Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Кометиани З.П. -> "Биохимия мембран. Кинетика мембранных транспортных ферментов. Том 5" -> 28

Биохимия мембран. Кинетика мембранных транспортных ферментов. Том 5 - Кометиани З.П.

Кометиани З.П. Биохимия мембран. Кинетика мембранных транспортных ферментов. Том 5 — М.: Высшая школа, 1988. — 111 c.
ISBN 5-06001355-3
Скачать (прямая ссылка): kinetikamembranihtransportnih1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 39 >> Следующая

которая согласно экспериментальным данным при больших значениях аргумента
должна иметь вид монотонно возрастающей, выпуклой кривой при любых
значениях к (см. рис. 21). Для проверки необходимо исследовать предельные
значения производных (f-"-oo) и возможность существования асимптоты.
Оказалось, что при любых значениях к можно иметь точное согласование форм
расчетных и экспериментальных кривых, если при kpo=?0 выполняется
неравенство: k°pslK0s<.^k4/Ks-
3. При фиксировании концентрации субстрата (5=const) зависимость U=f(t,
А, М) превращается в дробно-рациональную функцию следующего вида:
Р-2^~2 + Р-1^-1 + pfAl + Pf/M2 + P§Af3 + pfAI4 5 _ a^M-1 + a* +
af/W + a|Af2 + afAfs
Первая производная этой функции имеет пределы: dCfs Ks
О d(1/Af) k4(\ +q)KAS
" d US """K'V'W +
lim -------=----------------z-;-;------:---- .
Ж- dAl Sk4 (kpsS/Ks + kpM)
Сравнивая эту зависимость с экспериментальными кривыми (см. рис. 19),
легко убедиться в согласованности форм кривых.
4-541 81
При этом необходимым условием являются неравенства: kpA?=0 и kpM=0. При
kPo=0 форма расчетной зависимости Us=f(M) не изменяется. Заметим, что при
увеличении S наклоны lim U'm
и lim U'A уменьшаются. Это также совпадает с экспериментом (см.
м~ о рис. 19).
Рассмотрим область средних и больших концентраций субстрата {S^l мМ).
Здесь наблюдается разнообразие форм экспериментальных кривых, однако
четко прослеживается определенная закономерность: при изменении
соотношения М/А от нуля до бесконечности форма экспериментальных кривых
при любых способах фиксирования меняется от монотонно убывающих, вогнутых
кривых до монотонно возрастающих, выпуклых кривых (см. рис. 15, 18, 21).
Соответственно кривые е одной точкой экстремума переходят в кривые без
точек экстремума. При наличии точки экстремума кривая может иметь один
четко выраженный перегиб. В остальных случаях ввиду малой кривизны
идентификация перегибов является недостоверной, хотя нельзя исключить
наличия четного числа перегибов (см. рис. 21). Теоретически можно
оценить, насколько расчетные зависимости соответствуют форме
экспериментальных кривых.
4. В области малых значений аргумента (при достаточно больших
значениях фиксированного А) второй лиганд (М) изменяется в диапазоне
настолько малых значений (см. рис. 20), что можно считать условия
эксперимента аналогичными ситуации фиксирования больших величин Я= 100.
Аналогично этому при малых значениях аргумента в больших значениях
фиксированного М мы приближаемся к экспериментальным условиям
фиксирования малых значений Я=0,01. Следовательно, в области малых
значений аргумента для согласования формы расчетной зависимости U=f(t, А,
М) с экспериментальными кривыми, достаточно исследовать форму зависимости
Я) при разных Я, т. е. достаточно показать, что пределы первой
производной функции Ub\\m(6Ub/6t) имеют противоположный знак
t-*o
при Я-*"0 и Я-*-оо.
Действительно, как показало исследование формы зависимости UK=f(t),
пределы удовлетворяют этому условию.
Суммируя все вышеизложенное, можно сделать заключение, что восемь
экспериментальных условий могут быть выполнены, если минимальной моделью
зависимости v-f (MgATO, АТФ, Mg2+) считать вариант, изображенный на схеме
5. Малое количество ограничений (неравенств), которые удалось выявить, не
являются препятствием для этого. Однако следует подчеркнуть следующее
обстоятельство. Согласование форм экспериментальных кривых и расчетной
зависимости U=f(t, А, М) не нарушится, если допустить, что kpо = 0 и
[AL4Z?P]=0 (k"ps-0t = или Q = 0). Исходя из определения минимальной
модели, нужно было бы считать, что kpo - 0 и Q = 0. Однако допустив
существование SZfP-форм, ло-82
гично было допустить существование и МЛ/ГР-формы, тем более что прецедент
"сборки" комплекса MgATO на ферменте известен. Для допущения кр0ФО авторы
исходили из экспериментального факта существования К-зависимого
дефосфорилирования ЕР, а также уабаин-чувствительной Mg-АТФазы (3. П.
Кометиани и др. 1975).
Здесь не будет обсуждаться физическая сторона модели, так как это требует
привлечения обширного экспериментального материала по Na, К-АТФазе,
включая данные, полученные различными методами: использованием меченых
соединений, флуоресцентных меток и др. В данной главе была сделана
попытка относительно подробно описать процесс построения кинетической
схемы для субстратной зависимости Na, К-АТФазы как пример использования
принципов анализа сложных кинетических кривых, изложенных в предыдущих
главах. С этой же целью в гл. 6 будет рассмотрена зависимость скорости
реакции от концентрации ионов Na+ и К+, для анализа которой особое
значение преобретает применение степенного преобразования.
Кинетика действия модификаторов на транспортные АТФазы
6.1. Регуляция Na, К-АТФазной активности ионами натрия и калия
Из определения Na, К-АТФазы как ферментной системы, осуществляющей
транспорт ионов натрия и калия, следует, что Na+ и К+ одновременно должны
Предыдущая << 1 .. 22 23 24 25 26 27 < 28 > 29 30 31 32 33 34 .. 39 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed