Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
На фиксированный препарат кладут полоску фильтровальной бумаги и смачивают ее раствором генцианового фиолетового. Красят 1,5—2 мин. Бумагу сбрасывают и заливают раствором Люголя на 2 мин, препарат прополаскивают в спирту до серого цвета. Промывают водой и окрашивают 10%-ным раствором карболового фуксина 10—15 с. После этого препарат опять промывают водой, высушивают и исследуют под микроскопом.
При окрашивании раздавленной друзы актиномицетов мицелий приобретает фиолетовую, а колбочки розовую окраску. Акти-номицеты обнаруживают в мокроте при актиномикозе легких.
Бактериоскопия окрашенных препаратов. Для бактериоскопи-ческого исследования мазки готовят, растирая комочек мокроты между двумя предметными стеклами. Высушенный мазок фиксируют, медленно проводя его 3 раза через слабое пламя газовой горелки, и окрашивают чаще по Граму. В окрашенных по Граму препаратах обнаруживают грамположительные пневмококки, стрептококки, грамотрицательные диплобациллы, Е. coli и др. Грамполо-жительная и грамотрицательная микрофлора — постоянный обитатель респираторных органов, она становится патогенной при определенных условиях. При воспалительных процессах в бронхах и легких ее количество резко возрастает. Специальными бактериологическими методами определяют вирулентность микрофлоры мокроты, ее устойчивость к антимикробным препаратам.
Источники: 28, 31.
4.5. ИССЛЕДОВАНИЕ ЛИКВОРА
Ликвор (спинномозговая жидкость) секретируется сосудистыми сплетениями центральной нервной системы и циркулирует в специальных резервуарах или цистернах в области основания мозга, омывая извилины головного мозга, выпуклую поверхность мозга, центральный канал и подпаутиновое пространство спинного мозга. Образование ликвора происходит в боковых желудочках мозга,
283
а также в субарахноидальных пространствах. Вода и электролиты быстро проникают в цереброспинальную жидкость и также быстро уходят из нее. Ликвор выполняет функцию «подушки» для мозга, предотвращая или уменьшая его смещение. Метаболическая роль его не выяснена. Поэтому исследование ликвора проводят в основном в целях диагностики воспалительных заболеваний ЦНС.
Получают ликвор люмбальной, субокципитальной и постокци-питальной пункциями, которые проводят специальными иглами с мандреном. Для лабораторных исследований берут 5—15 мл лик-вора; для подсчета клеток достаточно 0,5 мл. В ликвор, содержащий фибриноген, что бывает при менингите, добавляют антикоагулянт (ЭДТА). Операцию по получению ликвора проводят под наркозом с соблюдением правил асептики и антисептики.
Люмбальную пункцию проводят в месте между последним поясничным позвонком и передним краем крестцовой кости; у собак — между 5-м и 6-м или 6-м и 7-м позвонками.
Субокципитальную пункцию делают в месте крыловидного отверстия (в затылочной ямке) — между затылочной костью и атлантом (первый шейный позвонок).
Постокципитальную (цервикальную) пункцию делают между атлантом и вторым шейным позвонком (эпистрофеем); у собак — между наружным затылочным выступом и краниовентральной частью остистого отростка эпистрофея.
Физические свойства. Ликвор представляет собой прозрачную жидкость, похожую на воду. Относительная плотность его у здоровых животных 1,004—1,008 кг/л, она повышается при менингите, менингоэнцефалите, энцефаломиелите, злокачественной катаральной горячке, уремии и диабете.
Ц в е т. У здоровых животных ликвор бесцветный, при пункции первые порции могут содержать кровь и быть окрашены в красный цвет. Ярко-красный цвет ликвора обусловлен наличием в нем крови (эритрохромия) при кровоизлиянии вследствие травмы позвоночника или черепа. Желтый (ксантохромия) и буровато-коричневый цвет придают ликвору продукты распада гемоглобина. Это бывает при застое крови в сосудах мозга, что приводит к поступлению плазмы в ликвор (застойная ксантохромия) или попадания в ликворное пространство крови. Эритрохромия и ксантохромия бывают при травмах, гиперемии и отеке мозга, солнечном ударе, гипертермии, пироплазмозе, нутталиозе, желтухе. Зеленоватую окраску ликвору может придавать биливирдин — продукт распада билирубина.
Прозрачность. В норме спинномозговая жидкость прозрачная. Помутнение ликвора происходит при наличии в нем гноя, большого количества белка, лейкоцитов, микроорганизмов, фибриногена (воспаление головного и спинного мозга и их оболочек).
284
Биохимические и морфологические исследования. В ликворе можно определить содержание общего белка, глобулинов, глюкозы, электролитов, клеток крови и других показателей.
Определение белка. В качестве унифицированного используют метод с кислотой сульфосалициловой и натрия сульфатом.
Принцип. Кислота сульфосалициловая вызывает коагуляцию белков и помутнение ликвора, степень которого пропорциональна содержанию белков.
Реактивы: 6%-ный раствор кислоты сульфосалициловой; 14%-ный раствор безводного натрия сульфата. Для анализа применяют свежеприготовленный рабочий раствор: смесь равных объемов приведенных выше реактивов;
1%-ный стандартный раствор альбумина. 1 г лиофилизирован-ного альбумина (из человеческой или бычьей сыворотки) растворяют в небольшом количестве 0,9%-ного раствора натрия хлорида в мерной колбе на 100 мл и доводят объем этим же раствором до метки. Реактив нестойкий, для стабилизации к нему добавляют 1 мл 5%-ного раствора натрия азида (NaNO3). 1 мл раствора содержит 10 мг альбумина. В холодильнике можно хранить до 2 мес.
