Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
405
Клиническое значение. Предварительный лабораторный диагноз на отравление зоокумарином может быть поставлен при обнаружении в мышечной ткани остатков зооцида в количестве 5—10 мг/кг. Окончательный диагноз ставят по результатам сопоставления данных лабораторного исследования с клиническими признаками интоксикации (кровянистые истечения из носа и анального отверстия, образование подкожных гематом, понижение свертываемости крови), а также по характерным патологоанатомиче-ским изменениям (множественные кровоизлияния во внутренние органы, гематомы в подкожной клетчатке, карпальных и тарзаль-ных суставах).
Определение цинка фосфида в патологическом материале
(А. В. Николаев, 1968, А. Ф. Башмурин, 1968). Цинка фосфид (фосфористый цинк, Z113P2) — темно-серый порошок с запахом чеснока. Технический продукт содержит 14—18 % фосфора, 70—80 цинка и до 6 % нерастворимого осадка. Относится к I классу токсичности с ДД50 для серых крыс 15—30 мг/кг, для кроликов 20—25, для кур 28—30, для крупного рогатого скота, овец, коз, свиней 55—60 мг/кг. В прошлые годы широко применяли для борьбы с мышевидными грызунами на животноводческих фермах, складах, а также для уничтожения полевых грызунов и сусликов на посевах различных сельскохозяйственных культур, лугах, пастбищах. В настоящее время его применение в растениеводстве не разрешено, однако он зарегистрирован для борьбы с мышевидными грызунами в населенных пунктах. Применяется в виде отравленных приманок, содержащих 5 % цинка фосфида. Отмечены случаи отравлений сельскохозяйственных, диких промысловых животных, в том числе птиц, в результате поедания отравленных приманок.
Принцип. Метод основан на определении в содержимом желудочно-кишечного тракта животных фосфористого водорода, выделяющегося из цинка фосфида в кислой среде по реакции с серебра нитратом или ртути бромидом, а также аммония молибдатом.
Реактивы: 10%-ный водный раствор кислоты винной;
5%-ный водный раствор серебра нитрата;
2 н. раствор хлористоводородной кислоты;
бензол (х. ч.);
олова дихлорид;
аммония молибдат (х. ч.);
натрия сульфат безводный;
2,4-дихлорфенол.
Оборудование: прибор Зангера — Блека; прибор для отгонки растворителей; ФЭК; делительные воронки на 250 мл; колбы различной вместимости; баня водяная.
Ход определения. Отравленные приманки, корма, подозреваемые в загрязнении цинка фосфидом, тщательно измельчают, отбирают пробу массой 200 г, смешивают с дистиллированной водой до консистенции густой кашицы. Содержимое желудочно-кишеч-
406
ного тракта берут в том же количестве без добавления воды. Пробы помещают в круглодонные колбы на 500—1000 мл. Колбу подсоединяют к аппарату для дистилляции, предварительно подкисляя пробу 15—20 мл 10%-ного раствора кислоты винной. Перегонку производят так же, как и при анализе синильной кислоты. Собирают 50 мл дистиллята.
При анализе фосфинов с помощью прибора Зангера — Блека дистиллят в полном объеме заливают в приемную колбу прибора. Туда же помещают три гранулы цинка без мышьяка. В прибор вкладывают реактивную бумагу, пропитанную 5%-ным водным раствором серебра нитрата. Затем в колбу вносят 10 мл концентрированной серной кислоты. Прибор ставят на 1 ч. После того как таблетки цинка перейдут полностью в растворимую соль, извлекают реактивную бумагу. При наличии фосфина в количестве 0,2 мкг бумага приобретает коричневую окраску, при 0,5 — темно-коричневую, при 1,0 — черную, при 2 мкг — черную с металлическим блеском.
При использовании колориметрического метода 10 мл дистиллята помешают в делительную воронку, подкисляют 2 н. раствором кислоты хлористоводородной до pH 3—4, вносят в воронку 40 мл бензола и проводят экстракцию путем встряхивания воронки в течение 20—30 мин. Бензольный слой отделяют, промывают несколько раз дистиллированной водой до тех пор, пока промывные воды не будут содержать фосфат-ионы (PO4). Для их определения в 50 мл промывной воды добавляют 2 мл молибденового реактива и 2 капли раствора олова дихлорида. Если интенсивность окрашивания не отличается от холостой пробы, промывание заканчивают. 10 мл бензольного раствора помещают в мерную колбу на 50 мл, добавляют в нее 10 мл окислительной смеси, закрывают колбу пробкой и встряхивают в течение 10 мин. Затем ставят ее в водяную баню и отгоняют бензол. Избыток калия перманганата и выпавший в осадок марганца диоксид восстанавливают добавлением по каплям раствора натрия сульфата безводного или гидроксила-мина хлорида. Раствор кипятят на плитке в течение 2—3 мин, затем охлаждают, добавляют 3 капли индикатора (2,4-динитрофе-нол) и по каплям аммиак, разведенный 1:10, до желтого окрашивания. Объем раствора доводят до 45 мл дистиллированной водой, прибавляют 2 мл молибденового реактива. Раствору дают постоять 10 мин, измеряют оптическую плотность раствора по отношению к холостой пробе, содержащей все реактивы и проведенной через все этапы анализа.
Оптическую плотность раствора измеряют на ФЭК-56 с красным светофильтром. При низком содержании фосфина используют кюветы длиной 50 мм, при повышенном —20 мм. Количество фосфина в аликвотной части определяют по калибровочной кривой, которую строят на стандартных растворах желтого фосфора, растворенного в бензоле.
