Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
За окончательный результат принимают среднее арифметическое двух определений.
Допустимые расхождения при параллельных определениях не должны превышать ±0,05%.
7.2.6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ КАЛЬЦИЯ (ГОСТ 17258-71)
Принцип. Метод основан на осаждении кальция раствором аммония оксалата. Выделенный и отмытый осадок кальция оксалата растворяют в серной кислоте. Освободившуюся при этом щавелевую кислоту титруют раствором калия перманганата.
Реактивы: концентрированная кислота хлористоводородная по ГОСТ 3118-77;
2 н. раствор кислоты хлористоводородной по ГОСТ 3118—77;
10%-ный раствор аммиака водного по ГОСТ 3760—64;
1%-ный раствор аммиака водного по ГОСТ 3760—64;
1 н. раствор кислоты серной по ГОСТ 4204—77;
кислота серная по ГОСТ 4204—77, разведенная дистиллированной водой в соотношении 1:8;
10%-ный раствор кислоты уксусной по ГОСТ 61—75;
10%-ный раствор кальция хлорида;
насыщенный раствор аммония оксалата по ГОСТ 5712—78; индикатор — метиловый красный по ГОСТ 5853—51; 0,1 н. раствор калия перманганата по ГОСТ 20490—75 (х. ч.): 3,165 г KMnO4 в 1000 см3 дистиллированной воды; кислота щавелевая по ГОСТ 2218—76 (х. ч.);
370
вода дистиллированная по ГОСТ 6702—72.
Оборудование: муфельная печь; водяная баня; центрифуга с частотой вращения 3000 мин 1J тигли по ГОСТ 9147—73; колбы мерные по ГОСТ 1770 вместимостью 100 и 1000 мл; воронки диаметром 5—7 см по ГОСТ 8613—75; пробирки центрифужные по ГОСТ 10515—75 вместимостью 1,0 и 25 мл; эксикатор по ГОСТ 6371—73; палочки стеклянные; бумага универсальная индикаторная; фильтры обеззоленные диаметром 5—7 см.
Ход определения. Навеску рыбной или мясокостной муки массой 1,0—1,5 г или 3,0—4,0 г сырья, или другого корма отвешивают с точностью до 0,0001 г в предварительно прокаленный до постоянной массы фарфоровый тигель и сжигают до полного озоления. Сначала сжигают в муфельной печи при 200—300 °С, так как проба при нагревании при более высокой температуре может вспучиться. Окончательное озоление проводят в муфельной печи при температуре выше 550 °С (темно-красное каление). По окончании озоления тигель помещают в эксикатор и взвешивают. Прокаливание повторяют до получения постоянной массы.
В охлажденный тигель с навеской золы вносят 5 см3 2 н. раствора кислоты хлористоводородной и помещают в кипящую водяную баню. Содержимое тигля тщательно перемешивают стеклянной палочкой, нерастворившимся частицам дают осесть на дно. Раствор осторожно по палочке сливают через маленький гладкий фильтр в мерную колбу на 100 мл. Обработку осадка в тигле повторяют 5 см кислоты хлористоводородной еще раз. Тигель и воронку с фильтром 2—3 раза промывают горячей водой, подкисленной кислотой хлористоводородной (3 см3 концентрированной кислоты на 1 л воды). Вытяжку в колбе охлаждают до комнатной температуры и доводят до метки дистиллированной водой. Указанные операции проводят в вытяжном шкафу.
5 см3 вытяжки помещают в центрифужную пробирку и, добавляя в пробирку 8—10 капель 10%-ного раствора аммиака (по каплям), нейтрализуют кислоту хлористоводородную. Ориентироваться следует по изменению окраски прибавляемого в раствор индикатора метилового красного или универсальной индикаторной бумаги. Перемешивают содержимое до выпадения осадка, вращая пробирку между ладонями. Осадок полностью растворяют 10%-ным раствором уксусной кислоты (около 1 см3), прибавляя его по каплям. Полученный прозрачный раствор обрабатывают по каплям 1 см насыщенного раствора аммония оксалата. Содержимое пробирки тщательно перемешивают и оставляют стоять не менее 2 ч для полного осаждения кальция оксалата. После чего центрифугируют (3000 мин ) в течение 15 мин. Жидкость над осадком сливают, не взмутив осадка. К осадку приливают 1,5—2,0 см3 1%-ного раствора аммиака и после перемешивания снова центрифугируют в течение 10 мин. Прозрачную жидкость над осадком сливают. Оса-
24*
371
док кальция оксалата промывают 5 см3 1%-ного раствора аммиака, содержимое пробирки центрифугируют, жидкость над осадком сливают.
Промывку повторяют трехкратно, после чего проверяют полноту удаления аммония оксалата путем добавления нескольких капель 10%-ного раствора кальция хлорида к последней пробе промывной жидкости. В случае появления мути промывку осадка продолжают.
К промытому осадку добавляют 5 см3 1 н. раствора серной кислоты и содержимое пробирки хорошо перемешивают стеклянной палочкой. Не вынимая палочки, пробирку помещают в кипящую водяную баню для растворения осадка. Полученный прозрачный раствор в горячем состоянии титруют 0,1 н. раствором калия пер-манганата до слабого розового окрашивания, не исчезающего в течение 1 мин.
Поправку к титру 0,1 н. раствора калия перманганата устанавливают следующим образом. Навеску щавелевой кислоты (6,3025 г), взятую с точностью до 0,0001 г, растворяют віл дистиллированной воды. К 20 мл приготовленного 0,1 н. раствора приливают 3 см3 серной кислоты, разведенной дистиллированной водой (1 : 8), нагревают на водяной бане до 90 °С и медленно титруют раствором калия перманганата до появления розового окрашивания.
