Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
В кислую сторону pH содержимого рубца (4,0—5,6) смещается при внезапном или чрезмерном поступлении в рубец с кормами легкоусвояемых углеводов (сахарная свекла, кукуруза молоч-но-восковой спелости, патока, яблоки, зерновые концентраты). В рубце интенсивно развивается молочнокислое брожение, что приводит к обильному образованию молочной кислоты, которая вызывает сдвиг pH в кислую сторону.
При повышенной кислотности отмечают признаки острого расстройства пищеварения, животные теряют аппетит, наступает атония или тимпания рубца, акт дефекации учащается, количество инфузорий уменьшается. У некоторых животных отмечают тремор мышц, брадикардию.
312
Под влиянием молочнокислых бактерий разрушаются некоторые аминокислоты, образуются вредные протеиногенные амины (гистамин, тирамин, кадаверин), которые всасываются в кровь и способствуют развитию ламинита и гипотонии преджелудков.
Смещение pH содержимого рубца в щелочную сторону (больше 7,2) называется алкалозом. Наблюдается при поедании большого количества травы бобовых растений и других высокобелковых кормов или небелковых азотистых продуктов. Щелочная реакция среды сопровождается гипотонией рубца, угнетением функции инфузорий, симбионтных бактерий и даже их гибелью, нарушением бродильных процессов в преджелудках. Интенсивно развиваются гнилостные микроорганизмы, которые используют белок и аминокислоты с образованием токсических соединений (фенол, крезол, индол, скатол и др.). Болезнь проявляется при повышении концентрации аммиака в содержимом рубца до 25 мг/100 мл и больше (в норме 6,5—20). Микрофлора не успевает использовать аммиак для синтеза микробного белка, а печень — превращать его в мочевину, поэтому аммиак всасывается в кровь и ликвор, вызывая интоксикацию.
6.3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО КОЛИЧЕСТВА ЛЕТУЧИХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ (ЛЖК)
Принцип. Под воздействием пара происходит отгонка летучих жирных кислот рубцового содержимого с последующим определением их количества путем титрования раствором щелочи.
Реактивы: смесь насыщенного раствора магния сульфата в 2,5%-ном растворе H2SO4. 25 мл концентрированной серной кислоты на 1 л насыщенного раствора магния сульфата;
0,1 н. раствор NaOH;
фенолфталеин (индикатор).
Оборудование: аппарат Маркгама; электроплита (нагреватель); штатив для титрования; лабораторная посуда.
Ход определения. Из общей пробы профильтрованного содержимого рубца отбирают в стаканчик 5 мл жидкости и добавляют 5 мл раствора магния сульфата. После этого 4 мл полученной смеси (эквивалент 2 мл жидкости рубца) переносят в аппарат Маркгама для отгонки (рис. 8). Пробу осторожно выливают во
Рис. 8. Схема определения летучих жирных кислот в аппарате Маркгама:
1 — колба на нагревателе; 2 — внутренняя воронка; 3 — внешняя воронка; 4 — холодильник; 5 — стаканчик для сбора конденсата ЛЖК
313
внутреннюю трубку прибора через воронку. При этом водяной пар из парообразователя проходит между внутренней и внешней трубками аппарата, нагревает внутреннюю трубку, а затем через отверстие поступает во внутреннюю камеру. Под действием пара происходит отгонка ЛЖК, которые вместе с водяным паром попадают в холодильник, где они конденсируются. Отбирают в стаканчик 50 мл жидкости и титруют 0,1 н. раствором щелочи в присутствии индикатора фенолфталеина до появления слабо-розового цвета. Отмечают количество щелочи, пошедшее на титрование.
С целью контроля полного удаления ЛЖК из пробы рубцового содержимого необходимо продолжить дистилляцию и протитро-вать вторую порцию дистиллята (50 мл). В случае отсутствия ЛЖК во второй пробе жидкость в стаканчике после добавления нескольких капель щелочи сразу же становится розового цвета.
Отработанная проба из внутренней камеры после охлаждения парообразователя собирается в нижней части вместе с конденсатом водяного пара, откуда ее удаляют.
Расчет общего количества ЛЖК ведут по формуле
X = А• 0,1 • 1000/5, или X = А-50,
где X — количество ЛЖК в 100 мл рубцовой жидкости, ммоль/л; А — количество 0,1 н. раствора NaOH, пошедшего на титрование, мл; 0,1 — показатель нормальности раствора; 1000 — пересчет концентрации ЛЖК на 1 л рубцовой жидкости; Б — количество рубцовой жидкости, взятой для анализа (в данном случае 2 мл); 50 — стабильная величина.
В содержимом рубца коров общее количество ЛЖК в норме составляет 80—150 ммоль/л (в среднем 120 ммоль/л).
Клиническое значение. Общее количество ЛЖК в содержимом рубца жвачных животных зависит от состава рациона, вида и химического состава корма, технологии его приготовления, концентрации клетчатки (оптимальная 18—20 %) и крахмала (оптимальная 11—14 %) в сухом веществе рациона.
Уменьшается синтез ЛЖК при некоторых болезнях, например, при смещении сычуга у коров их количество составляет 60—70 ммоль/л (А. В. Чуб, 2002).
Источники: 29, 40.
6.4. ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЛЕТУЧИХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ
Принцип. Под действием высокой температуры (210 °С) кислоты начинают выпариваться. Проходя через колонку, заполненную хромосорбом-101, они полностью отделяются одна от другой. Попадая в детектор, сгорают в пламени чистого водорода, образуя при этом определенный электрический потенциал, который регистрируется самописцем в виде пиков. Чем больше кислоты содержится в исследуемой пробе, тем выше будет высота пика.