Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
Неполноценное молозиво содержит значительно меньше Ig, чем полноценное. По нашим данным, в зимне-весенний период в молозиве первого удоя коров, содержавшихся в сухостойный период на неполноценных рационах, уровень Ig составляет 10—15 г/л.
Методы определения соматических клеток в молоке. Для определения содержания соматических клеток в молоке применяют вискозиметр ВМЛК, анализатор молока «Сома-тос», электронный анализатор качества молока «КЛЕВЕР-1М», прибор ИСКМ-1, «Фоссоматик» и др., проводят подсчет клеток в камере с сеткой Горяева или определяют их примерное количество визуальным способом.
Определение соматических клеток в молоке с применением вискозиметра ВМЛК. Принцип. Метод основан на определении скорости вытекания смеси молока с раствором реактива «Мастоприм» через капилляр прибора, зависящей от содержания соматических клеток в молоке: чем их больше, тем медленнее вытекает жидкость.
Реактив: раствор «Мастоприм». 3,5 г препарата вносят в мерную колбу или в мерный цилиндр на 100 мл и доливают дистилли-
256
рованной водой, подогретой до 30—35 °С до метки. Перед применением раствор взбалтывают. Годен в течение 1 сут.
Оборудование: вискозиметр ВМЛК; пипетки на 5 и 10 мл; колбы или цилиндры на 100 мл; весы лабораторные рычажные не менее 3-го класса точности, наибольший предел взвешивания 100 г, поверочная цена деления 0,001 г; термометры технические прямые № 4; стаканы химические на 50 и 500 мл.
Ход определения. Температура в лаборатории должна быть 10—30 °С, кислотность исследуемого молока 16—21 "Т. В сосуд вискозиметра вносят 5 мл водного раствора препарата «Мастоприм» массовой концентрации 35 г/л и 10 мл исследуемого молока, тщательно профильтрованного через четыре слоя марли. Нажимают кнопку «Пуск» и перемешивают смесь в течение 30 с. По окончании перемешивания через капилляр вытекает смесь с раствором «Мастоприм». Время вытекания определяют таймером. После анализа смеси сосуд прибора 2—3 раза промывают дистиллированной водой и 4—5 раз продувают с помощью резиновой груши. После очистки сосуда прибор считается подготовленным для исследования последующей пробы молока.
Количество соматических клеток в пробе молока устанавливают по времени вытекания смеси в соответствии с условиями, описанными в таблице 42.
42. Зависимость количества соматических клеток от скорости вытекания смеси молока с реактивом «Мастоприм»
Время вытекания смеси, с
Количество соматических клеток, тыс/мл
Время вытекания смеси, с
Количество соматических клеток, тыс/мл
12,0-18,0 18,1-25,0 25,1-31,0
До 300 301-500 501-750
31,1-37,0 37,1-46,0 46,1-58,0
751-1000 1001-1250 1251-1500
За окончательный результат анализа принимают среднее арифметическое двух параллельных определений. При этом разность времени вытекания смеси молока и водного раствора препарата «Мастоприм» через капилляр двух параллельных образцов молока не должна превышать 1—6 с.
Анализатор молока вискозиметрический «Соматос» фирмы ООО «Био Тест» (Украина, г. Донецк) предназначен для определения количества соматических клеток в молоке по условной вязкости, измеряемой по времени вытекания контролируемой пробы через капилляр. Принцип работы этого прибора такой же, как и вискозиметра ВМЛК.
Диапазон определения количества соматических клеток в 1 см3 молока на приборе «Соматос» 90—1500 тыс.; относительная пог-
17 — 4196
257
решность измерения условной вязкости не более 5 %; продолжительность одного анализа не более 4 мин.
Анализатор молока вискозиметрический «Соматос» Научно-производственного объединения «Петролазер» (Россия, Санкт-Петербург) по работе и техническим характеристикам не отличается от описанного выше анализатора.
Источник: 71.
Помимо определения общего количества соматических клеток молока (секрета в сухостойный период) возможна их дифференциация. С этой целью предложен способ приготовления и окраски препаратов из молока и секрета молочных желез для микроскопи-рования клеток, обеспечивающий окрашивание и сохранение структуры клеточных элементов (К. Н. Кондрахина, Г. А. Симо-нян. Авторское свидетельство № 400314). К 15—18 мл свежевыдо-енного молока (секрета) добавляют одну каплю 40%-ного раствора формальдегида и тщательно перемешивают. Затем отбирают 5 мл молока, вносят в центрифужную пробирку, центрифугируют 10 мин при 3000 мин . С поверхности снимают слой жира, выливают над-осадочную жидкость, к осадку добавляют 0,5—1,0 мл сыворотки крови крупного рогатого скота и встряхивают до полного взмучивания осадка. После этого доливают сыворотку до объемаЗ—4 мл и снова центрифугируют в течение 7—8 мин при 3000 мин Над-осадочную жидкость сливают, оставшийся осадок тщательно перемешивают путем встряхивания до полного взмучивания. Пипеткой от гемометра Сали набирают полученную взвесь отмытых клеток, наносят каплю ее на чистое обезжиренное предметное стекло и делают мазок. Высушенный мазок фиксируют метанолом в течение 5 мин и окрашивают краской Романовского, которую готовят перед употреблением на водопроводной воде с pH, близкой к нейтральной (1 капля краски на 1 мл воды). Дифференцируют клетки под микроскопом с окуляром 7 или 10 и объективом 90.
