Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
Клиническое значение. Титруемая кислотность молока (молозива) обусловлена кислотным характером казеина, наличием в нем фосфорнокислых, лимоннокислых солей и растворенного углекислого газа.
У коров, содержащихся на полноценных рационах, кислотность молозива 1-го удоя равна 45—55 Т, 1-го дня — 39 °Т, 2-го дня — 33 Т; 3-го дня — 27,3 °Т; 6-го дня — 20,3 °Т; 7-го дня — 19,5 Т. Низкая кислотность молозива свидетельствует о неполноценном кормлении животных, скармливание такого молозива способствует развитию диспепсии новорожденных телят.
Кислотность свежего молока коровы 16—19 °Т, козы 17 °Т, овцы 23 Т, буйволицы 18,7 Т, зебу 19,5 Т, верблюдицы 17,2 Т, кобылицы 6—6,5 Т, ослицы 6 Т. Этот показатель в основном характеризует свежесть молока, однако при ацидотическом состоянии у животных кислотность молока может повышаться. Титруемая кислотность молока в начале лактации может составлять 20 °Т, постепенно снижаясь в последнем месяце до 12—14 T и ниже.
Определение иммунных глобулинов (Ig) в молозиве (молоке) с натрия сульфитом. Принцип. При воздействии на обезжиренное молозиво (молоко) раствора натрия сульфита изменяется структура белковых молекул и раствор мутнеет, его интенсивность пропорциональна концентрации Ig.
254
Реактивы: 18%-ный раствор натрия сульфита (ч. д. а). 18 г вещества растворяют в 82 мл дистиллированной воды;
10%-ный раствор уксусной кислоты. 10 г ледяной уксусной кислоты (СН3СООН) растворяют в 90 мл дистиллированной воды.
Оборудование: фотометры КФК-2, КФК-3, ФЭК и др.; мерные колбы; пипетки.
Ход определения. Молозиво (молоко) обезжиривают, отбирают, не затрагивая жира, примерно 2 мл обезжиренного молозива или 7 мл обезжиренного молока. Пробу молозива разбавляют дистиллированной водой в 2—4 раза. В обезжиренном разбавленном молозиве или неразбавленном обезжиренном молоке осаждают казеин и для получения прозрачного слоя центрифугируют или фильтруют через бумажный фильтр.
Для получения прозрачного центрифугата в две центрифужные пробирки вносят по 5 мл обезжиренного, разбавленного молозива или по 3,5 мл обезжиренного молока, по каплям добавляют 10%-ный раствор уксусной кислоты до осаждения казеина, размешивают и через 5—10 мин центрифугируют 10—15 мин при 3000 мин-1. Прозрачный фильтрат получают путем фильтрования через бумажный фильтр пробы молозива (молока) после осаждения казеина. В две параллельные пробирки вносят по 3,8 мл 18%-ного раствора натрия сульфита и по 0,1 мл прозрачного фильтрата или центрифугата, смешивают и фотометрируют на ФЭКе, КФК-2 при длине волны 440 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм против раствора натрия сульфита (контроль). Содержание Ig находят по калибровочному графику, построенному по определению Ig в стандартной сыворотке с известной их концентрацией, или пользуясь таблицей М. А. Костыны (1983) (табл. 41).
41. Содержание иммунных глобулинов в зависимости от оптической плотности
Оптическая плотность
Содержание Ig1 мг/мл
Оптическая плотность
Содержание Ig, мг/мл
Оптическая плотность
Содержание lg, мг/мл
0,1
2,28
0,185
4,61
0,80
17,8
0,11
2,60
0,19
4,72
0,85
19,0
0,12
2,92
0,195
4,83
0,90
20,2
0,125
3,03
0,20
4,94
0,95
21,2
0,13
' 3,14
0,25
5,80
1,00
22,3
0,135
3,37
0,30
6,80
1,05
23,4
0,14
3,60
0,35
8,00
1,10
24,6
0,145
3,70
0,40
9,00
1,15
25,6
0,15
3,80
0,45
10,00
1,20
26,8
0,155
3,93
0,50
11,40
1,25
28,0
0,16
4,06
0,55
12,40
1,30
29,0
0,165
4,17
0,60
13,60
1,35
30,1
0,17
4,28
0,65
14,60
1,40
31,2
0,175
4,39
0,70
15,80
1,45
32,3
0,18
4,50
0,75
16,80
1,50
33,4
255
Примечание. Изложенной выше методикой можно определять содержание Ig в сыворотке крови животных. В две (параллельные) пробирки вносят по 3,8 мл 18%-ного раствора уксусной кислоты и по 0,1 мл сыворотки, смешивают и колориметрируют при длине волны 400 ± 5 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм против 18%-ного раствора уксусной кислоты.
Источник: 20.
Кл иническое значение. Содержание Ig в молозиве и молоке зависит от условий кормления и содержания животных, кроме того, от времени удоя после отела (опороса). Кормление беременных животных по рационам с дефицитом протеина, незаменимых аминокислот и других элементов питания, витаминов и микроэлементов, использование недоброкачественных кормов, несоблюдение оптимальной структуры потребления кормов ведет к снижению иммунных белков в молозиве и молоке. В практике наибольшее клиническое значение имеет определение Ig в молозиве, так как от их содержания зависит здоровье новорожденного молодняка.
Потребление молозива с низким уровнем Ig сопровождается слабым насыщением ими организма новорожденных, развитием иммунного дефицита, появлением массовых желудочно-кишечных, легочных заболеваний, в том числе и инфекционной природы.
В полноценном молозиве коров первого удоя содержание Ig составляет 50—100 г/л, в том числе IgG более 85 г/л, во втором удое — 28—56 г/л, или на 45 % меньше, чем в первом, в третьем удое на 75 % ниже, чем в первом, или около 13—25 г/л (L. Slanina, 1991). К седьмому дню после отела молозиво по составу Ig (5—7 г/л) приближается к молоку. В молозиве свиноматок Ig содержится 55—71 г/л (А. Хохлов, 1997).
