЭЛЕКТРОЛИТНОГО И МИНЕРАЛЬНОГО ОБМЕНОВ
Состояние водно-электролитного обмена оценивают по содержанию в крови натрия, калия, кальция, фосфора, магния, хлора.
Определение калия и натрия в биологических жидкостях методом пламенной фотометрии. В современных биохимических лабораториях измерение концентрации натрия и калия в биологических жидкостях проводится одновременно пламенной фотометрией или ионометрией.
Пламенная фотометрия представляет собой один из видов эмиссионного спектрального анализа, основанного на фотометрирова-нии излучения элементов в пламени.
Принцип. Анализируемый раствор в виде аэрозоля вводят посредством специального распылителя, действующего под давлением сжатого воздуха, в пламя горелки, работающей на горячем газе (пропане, метане, бутане). В пламени молекулы распадаются на отдельные ионы, их электроны переходят из одного квантового состояния в другое, результатом чего является испускание кванта света. Натрий и калий способны интенсивно излучать свет в сравнительно низкотемпературном пламени, образованном сгоранием горючего газа в воздухе. Возникшее в пламени излучение определяемого элемента отделяется посредством светофильтров от излучения других элементов и, попадая на фотоэлемент, вызывает фотон, интенсивность которого измеряется гальванометром.
Натрий окрашивает пламя в ярко-желтый цвет, калий — в слабый красно-фиолетовый. Добавление к распыленным растворам органических красителей, являющихся поверхностно-активными веществами, увеличивает яркость свечения пламени.
Реактивы: основные калибровочные растворы для определения натрия, калия в плазме (сыворотка), спинномозговой жидкости, экссудатах, транссудатах, желудочном содержимом и эритроцитах. Готовят их из химически чистых солей: натрия хлорида, калия хлорида, кальция карбоната, дважды перекристаллизованных и высушенных до постоянной массы:
стандартный раствор натрия основной: 2,5418 г натрия хлорида, высушенного до постоянной массы при температуре 105 °С, растворяют віл бидистилированной воды. В 1 мл раствора содержится 1 мг натрия;
стандартный раствор калия основной: 1,9069 г калия хлорида, высушенного до постоянной массы при температуре 105 °С, растворяют в 1 л бидистиллированной воды. В 1 мл раствора содержится 1 мг калия;
2,4972 г кальция карбоната растворяют в 50 мл 1 н. (1 моль/л) раствора соляной кислоты в мерной колбе на 1 л и доводят бидистиллированной водой до метки.
Оборудование: пламенный фотометр отечественного или зарубежного производства; компрессор; колбы мерные; бюксы
70
диаметром 10—15 см; баллоны с пропаном, метаном или бутаном; флаконы пенициллиновые.
Подготовка материала к анализу. Плазму получают в течение 1 ч после отбора проб крови. В качестве антикоагулянта используют 1%-ный раствор гепарина из расчета 2 капли на 10 мл крови. Кровь центрифугируют в течение 15 мин при 3000 мин '.
Плазма крови не должна иметь даже следов гемолиза. Любой гемолиз исключает выполнение анализа. В герметически закрытой пробирке сыворотку или плазму можно хранить при температуре 20—25 °С и 4—8 °С в течение 1 нед, при минус 20 °С в течение 1 года (W. Guder и соавт., 1996).
Для определения калия берут 0,5 мл плазмы, вносят в пеницил-линовый флакончик, добавляют из бюретки 9,5 мл дистиллированной воды, закрывают резиновой пробкой и путем перевертывания тщательно перемешивают. Разведение соответствует 1 : 20.
Для определения натрия плазму крови разводят 1 : 100, для чего берут 1 мл разведенной 1 : 20 плазмы, вносят в другой флакончик и приливают 4 мл дистиллированной воды. Можно готовить разведение плазмы 1 : 150.
Эритроциты. Гепаринизированную кровь центрифугируют в течение 40—45 мин при 3000 мин . Затем плазму с верхним слоем эритроцитов отсасывают. Эритроциты набирают пипеткой из нижней части пробирки, разводят дистиллированной водой. Соотношение эритроцитов и воды подбирают в зависимости от предполагаемого содержания калия и натрия.
