Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
Оборудование: весы аналитические; весы технические; колбы вместимостью 100, 200, 1000 мл; колбы конические вместимостью 250 мл; бюретки на 25 мл; пипетки на 25 и 50 мл; стаканы мерные на 500 мл; стеклянные палочки с резиновым наконечником.
Ход определения. В химический стакан на 500 мл вносят 10 г содержимого желудочно-кишечного тракта или измельченной печени, заливают 100 мл дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Стакан оставляют на сутки при комнатной температуре при периодическом перемешивании содержимого. После этого содержимое фильтруют в колбу через бумажный фильтр. Для исследования отбирают 1/10 жидкости (фильтрата), что соответствует 1 г массы отобранного патологического материала. Фильтрат помещают в колбу для титрования. В колбу добавляют 5 мл 0,1 н. раствора серебра нитрата, 5—7 капель насыщенного раствора железоаммонийных квасцов и титруют 0,1 н. раствором аммония роданида до исчезновения слабо-коричневого окрашивания после сильного встряхивания окрашенного раствора.
Расчет количества натрия хлорида проводят по формуле
v= (А-Б)- 0,00585- 100 H '
где X — количество натрия хлорида, %; А — количество серебра нитрата, взятого на титрование, мл; Б— количество аммония роданида, израсходованного на титрование, мл; 0,00585 — постоянный коэффициент для пересчета на натрия хлорид; H —масса навески пробы материала, г; 100 — коэффициент пересчета в проценты.
Клиническое значение. Обнаружение в содержимом желудочно-кишечного тракта натрия хлорида выше 0,45 % и в печени выше 0,35 % служит основанием для постановки предварительного диагноза на отравление поваренной солью. Окончательный диагноз может быть поставлен по клиническим признакам интоксикации (цианоз слизистых оболочек и конъюнктивы глаза, учащенное мочеиспускание — солевой диурез, жажда, неудержимое стремление вперед, скрежетание зубами и иногда подгибание под себя тазовых конечностей) и патологоанатомической картине (катараль-но-геморрагическое воспаление слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, отек подкожных тканей в области живота, век и головы; у кур — фиолетово-синяя окраска гребешка).
418
8.8. КОЛОРИМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ НИТРАТОВ И НИТРИТОВ (ПО Е. С. КОВАЛЕВОЙ, 1985)
Метод одобрен отделением ветеринарии ВАСХНИЛ, 1985.
Принцип. Метод основан на измерении интенсивности окрашивания комплекса, образующегося при взаимодействии нитрита-иона с амидом сульфаниловой кислоты и 1^-(1-нафтил)-этилен-диаминдигидрохлоридом. Нитраты определяют путем их восстановления до нитритов с помощью губчатого кадмия, которые устанавливают проведением вышеназванной реакции с последующим пересчетом на нитрат. Предел обнаружения нитритов 0,2 мг/кг, нитратов — 0,4 мг/кг.
Реактивы: натрий азотнокислый;
калия нитрат;
цинк металлический гранулированный;
кадмия сульфат;
кислота хлористоводородная;
трилон Б;
аммиак водный;
калий железисто-синеродистый (желтая кровяная соль); цинка ацетат;
кислота уксусная, ледяная; натрия тетраборат (бура); активированный уголь марки БАУ-А, ОУА; алюминия сульфат;
амид сульфаниловой кислоты (стрептоцид белый);
N-( 1-нафтил)-этилендиаминдигидрохлорид;
0,1 н. раствор кислоты хлористоводородной;
раствор кадмия сульфата. 37 г кадмия сульфата растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе на 1000 мл и доводят объем в колбе до метки;
буфер аммонийный, pH 9,6—9,7. 20 мл концентрированной кислоты хлористоводородной растворяют в 500 мл дистиллированной воды, перемешивают, добавляют 10 г трилона Б и 55 мл концентрированного аммиака, доводят объем в колбе до метки дистиллированной водой, перемешивают и проверяют pH;
насыщенный раствор буры. 50 г натрия тетрабората помещают в мерную колбу на 1000 мл, добавляют при тщательном перемешивании 500 мл воды и после растворения доводят объем в колбе до метки;
реактив Кареза I. 106 г калия железисто-синеродистого растворяют в колбе на 1000 мл и доводят объем до метки. Хранят не более 1 мес;
реактив Кареза II. 220 г цинка ацетата и 30 мл ледяной уксусной кислоты растворяют дистиллированной водой в мерной
27*
419
колбе на 1000 мл, доводят объем колбы до метки. Хранят не более 1 мес;
растворы для проведения цветной реакции: а) реактив I. 2 г амида сульфаниловой кислоты растворяют в 400—500 мл водного раствора кислоты хлористоводородной, приготовленной в соотношении 1:1, а затем доводят объем этой кислотой до 1000 мл; б) реактив И. 0,25 г >1-(1-нафтил)-этилендиаминдигидрохлорида растворяют в 250 мл дистиллированной воды.
Приготовление губчатого кадмия. Гранулы цинка распределяют по дну кристаллизатора на расстоянии 3—4 мм друг от друга и заливают раствором кадмия сульфата. Через 3—4 ч осадок отделяют от цинка и помещают в стакан с водой, избегая его соприкосновения с воздухом. Затем его измельчают в гомогенизаторе в 0,1 н. растворе кислоты хлористоводородной, отмывая от пылевидных частиц, и хранят под слоем воды. Перед работой кадмий заливают на 1 сут 0,1 н. раствором кислоты хлористоводородной, промывают водой и заполняют им редукционную колонку, наполненную водой. Слой кадмия во время заполнения колонки периодически перемешивают стальной проволокой так, чтобы не оставалось пузырьков воздуха. Скорость потока жидкости через колонку не должна превышать 3 мл/мин.